基于磁珠法快速纯化特异性扩增PCR产物的方法技术

本发明专利技术提供一种基于磁珠法快速纯化特异性扩增PCR产物的方法。所述的方法首先将特异性扩增的PCR产物吸至离心管中，加入Buffer A，震荡、室温放置5min，在磁力架上进行磁珠分离；待磁珠吸附到离心管一侧时吸去液体；往含有磁珠的离心管中加入Buffer B,静止8min，在磁力架上进行磁珠分离；待磁珠吸附到离心管一侧时吸去液体，保留磁珠；加入Buffer C，在磁力架上进行磁珠分离，待磁珠吸附到离心管一侧时吸取溶液，即为回收后的PCR产物。使用磁珠法来纯化特异性扩增PCR产物，整个流程方便快捷，与常规纯化方法相比，本方法显得更加方便、快捷，不需要使用到离心机等设备。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种基于磁珠法快速纯化特异性扩增PCR产物的方法，属于生物
技术背景PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性一退火一延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93°C左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55°C左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸:DNA模板一引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性一退火一延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2?4分钟，2?3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。通过PCR获得的目的基因需要进一步纯化，这是因为PCR反应体系中含有dNTP、Mg2+、DNA聚合酶等物质，这些物质会对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于磁珠法快速纯化特异性扩增PCR产物的方法，主要包括利用磁珠法快速纯化PCR产物，其特征在于：将特异性扩增的PCR产物吸至1.5ml离心管，加入等体积的 Buffer A，震荡10s，室温放置5min；将离心管放在磁力架上，进行磁珠分离，待磁珠吸附到离心管一侧时，吸去液体，保留磁珠，往含有磁珠的离心管中加入1mlBuffer B,打匀后室温静止8min，将离心管放在磁力架上，进行磁珠分离，待磁珠吸附到离心管一侧时，吸去液体，保留磁珠，往含有磁珠的离心管中加入50μl Buffer C,将离心管放在磁力架上，进行磁珠分离，待磁珠吸附到离心管一侧时吸取溶液，此溶液即为回收后的PCR产物，最后...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王清水，余彦，
申请(专利权)人：福建师范大学，
类型：发明
国别省市：福建;35