一种从卵叶蜘蛛抱蛋植物中提取分离的活性成分及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种苯骈香豆素类化合物及简单植物源氧杂蒽酮类化合物的制备方法和用途。本发明专利技术采用卵叶蜘蛛抱蛋（Aspidistra typica Baill.）生产出结构新颖的苯骈香豆素类化合物及简单植物源氧杂蒽酮类化合物。经实验证实，上述化合物可作为医药抑菌制剂。

【技术实现步骤摘要】
一种从卵叶蜘蛛抱蛋植物中提取分离的活性成分及其应用
本专利技术涉及用卵叶蜘蛛抱蛋（AspidistratypicaBaill.）（保藏编号是：No.20140316-1）生产简单植物源氧杂蒽酮类化合物及新型苯骈香豆素类化合物的方法；本专利技术还涉及此两类化合物在制备抗菌制剂中的用途，属于药学领域。
技术介绍
卵叶蜘蛛抱蛋（学名：AspidistratypicaBaill.）为天门冬科蜘蛛抱蛋属植物,根状茎较粗，近圆柱形。叶2-3枚簇生，卵圆状披针形至卵形；叶柄明显，坚硬。总花梗常呈簇抽出，纤细；苞片3-5枚，卵形；花被坛状，外面有紫色细点，内面深紫色；裂片卵形，较短；雄蕊6枚，几无花丝；子房短，花柱粗短，无关节；柱头大，圆形，呈盾状膨大。浆果球形。花期8-9月。产云南和关西等西南部，也分布于越南。生于深山密林中、山谷、溪边湿润处。卵叶蜘蛛抱蛋的药理活性及其活性成分的研究鲜有报道，现有研究仅从其中分离得到其中甾体皂皂苷类成分。而其民间广泛药用其根茎，称其活血化瘀，解毒止痛效果良好，主治肾亏，腰痛，风湿性疼痛，机体跌打损伤等，但其活性成分并无系统研究。本专利技术人首次从中分离出结构新颖的苯骈香豆素类化合物和简单植物源氧杂蒽酮类化合物。研究发现所示含苯骈香豆素类化合物和植物源氧杂蒽酮类化合物具有良好的抗菌活性，目前尚未见对新型苯骈香豆素化合物的结构及其抗菌活性的报道，也未见植物源氧杂蒽酮类化合物抗革兰氏阴性菌活性的报道，因此市场上也尚未有与此有关的药物。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种结构独特的具有良好抗菌活性作用的新化合物，其结构式如下：式I其结构特征是：R1为氨基、氢、羟基、C1-10烷氧基、C1-10酰氧基或C1-10酰胺基；R2为甲基；R3为氨基、氢、羟基、C1-10烷氧基、C1-10酰氧基或C1-10酰胺基。本专利技术优选的式I化合物为R1为羟基，R2为甲基，R3为羟基。本专利技术旨在还提供一种简单植物源氧杂蒽酮类化合物，所述化合物具有良好抗菌活性作用，其结构式如下：式II其结构特征是：R1为氨基、氢、羟基、C1-10烷氧基、C1-10酰氧基或C1-10酰胺基；R2为甲基；R3为氨基、氢、羟基、C1-10烷氧基、C1-10酰氧基或C1-10酰胺基。本专利技术优选的式II化合物为R1为羟基，R2为甲基，R3为羟基。本专利技术所述的C1-10烷氧基优选C1-6烷氧基，更优选甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，异丙氧基，戊氧基，己氧基等；本专利技术所述的C1-10酰氧基优选C1-6酰氧基，更优选甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基，异丙酰氧基，戊酰氧基，己酰氧基等；本专利技术所述的C1-10酰胺基优选C1-6酰胺基，更优选甲酰胺基、乙酰胺基、丙酰胺基、丁酰胺基，异丙酰胺基，戊酰胺基，己酰胺基等；本专利技术式I中的部分化合物可通过以下方法制备得到：，其中R为氨基、C1-10烷氧基、C1-10酰氧基或C1-10酰胺基本专利技术式II中的部分化合物可通过以下方法制备得到：，其中R为氨基、C1-10烷氧基、C1-10酰氧基或C1-10酰胺基本专利技术式I和II中的部分化合物可通过提取蜘蛛抱蛋属植物根茎来获得含活性成分化合物的提取物，然后从提取物中采用硅胶柱层析、制备薄层层析等方法分离纯化得到。本专利技术式I和II化合物优选以下方法制备得到：（1）选取卵叶蜘蛛抱蛋的根茎为原料，使用乙醇（优选70%）进行超声提取，过滤，滤去药渣，滤液合并减压浓缩至浸膏，无醇味；然后把浓缩物分散于水中，用石油醚（沸程30~60℃）、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，萃取后分别减压浓缩，得各溶剂的浸膏；（2）选取卵叶蜘蛛抱蛋氯仿浸膏为样品，经硅胶柱层析，并使用氯仿和甲醇的混合溶剂为洗脱溶剂，以薄层色谱为检测手段，洗脱液浓缩、合并得Fr.A1～Fr.A5五个部分；（3）选取Fr.A2部分为样品，并使用硅胶拌样，进行硅胶柱层析，用氯仿：甲醇（300:1～10:1）系统进行梯度洗脱，所得分离样品分为Fr.A2-1、Fr.A2-2以及Fr.A2-3三部分；（4）选取Fr.A2-2为样品，经硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯（200:1～3:1）为洗脱剂进行纯化，得到化合物II（卵叶香豆素甲）；（5）选取Fr.A2-1为样品，经硅胶柱层析再次纯化，得到化合物I卵叶氧杂蒽酮甲。本专利技术的下述实例中列举了利用卵叶蜘蛛抱蛋（AspidistratypicaBaill.）（保藏编号是：No.20140316-1）根茎，制备专利技术式化合物I和II的实例。附图说明图1卵叶蜘蛛抱蛋根极性部位提取流程。图2化合物I的2D-NMR数据(1H:600MHz;13C:150MHz)。图3化合物II的2D-NMR数据(1H:600MHz;13C:150MHz)。图4卵叶香豆素甲、卵叶氧杂蒽酮甲及其衍生物的对革兰氏阳性菌的最低抑菌浓度（MIC值）。图5卵叶香豆素甲、卵叶氧杂蒽酮甲及其衍生物对革兰氏阴性菌的最低抑菌浓度（MIC值）。图6卵叶香豆素甲、卵叶氧杂蒽酮甲及其衍生物的最小杀菌浓度（MBC值）。具体实施方案：实施例1：在如下的实施例中所指的化合物I的结构式：化合物I1浸膏的制备卵叶蜘蛛抱蛋根茎干燥切片5.55Kg，70%乙醇超声提取3次（质量体积比为1：30），每次超声1小时。滤去药渣，滤液合并减压浓缩至浸膏，无醇味；然后把浓缩物分散于水中，用石油醚（沸程30~60℃）、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次分别萃取3次，分别50℃减压浓缩，得各部分浸膏。合并氯仿部位浓缩干燥得21.14g，乙酸乙酯部位13.43g(见图1）。2化合物的分离精制卵叶蜘蛛抱蛋氯仿部分21.14g，经硅胶柱层析(硅胶H，200～300目，420g，氯仿：甲醇500:1～10:1洗脱)，薄层色谱（TLC）检测，洗脱液浓缩并合并得Fr.A1～Fr.A5五个部分。Fr.A2部分为浅黄色粉末状，约5.4g，以硅胶（100-200目）拌样，风干进行H硅胶柱层析，用氯仿：甲醇（300:1～10:1）系统进行梯度洗脱，每75ml接一瓶。得到三个部分，Fr.A2-2经H硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯（200:1～3:1）体系洗脱，得到化合物2（卵叶香豆素甲），约12mg。白色无定形粉末，分子式C14H10O4，熔点182～183°C，旋光度-1.658(c1.00,MeOH)，IR(KBr)cm-1：3468,1638；HR-ESI-MSm/z：实测值241.0500[M-H]+；计算为C14H9O4，241.0477；1HNMRand13CNMR(400Hz，CDCl3)：见图2。实施例2：在如下的实施例中所指的化合物II的结构式：化合物II1浸膏的制备同实施例1。2化合物的分离精制卵叶蜘蛛抱蛋氯仿部分21.14g，经硅胶柱层析(硅胶H，200～300目，420g，氯仿：甲醇500:1～10:1洗脱)，薄层色谱（TLC）检测，洗脱液浓缩并合并得Fr.A1～Fr.A5五个部分。Fr.A2部分为浅黄色粉末状，约5.4g，以硅胶（100-200目）拌样，风干进行H硅胶柱层析，用氯仿：甲醇（300:1～10:1）系统进行梯度洗脱，每75ml接一瓶。得到三个部分，Fr.A2-1再次经H硅胶柱层析，TLC检识其纯度后，得到化合物I卵叶氧杂蒽酮甲，约35mg。黄色无定形粉末，分子式本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式I化合物：              I其特征在于： R1 为氨基、氢、羟基、C1‑10烷氧基、C1‑10酰氧基或C1‑10酰胺基；R2为甲基；R3为氢、羟基、C1‑10烷氧基、C1‑10酰氧基或C1‑10酰胺基。

【技术特征摘要】
1.通式I化合物：I其特征在于：R1为羟基、R2为甲基、R3为羟基;R1为乙酰氧基、R2为甲基、R3为羟基；或者R1为甲氧基、R2为甲基、R3为甲氧基。2.根据权利要求1所述的化合物，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁晓霞，费文波，孔令茜，贺常亮，殷中琼，吕程，林居纯，尹力子，邹元峰，何敏，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：四川;51