本发明专利技术公开了一种辅助鉴定油菜渐渗后代C基因组的成套引物及其应用。本发明专利技术的成套引物由引物对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对6和引物对7组成。通过实验证明：本发明专利技术的7对引物可以用来鉴定油菜渐渗后代是否含有C基因组，且具有准确、快速、稳定、操作简单、低成本等特点，为油菜渐渗体系快速监测及安全评估体系、油菜品种选育及野芥菜防治提供了便捷的技术平台，应用前景良好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体涉及一种辅助鉴定油菜渐渗后代C基因组的成套 引物及其应用。
技术介绍
油菜是一种重要的油料作物，在国内栽培很广。甘蓝型油菜（B. napus, AACC，2n = 38)由二倍体甘蓝（B.oleracea，CC，2n= 18)和芸薹或称宪菁（B.campetris/rapa，AA，2n =20)杂交并经长期进化而形成；芥菜型油菜（B. juncea，AABB，2n = 36)则由具有BB基因 组的黑芥（B.nigra，2n= 16)与芸薹杂交进化而成。甘蓝型油菜、二倍体甘蓝、芸薹、芥菜 型油菜和黑芥5个种之间互有亲缘关系，可进行近缘种杂交。Truco等（1996)认为芸薹属 A、B、C基因组有着共同的起源。其中，A与C的同源性最高，B与C次之，A与B最低。这种 同源性的差异在杂交亲和力上则表现为油菜与芸薹的亲和力最高。 甘蓝型油菜和芥菜型油菜是芸薹属中两个最重要的品种。甘蓝型油菜（含有C基 因组）是常异花授粉植物，可以与多种近缘种群产生杂交，易向亲和性好的野生近缘种发 生基因流动。芥菜型油菜（不含有C基因组）具有许多甘蓝型油菜没有的优良特性，如分 枝发达、抗裂荚、抗病、含油量高等。野芥菜是我国农田、荒地普遍存在的一种重要杂草，种 类繁多，危害小麦、青稞、油菜、蚕豆和豌豆等多种作物甚至还危害夏秋季作物。如果甘蓝型 油菜栽培种能通过花粉传播流动到野芥菜中，并能提高野芥菜的适合度，将可能增加野芥 菜的生存竞争力，而为有效防治野芥菜带来更大困难。鉴于芸薹属近缘种之间的基因渐渗 和基因流，在油菜品种选育和野芥菜防治过程中，分析甘蓝型油菜和芥菜渐渗后代的C基 因组成分具有非常重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代是否含有C基因 组的成套引物。 本专利技术提供的鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代是否含有C基因组的成套引物由引 物对（1)-(7)组成： (1)为由SEQ ID No. 1所示的单链DNA和SEQ ID No. 2所示的单链DNA组成的引 物对1 ; (2)为由SEQ ID No. 3所示的单链DNA和SEQ ID No. 4所示的单链DNA组成的引 物对2 ; (3)为由SEQ ID No. 5所示的单链DNA和SEQ ID No. 6所示的单链DNA组成的引 物对3 ; (4)为由SEQ ID No. 7所示的单链DNA和SEQ ID No. 8所示的单链DNA组成的引 物对4 ; (5)为由SEQ ID No. 9所示所示的单链DNA和SEQ ID No. 10所示的单链DNA组成 的引物对5 ; (6)为由SEQ ID No. 11所示的单链DNA和SEQ ID No. 12所示的单链DNA组成的 引物对6 ; (7)为由SEQ ID No. 13所示的单链DNA和SEQ ID No. 14所示的单链DNA组成的 引物对7。 本专利技术的第二个目的是提供一种鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代是否含有C基因 组的成套PCR试剂。 本专利技术提供的鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代是否含有C基因组的成套PCR试剂由 PCR试剂I、PCR试剂2、PCR试剂3、PCR试剂4、PCR试剂5、PCR试剂6和PCR试剂7组成； 所述PCR试剂1包括上述成套引物中的引物对1 ; 所述PCR试剂2包括上述成套引物中的引物对2 ; 所述PCR试剂3包括上述成套引物中的引物对3 ; 所述PCR试剂4包括上述成套引物中的引物对4 ; 所述PCR试剂5包括上述成套引物中的引物对5 ; 所述PCR试剂6包括上述成套引物中的引物对6 ; 所述PCR试剂7包括上述成套引物中的引物对7。 上述成套PCR试剂中，所述引物对1、所述引物对2、所述引物对3、所述引物对4、 所述引物对5、所述引物对6和所述引物对7中的各条引物的终浓度均为lOumol/L。 本专利技术的第三个目的是提供一种含有上述成套引物或上述成套PCR试剂的试剂 盒。 上述成套引物或上述成套PCR试剂或上述试剂盒在鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后 代是否含有C基因组中的应用也属于本专利技术的保护范围。 上述成套引物或上述成套PCR试剂或上述试剂盒在制备鉴定或辅助鉴定油菜渐 渗后代是否含有C基因组的产品中的应用也属于本专利技术的保护范围。 上述成套引物或上述成套PCR试剂或上述试剂盒在鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后 代为甘蓝型油菜还是芥菜型油菜中的应用也属于本专利技术的保护范围。 上述成套引物或上述成套PCR试剂或上述试剂盒在制备鉴定或辅助鉴定油菜渐 渗后代为甘蓝型油菜还是芥菜型油菜的产品中的应用也属于本专利技术的保护范围。 本专利技术的第四个目的是提供一种鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代是否含有C基因 组的方法。 本专利技术提供的鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代是否含有C基因组的方法包括如下 步骤： 用上述成套引物中的引物对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对6和 引物对7分别对待测油菜渐渗后代进行PCR扩增，分别得到所述待测油菜渐渗后代的7对 引物对的PCR扩增产物；检测所述7对引物对的PCR扩增产物的大小； 若所述7对引物对的PCR扩增产物满足如下1)-7)至少一种条件： 1)所述引物对1对应的PCR扩增产物含有大小为333bp的片段； 2)所述引物对2对应的PCR扩增产物含有大小为303bp的片段； 3)所述引物对3对应的PCR扩增产物含有大小为157bp的片段； 4)所述引物对4对应的PCR扩增产物含有大小为295bp的片段； 5)所述引物对5对应的PCR扩增产物含有大小为333bp的片段； 6)所述引物对6对应的PCR扩增产物含有大小为168bp的片段； 7)所述引物对7对应的PCR扩增产物含有大小为194bp的片段； 则所述待测油菜渐渗后代含有或候选含有C基因组； 若所述7对引物对的PCR扩增产物均不满足上述1)-7)任一种，则所述油菜渐渗 后代不含有或候选不含有C基因组。 本专利技术的第五个目的是提供一种鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代为甘蓝型油菜还 是芥菜型油菜的方法。 本专利技术提供的鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代为甘蓝型油菜还是芥菜型油菜的方 法包括如下步骤： 用上述成套引物中的引物对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对6和 引物对7分别对待测油菜渐渗后代进行PCR扩增，分别得到所述待测油菜渐渗后代的7对 引物对的PCR扩增产物；检测所述7对引物对的PCR扩增产物的大小； 若所述7对引物对的PCR扩增产物满足如下1) -7)至少一种条件： 1)所述引物对1对应的PCR扩增产物含有大小为333bp的片段； 2)所述引物对2对应的PCR扩增产物含有大小为303bp的片段； 3)所述引物对3对应的PCR扩增产物含有大小为157bp的片段； 4)所述引物对4对应的PCR扩增产物含有大小为295bp的片段； 5)所述引物对5对应的PCR扩增产物含有大小为333bp的片段； 6)所述引物对6对应的PCR扩增产物含有大小为168bp的片段； 7)所述引物对7对应的PCR扩增产物含有大小为194bp的片段； 则所述待测油菜渐渗后代为或候选为甘蓝型油菜； 若所述7对引物对的PCR扩增产物均不满足上述1)-7)任一种，则所述油菜渐渗 后代为或候选本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种鉴定或辅助鉴定油菜渐渗后代是否含有C基因组的成套引物，由引物对(1)‑(7)组成：(1)为由SEQ ID No.1所示的单链DNA和SEQ ID No.2所示的单链DNA组成的引物对1；(2)为由SEQ ID No.3所示的单链DNA和SEQ ID No.4所示的单链DNA组成的引物对2；(3)为由SEQ ID No.5所示的单链DNA和SEQ ID No.6所示的单链DNA组成的引物对3；(4)为由SEQ ID No.7所示的单链DNA和SEQ ID No.8所示的单链DNA组成的引物对4；(5)为由SEQ ID No.9所示所示的单链DNA和SEQ ID No.10所示的单链DNA组成的引物对5；(6)为由SEQ ID No.11所示的单链DNA和SEQ ID No.12所示的单链DNA组成的引物对6；(7)为由SEQ ID No.13所示的单链DNA和SEQ ID No.14所示的单链DNA组成的引物对7。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：关正君，魏伟，霍艳林，唐治喜，
申请(专利权)人：中国科学院植物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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