本发明专利技术提供了一类1,5-二苯基吡唑-3-羧酸类化合物及其应用，所述化合物具有通式I的结构，其中：R1选自-H、卤素、C1～C6的饱和烷基或-X1-R4；R2选自H、卤素、C1～C6的饱和烷基或-X2-R5；R3选自H、-NH2或-NH-CO-Ph-(o﹑m﹑p)R6；R6选自H、卤素、C1～C6的饱和烷基或-O-R7；X1和X2分别独立选自O或S；R4、R5和R7分别独立选自H、C1～C6的饱和烷基、苄基或C1～C6的饱和烷基取代的苯基。本发明专利技术的化合物同时模拟BH3-only和p53TAD蛋白α-螺旋，竞争性结合和拮抗Mcl-1、Bcl-2和MDM2蛋白，特异性引起肿瘤细胞凋亡，实现其作为抗癌化合物的应用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一类新的1，5-二苯基吡唑-3-羧酸类化合物，还涉及该类化合物在体 外、体内同时模拟BH3-〇nly蛋白和p53TAD结构域的α -螺旋，竞争性结合和拮抗Bcl-2、 Mcl-I和MDM2蛋白，从而诱导细胞凋亡和作为抗癌化合物的应用。
技术介绍
Bcl_2 家族蛋白（B-cell lymphoma 2family of proteins)是内源细胞凋亡通路 又称作线粒体通路的顶点和核心因子。大量肿瘤细胞高表达Bcl-2蛋白，逃避凋亡，获得永 生。 p53是细胞内的转录因子，在细胞周期阻滞、细胞凋亡、DNA修复等细胞内生理过 程中发挥着关键的作用，是细胞内最重要的抑癌因子。 因此，使用多靶点药物同时抑制Bcl-2家族蛋白中的抗凋亡蛋白Mcl-l、Bcl-2,和 促进P53降解的泛素化E3连接酶MDM2,可以同时释放p53和下调Bcl-2蛋白，释放促凋亡 蛋白Bax、Bak，通过它们之间的正协同效应增强药物杀伤肿瘤细胞的能力。 其中，Bcl-2家族蛋白和p53/MDM2的相互作用的核心结构都为一段含两亲性残基 的α -螺旋，因此可以设计小分子同时模拟BH3-〇nly蛋白和p53TAD区域的α -螺旋，同时 竞争结合Mcl-I和Bcl-2蛋白的ΒΗ3沟槽和MDM2的p53TAD结合区域，达到同时释放ρ53 和Bax、Bak，从而杀伤肿瘤细胞的目的。
技术实现思路
本专利技术旨在获得可作为BH3、p53TAD的α -螺旋模拟物，能够同时靶向性和高亲和 力的抑制Bcl-2家族蛋白、p53/MDM2蛋白相互作用的化合物。 本专利技术的目的之一在于提供一类1，5-二苯基吡唑-3-羧酸类化合物，所述化合物 具有下述通式I的结构： 其中： R1选自-H、卤素、Cl~C6的饱和烷基或-X「R4; R2选自-H、卤素、Cl~C6的饱和烷基或-X2-R 5; R3选自-H、-NH 2或-NH-CO-Ph- (〇、m、p) R 6; R6选自-H、卤素、Cl~C6的饱和烷基或-O-R 7; XjP X 2分别独立选自0或S ; 心、1?5和R 7分别独立选自_H、C1~C6的饱和烷基、苄基或Cl~C6的饱和烷基取 代的苯基。 进一步地，所述私为-NH-CO-Ph- (〇、m、p) R 6。 进一步地，所述私和R 4分别独立选自Cl~C6的饱和烷基，R 5选自Cl~C6饱和 烷基取代的苯基。 进一步地，所述RjP R 6分别独立选自Cl~C6的饱和烷基。 进一步地，所述Cl~C6的饱和烷基选自甲基、乙基、异丙基、仲丁基或异丁基。 本专利技术中，所述NH-C〇-Ph-(o、m、p)R6中的〇、m、p是分别指邻位取代、间 位取代和对位取代。 本专利技术中，所述"Cl~C6的饱和烷基"，优选Cl~C5的饱和烷基、Cl~C4的饱 和烷基、Cl~C3的饱和烷基、甲基、乙基，其中所述烷基为直链烷基或支链烷基。 进一步地，在上述所述的技术方案中，具有通式I的结构的化合物包括如下的化 合物： 1-苯基-5-(-乙氧基苯基）吡唑-3-羧酸； 1- (4-苯氧基苯基）-5- (4-乙氧基苯基）吡唑-3-羧酸； 1- (4-异丙基苯基）-5- (4-异丙氧基苯基）吡唑-3-羧酸； 1- (4-苯氧基苯基）-5- (4-异丙氧基苯基）啦唑-3-羧酸； 4-苯甲酰胺基-1-(4-苯氧基苯基）-5-(4-乙氧基苯基）吡唑-3-羧酸； 4- (4-异丙氧基苯甲酰氨基）-1- (4-苯氧基苯基）-5- (4-乙氧基苯基）吡唑-3-羧 酸； 4- (4-异丙氧基苯甲酰胺基）-1- (4-苯氧基苯基）-5- (4-乙氧基苯基）吡唑-3-羧 酸； 4-(4-异丙氧基苯甲酰氨基）-1_ (4-苯氧基苯基）-5_ (4-节氧基苯基）R比唑-3-羧 酸； 4- (4-异丙氧基苯甲酰氨基）-1- (4-异丙基苯基）-5- (4-苄氧基苯基）吡唑-3-羧 酸； 1，5-二（4-溴苯基）吡唑-3-羧酸； 4- (4-氯苯甲酰胺基）-1，5-二（4-溴苯基）吡唑-3-羧酸； 4- (4-苯基苯甲酰氨基）-1- (4-苯琉基苯基）-5- (4-异丙基苯基）吡唑-3-羧酸； 4-(4-叔丁基苯甲酰氨基）-1-(4-甲基苯基）-5-(4-异丙基苯基）吡唑-3-羧酸； 本专利技术的另一目的是提供上述化合物的制备方法，包括如下步骤： (1)将4-?-苯乙酮与乙二酸二甲酯按投料摩尔比1:1. 2-1. 5,在碱性试剂存在 下，冰浴中反应5_8h，制备得2, 4-二氧代-4-(4-?-苯基）_ 丁酸甲酯，其中反应溶剂为四 氢呋喃，碱性试剂为叔丁醇钾； (2)将4-R2-苯胺与NaNO2按摩尔投料比1:1:2-1. 5,冰浴下反应0. 5小时，并直接 加入还原剂反应4-6h，得4-R2-苯肼盐酸盐；其中反应溶剂为浓盐酸，还原剂为SnCl 2; (3)2, 4-二氧代-4-(4-?-苯基）-丁酸甲酯与4-R2-苯肼盐酸盐按摩尔投料比 I: I. 4-1. 6经环化反应制得私为H的化合物II，其中溶剂为甲醇，反应温度60-65°C ; (4)化合物II经碱性水解反应得私为H的化合物I，其中碱为KOH或NaOH，化合物 II与所述碱的摩尔投料比1:5-10,溶剂为甲醇，反应温度60-65Γ ; (5)2, 4-二氧代-4-(4-?-苯基）-丁酸甲酯先由N2O3取代，再在原反应容器中 直接加入4-R 2-苯肼盐酸盐，经环化、还原反应得到私为NH 2的化合物II，其中2, 4-二氧 代-4-(4-?-苯基）-丁酸甲酯与4-R2-苯肼盐酸盐的摩尔投料比为1:3,溶剂为甲醇，还原 剂为连二亚硫酸钠，环化反应温度60-65Γ，取代、还原反应温度为室温； (6)将R3为NH 2的化合物II与R 6C0C1按摩尔投料比I: L 2-1. 5,在缚酸剂存在下， 冰浴反应3-6h ;得私为-NH-CO-Ph- (〇、m、p) R 6的化合物II，其中反应溶剂为四氢呋喃， 缚酸剂为三乙胺； (7) R3为-NH-CO-Ph- (〇、m、p) R 6的化合物 II 和 NaOH 按摩尔投料比 1:10-1:20， 在冰浴下反应10_20h，得R3S-NH-C0-Ph-(〇、m、？)1? 6的化合物I，反应溶剂为质量比为 1:1-2:1的四氢呋喃和水的混合溶剂； (8) R3为NH 2的化合物II和NaOH按摩尔投料比1:10-1:20,在(TC下反应10_20h， 得私为NH 2的化合物I，反应溶剂为质量比为1:1-2:1的四氢呋喃和水的混合溶剂。 在上述制备方法的描述中，各个取代基的定义，均与上述对化合物的描述中的定 义相同。 对通过上述方法获得的化合物，通过多种手段检测了它们的BH3、p53TAD结构域 的α -螺旋类似程度，以及他们对Mcl-1、Bcl-2和MDM2的抑制能力。结果表明，本专利技术的 上述具有新的结构的化合物具有极高的BH3和p53TAD结构域的α -螺旋类似程度，可以有 效的抑制Mcl-l、Bcl-2和MDM2蛋白。 对上述化合物，通过细胞实验检测了它们对多种肿瘤细胞系的抑制作用。结果表 明，本专利技术的上述化合物可以很好的诱导多种肿瘤细胞系凋亡，而对正常细胞没有杀伤作 用。 基于此，本本文档来自技高网...
【技术保护点】
一类1,5‑二苯基吡唑‑3‑羧酸类化合物，具有如下结构通式Ⅰ：其中：R1选自‑H、卤素、C1～C6的饱和烷基或‑X1‑R4；R2选自‑H、卤素、C1～C6的饱和烷基或‑X2‑R5；R3选自‑H、‑NH2或‑NH‑CO‑Ph‑(o﹑m﹑p)R6；R6选自‑H、卤素、C1～C6的饱和烷基或‑O‑R7；X1和X2分别独立选自O或S；R4、R5和R7分别独立选自‑H、C1～C6的饱和烷基、苄基或C1～C6的饱和烷基取代的苯基。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张志超，王紫千，宋婷，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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