一种齐墩果酸内酯类衍生物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种齐墩果酸内酯类衍生物，如齐墩果烷-28-β-内酯，其制备步骤：先将齐墩果酸和碳酸氢钠依次加入到DMSO中，然后滴加4-(溴甲基)氧杂环丁烷-2-酮，室温下搅拌；反应完毕后，加入水，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸镁干燥，减压浓缩得到粗产品，纯化即可。体外实验证明齐墩果酸内酯类衍生物具有减肥作用，其作用机理是通过抑制胰脂肪酶来达到减肥作用，其作用类型为竞争性抑制类型。齐墩果烷-28-β-内酯抑酶活性(IC50:16.4μmol·L-1)为齐墩果酸抑酶活性(IC50:87.7μmol·L-1)的5.35倍。该类衍生物可在制备新型胰脂肪酶抑制剂类减肥药物和减肥保健品中应用。

【技术实现步骤摘要】
一种齐墩果酸内酯类衍生物及其制备方法和应用
本专利技术涉及齐墩果酸内酯类衍生物，具体属于一种齐墩果酸内酯类衍生物及其制备方法，以及其在制备减肥药物和减肥保健品中的应用。
技术介绍
肥胖已成为全球最大慢性疾病[HaslamDW等,Lancet,2005,366:1197-1209]，可引起II型糖尿病、心脑血管疾病、胆囊疾病、骨关节炎、阻塞性睡眠呼吸暂停、癌症等，每年至少340万成人死于超重或肥胖[BareticM等，DigestDisSci.,2012,30(2):168-172；DerosaG等,ExpertOpinDrugSaf.,2012,11(3),459-471]。目前，奥利司他(Orlistat)作为唯一一种长效减肥药物，仍存在较大副作用，尤其会造成肝功能损伤[DerosaG等,ExpertOpinDrugSaf.,2012,11(3),459-471；MaryBC等，CaseManager.,2004,15(6):47-49]，而从天然植物中直接分离得到的化合物，减肥效果普遍较低，所以有必要对其进行结构改造以提高它们的活性。齐墩果酸(Oleanolicacid)是自然界中含量最丰富的五环三萜类化合物，主要存在于油橄榄、夏枯草、怀牛漆、连翘、青叶胆和女贞等植物中[LiuJ等，J.Ethnopharmacol.，1995,49(2):57-61；孟艳秋等，药学学报，2015,50(4):469-474]，具有抑制胰脂肪酶(Pancreaticlipase,PL)、降血糖、抗肿瘤、抗HIV、保肝、抗炎等多种药理作用，且副作用小[唐初等，有机化学，2013,33:46-65；李文良等，中国药物化学杂志，2014,24:7-13；马学惠等，药学学报，1982,17:93-97]，是一理想的结构改造目标。PL由胰腺分泌到十二指肠，可水解50％-70％的食物脂肪成甘油一酯和脂肪酸，抑制PL活性可阻止脂肪分解，进而使其直接通过消化道排出体外，从而达到减肥目的。由于该酶抑制剂直接在肠道内起作用，不需肠吸收，因而副作用较小，所以PL抑制类药物研发成为一种重要研究方向。本专利技术以PL作为药物筛选靶标，以齐墩果酸为先导化合物，设计合成全新的齐墩果酸内酯类衍生物，并就其减肥作用机理，即抑制胰脂肪酶作用及抑制类型进行了研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种齐墩果酸内酯类衍生物及其制备方法，以及齐墩果酸内酯类衍生物在制备减肥药物和减肥保健品中的应用。本专利技术提供的一种齐墩果酸内酯类衍生物，其结构式为：其中：R1代表氢、烷基、氨基、或酰胺基；R2代表烷基、含亚胺基团、或含硫基团。所述的烷基为甲基、乙基、丙基、丁基或戊基。所述的含亚胺基团为亚胺基、甲亚胺基、乙亚胺基、丙亚胺基、丁亚胺基、或戊亚胺基。所述的含硫基团为甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基或戊硫基。本专利技术齐墩果酸内酯类衍生物的制备路线：本专利技术提供的一种齐墩果酸内酯类衍生物的制备方法，包括如下步骤：1)先将齐墩果酸和碳酸氢钠加入到DMSO中，然后滴加4-(溴甲基)氧杂环丁烷-2-酮，室温下搅拌,以TLC检测反应终点；其中：齐墩果酸、碳酸氢钠、4-(溴甲基)氧杂环丁烷-2-酮的质量比为5:1-3:2-4；2)反应完毕后，加入齐墩果酸质量0.1-1倍的蒸馏水，用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩得到粗产品；3)粗产品经硅胶柱色谱纯化，得白色粉末，纯化条件：洗脱剂为体积比2-7:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液。本专利技术的齐墩果酸内酯类衍生物可在制备减肥药物和减肥保健品中的应用。本专利技术的齐墩果酸内酯类衍生物可作为原料药与辅料组合制备成减肥药物。与现有技术相比本专利技术的有益效果：本专利技术合成的齐墩果酸内酯类衍生物----齐墩果烷-28-β-内酯，其结构经1HNMR、13CNMR及MS的确认。经体外实验证明具有减肥作用，其作用机理是通过抑制胰脂肪酶来达到减肥作用，其作用类型为竞争性抑制类型。齐墩果烷-28-β-内酯抑酶活性(IC50:16.4μmol·L-1)为齐墩果酸抑酶活性(IC50:87.7μmol·L-1)的5.35倍。附图说明图1齐墩果烷-28-β-内酯氢谱图2齐墩果烷-28-β-内酯碳谱图3齐墩果烷-28-β-内酯质谱图(M＝541.32410)图4齐墩果烷-28-β-内酯抑制胰脂肪酶活性图5齐墩果烷-28-β-内酯可逆抑制与不可逆抑制判定图6齐墩果烷-28-β-内酯抑制胰脂肪酶作用类型具体实施方式实施例1齐墩果酸内酯类衍生物的合成和表征将300mg齐墩果酸和110mg碳酸氢钠加入到4mLDMSO中，滴加163mg4-(溴甲基)氧杂环丁烷-2-酮，室温下搅拌,以TLC检测反应终点，24h反应完毕后，加入5ml水，用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，无水硫酸镁干燥，减压浓缩得到粗产品，经硅胶柱色谱纯化，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯(5:1)，得白色粉末220.56mg，产率62％。1H-NMR(600MHz,CDCl3),δ0.71(s0.71(s,3H,CH3),0.78(s,3H,CH3),0.89(s,3H,CH3),0.91(s,3H,CH3),0.93(s,3H,CH3)0.99(s,3H,CH3),1.14(s,3H,CH3),1.98～2.03(m,1H,H-12),2.81～2.87(m,1H,H-2),3.21(dd,1H,J＝3.6,10.8Hz,H-18),3.32～3.58(ddd,J＝4.2,16.2,98.4Hz,2H,CH2O),4.11～4.34(ddd,J＝4.2,12.6,78.0Hz,2H,CH2),4.48(m,1H,CHO),5.31(t,1H,J＝3.6Hz,H-12)；13CNMR(150Hz,CDCl3),δ17.70,17.17,18.47,23.08,23.55,23.68,26.02,27.33,27.79,28.26,30.77,32.52,32.68,32.96,33.14,33.94,34.63,37.19,38.89,39.53,40.16,41.93,45.86,46.85,47.72,55.40,63.00,67.84,69.62,73.19,79.11,123.01,143.31,177.31；HRMS[M+H]calad540.3815,found540.3241.1HNMR、13CNMR及MS确认产物为齐墩果烷-28-β-内酯，见图1、图2、图3所示。实施例2齐墩果烷-28-β-内酯抑制胰脂肪酶活性实验采用对硝基苯酚法测定酶活。在反应体系中加入780μLTris-HCl(pH＝8)，随后分别加入100μL的0.5mg/mL的PL和20μL待测物质溶液，充分混匀，37℃下孵育15min后，立即加入PNPB溶液(12.5mmol/L)，混匀，将溶液点到96孔酶标板内，每个浓度设4个复孔，检测波长为400nm，在酶标仪上进行测定。每3min测定一个点，测定15min，记录全部数据。计算吸光度随时间变化率K，根据如下公式计算抑制率：PL的抑制率(％)＝(1-K实验/K空白)×100试验重复3次，结果取平均值。当抑制剂浓度为2ug/mL时，抑制率为15.75％。当抑制剂浓度为8ug/mL时，抑本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种齐墩果酸内酯类衍生物，其特征在于，结构式为：其中：R1代表氢、烷基、氨基、或酰胺基；R2代表烷基、含亚胺基团、或含硫基团。

【技术特征摘要】
1.一种齐墩果酸内酯类衍生物，其特征在于，结构式为：其中：R1代表氢；R2代表亚甲基。2.如权利要求1所述的一种齐墩果酸内酯类衍生物的制备方法，包括如下步骤：1)先将齐墩果酸和碳酸氢钠加入到DMSO中，然后滴加4-(溴甲基)氧杂环丁烷-2-酮，室温下搅拌,以TLC检测反应终点；其中：齐墩果酸、碳酸氢钠、4-(溴甲基)氧杂环丁烷-2-酮的质量比为5:1-3:2-4；2)反应完毕后，加入齐墩果酸质量...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈廷贵，仝明明，马开庆，张立伟，席小莉，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西;14