绵羊FecB基因原核表达载体的构建方法技术

技术编号:12343114 阅读:63 留言:0更新日期:2015-11-18 16:42
本发明专利技术涉及基因引物设计及载体构建方法。一种绵羊FecB基因原核表达载体的构建方法,其特征在于通过反转录PCR扩增FecB基因片段,反转录PCR扩增方法为:94℃预变性4min;94℃40s,59℃40s,72℃1min 50s,35个循环,72℃10min,4℃保存;1%的琼脂糖检测。一种绵羊FecB基因原核表达载体的构建方法,其特征在于通过反转录PCR扩增FecB基因片段,反转录PCR扩增方法为:94℃预变性4min;94℃40s,59℃40s,72℃1min 50s,35个循环,72℃10min,4℃保存;1%的琼脂糖检测。本发明专利技术构建了FecB基因的原核表达载体,该重组载体转化入感受态大肠杆菌BL21(DE3)体内后经过诱导可体外表达出FecB蛋白,免除了从组织中提取蛋白的繁琐步骤。为研究该蛋白创造有效途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因引物设计及载体构建方法。
技术介绍
FecB基因是在Booroola Merino羊中发现的与高繁殖率相关的主效基因, FecB基因位于绵羊6号常染色体,对绵羊的排卵率及产羔数有很大影响,(Souza C J,MacDougall C,Campbell B K,et al. The Booroola (FecB)phenotype is associated with a mutation in the bone morphogenetic receptor type IB(BMPR1B)gene . Journal of Endocrinology,2001, 169(2):R1-R6。 MCNATTY K P,SMITH P,HUDS0N N L, et al. 0 ff-S and Braw Tal R. Development of the sheep ovary during fetal and early neonatal life and the effect of fecundity genes. Journal of Reproduc本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种绵羊FecB基因原核表达载体的构建方法,其特征在于通过反转录PCR扩增FecB基因片段,反转录PCR扩增方法为:94℃预变性4min;94℃40s,59℃40s,72℃1min 50s,35个循环,72℃10min,4℃保存;1%的琼脂糖检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张利平丁强张勇吴建平赵生国贾建磊王静马晓明
申请(专利权)人:甘肃农业大学
类型:发明
国别省市:甘肃;62

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