本发明专利技术提供了一种戴氏绿僵菌MTYJ141025及其应用，该戴氏绿僵菌MTYJ141025于2014年12月4日保藏于中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No. 10140。本发明专利技术是初次从危害甘蔗的蔗锯天牛幼虫体上分离得到的菌株，培养比较简单，生长快速，对蔗根锯天牛幼虫的毒力强。其分生孢子对甘蔗锯天牛幼虫致病力强，环保无污染、不易产生抗药性，可以广泛地用于甘蔗蔗根锯天牛的防治。
【技术实现步骤摘要】
： 本专利技术属于微生物
，尤其涉及一种戴氏绿僵菌（Metarhiziumtaii Liang&Liu)MTYJ141025 及其应用。
技术介绍
： 鹿根据天牛隶属于鞘翅目（Coleoptera) 天牛科（Cerambycidae)，广泛分布于广西、广东、海南及云南等主要甘鹿产区，是危害甘鹿 的重要害虫，主要以幼虫咬食甘蔗根茎部及主根，导致甘蔗整株死亡，严重影响甘蔗生产。 由于甘蔗多为宿根蔗，再加上随着甘蔗大面积的连作种植，蔗根锯天牛的发生危害日趋严 重，目前主要采取以农药防治为主的防治措施。化学农药虽然具有见效快，但化学农药的施 用不仅会造成甘蔗农药残留及严重的环境污染，而且易杀死蔗根锯天牛的自然天敌，并使 目标害虫产生抗药性，因而不符合害虫治理的可持续性及生态控制的要求。而生物防治措 施具有生态、持续控制的特点，因而生物防治则是蔗根锯天牛生态、持续控制的重要途径。 昆虫病原真菌因其具有自然流行性强、不染污环境、对人、畜、植物安全，害虫极少或不产生 抗性，有利于环境保护的特点，成为害虫生物防治的重要措施。因此，研究蔗根锯天牛的生 防真菌，为蔗根锯天牛的生物防治提供依据，也为减少化学防治所带来的抗药性及环境污 染提供保障。 戴氏绿僵菌（MetarhiziumtaiiLiang&Liu)属于接合菌亚门丝孢纲丝孢目绿僵 菌属。据记载，戴氏绿僵菌的寄主为一种鳞翅目夜蛾幼虫，而对蔗根锯天牛的侵染还未见报 道。
技术实现思路
： 本专利技术的目的在于提供一种戴氏绿僵菌MTYJ141025及其应用，旨在克服现有戴 氏绿僵菌未发现能寄生蔗根锯天牛的不足，通过生物技术手段防治蔗根锯天牛，避免或减 少因不合理使用化学农药所带来的抗药性问题。 本专利技术是这样实现的，一种戴氏绿僵菌（MetarhiziumtaiiLiang&Liu) MTYJ141025,于2014年12月4日保藏于中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心，保藏 号为CGMCCNo. 10140,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。 本专利技术的进一步的目的在于提供上述戴氏绿僵菌MTYJ141025在蔗根锯天牛防治 方面的应用。本专利技术于2013年8月，在云南省元江县甘蔗田间调查时发现戴氏绿僵菌在蔗 根锯天牛中大量发生流行，引起大量蔗根锯天牛感染死亡。因此，该菌株是目前国内首次发 现的寄生蔗根锯天牛、流行性很强的虫生真菌，在防治蔗根锯天牛中具有很大的开发应用 前景。 本专利技术从罹病蔗根锯天牛幼虫上分离获得戴氏绿僵菌野生菌株，将野生菌株回接 于蔗根锯天牛幼虫上复壮得到戴氏绿僵菌菌株，对该菌株采用按常规方法进行单孢分离、 培养得到纯的、致病力强的戴氏绿僵菌。在SDAY培养基上菌落平展，绒毛状，中部白色其外 为墨绿色产孢轮带，边缘绿豆汁黄，背面芥黄轮带。瓶梗柱状，具短尖8. 4 - 20X1-1. 5ym， 单生于气生菌丝或紧密地轮生于分生孢子梗及原瓶梗上，也可通过微循环产孢子从 次生子囊孢子产生。分生孢子柱状，中部稍缢缩，两端圆或一端变细尖（4. 8-)7. 8~ 9. 6 (-14)X2. 5~3ym，偶有双细胞分生孢子13X3ym。由微循环产孢形成的分生孢子，其 形状和大小基本与前者相同，7. 2-9X2. 5ym。 相比于现有技术的缺点和不足，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术是初次从戴氏 绿僵菌体上分离得到的菌株，培养比较简单，生长快速，产孢量大。其分生孢子对蔗根锯天 牛幼虫致病力强，环保无污染、不易产生抗药性，可以广泛地用于蔗根锯天牛的防治。【具体实施方式】： 为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术 进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于 限定本专利技术。 实施例一、病原菌的分离、鉴定 1.1材料与方法 1. 1. 1 材料 在云南省元江县采集到被一种虫生真菌侵染后的罹病蔗根锯天牛幼虫。 萨氏培养基（SDAY) :1%蛋白胨+1%酵母粉+4%葡萄糖+1. 5-2%琼脂粉+1000ml 水。 无菌操作条件：所有的器皿和用具均经高温灭菌锅（12rC，30min)，接种等操作 均在超净工作台内进行。 培养条件：置于28°C光照（12L:12D)恒温箱中培养，待菌落形成后，转移到试管 SDAY斜面，培养2-3天，转入4 °C冰箱储存。 LL2病原菌的分离和纯化 分离：从罹病蔗根锯天牛幼虫尸体上分离病原菌。将蔗根锯天牛幼虫罹病虫体带 回实验室，将罹病蔗根锯天牛幼虫尸按顺序依次经过70%酒精浸泡30秒、再经过0. 1 %升 汞溶液浸泡3分钟（彻底消毒）、最后用无菌水冲洗三次，再用接种针取处理好的蔗根锯天 牛幼虫组织接种于SDAY培养基上。在温度为28°C条件下培养，长出菌丝后按常规方法进行 单孢分离、培养得到纯的、产孢能力强的菌株戴氏绿僵菌MetarhiziumtaiiLiang&Liu，转 移到SDAY斜面上生长3-4天，在4°C冰箱储存。 复壮：将分离到的菌株在SDAY上培养2-3天后，产生大量分生孢子，再将该分生孢 子挑入含1%吐温-80的无菌水，用玻璃棒搅拌均匀，得到适当浓度（10s孢子/ml)的孢子 悬浮液，用小型喷雾器均匀喷于家蝇成虫体表（以虫体表面湿润为度），保持相对湿度80% 以上。收集死虫并保湿，得到的幼虫虫尸再按以上方法分离得到致病力更强的菌株。 纯化：挑取培养基上分生孢子粉，再次接种在新的培养基上。如此培养2~3代， 菌株就被纯化。 1.1. 3病原菌的鉴定 根据病原菌的培养性状、菌丝和分生孢子的形态进行鉴定。利用40X10倍显光学 微镜，镜检菌丝、分生孢子和分生孢子梗的形态。 1. 2 结果 从被虫生真菌自然侵染的蔗根锯天牛幼虫体上分离获得野生菌株，在萨氏琼脂培 养基（SDAY)上培养，并回接于蔗根锯天牛幼虫复壮获得一菌株，对该菌株进行单菌丝分离 获得纯化的菌株，即戴氏绿僵菌MetarhiziumtaiiLiang&LiuMTYJ141025。 在SDAY培养基上菌落平展，绒毛状，中部白色其外为墨绿色产孢轮带，边缘绿 豆汁黄，背面芥黄轮带。瓶梗柱状，具短尖8. 4 - 20当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种戴氏绿僵菌MTYJ141025，于2014年12月4日保藏于中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.10140。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈斌，肖关丽，杜广祖，张立敏，和淑琪，郑亚强，桂富荣，昝庆安，李正跃，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：云南;53
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