一种利用线虫咽动检测铜的方法技术

一种利用线虫咽动检测铜的方法，涉及一种检测铜的方法。本发明专利技术是为了解决现有的铜检测方法存在操作复杂，仪器依赖度大，造成鉴定成本高的技术问题。本发明专利技术的一种利用线虫咽动检测铜的方法是按以下步骤进行的：一、制备混合液并灭菌；二、加线虫并观察。本发明专利技术优点：本发明专利技术的检测方法利用了秀丽隐杆线虫的咽动频率作为指标，与传统的利用分析仪器鉴定铜的方法相比，可以直观高效的甄别铜；此外，本发明专利技术的检测方法对实验条件要求低，不需要特殊的高精分析仪器和检测设备，实验操作方便，成本低廉，易于培训和掌握。本发明专利技术应用于检测水溶液中铜的浓度大于或等于0.013μmol/L的液体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测铜的方法。
技术介绍
秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans，缩写为C.elegans)为线虫动物门泄管纲动物，作为一种典型模式生物在科研领域被广泛应用。秀丽隐杆线虫通体透明，易于观察形态和行为，生命周期短，培养方便且廉价，易于保存和便于试验操作。秀丽隐杆线虫的实验研究已形成一系列国际标准化与规范化操作。咽球是线虫重要的进食和运动器官，线虫咽动频率是表征其健康的一个重要行为指标，也是线虫毒理学常用的行为端点。铜作为典型重金属，随着应用范围和市场的增加，铜三废排放导致的生态环境和人类健康问题不断出现，评价及控制铜的生态环境风险日益引起人们关注。常规的铜检测方法存在操作复杂，仪器依赖度大，造成鉴定成本高。
技术实现思路
本专利技术是为了解决现有的铜检测方法存在操作复杂，仪器依赖度大，造成鉴定成本高的技术问题，而提供。本专利技术的是按以下步骤进行的:—、制备混合液并灭菌:将CaCl2、MgS04、NaCl和KCl溶于蒸馏水中，得到混合液，将混合液放入高压蒸汽灭菌锅中在温度为120°C的条件下灭菌15min?25min，取出后冷却，得到灭菌后的混合液；所述的混合液中CaClJ^浓度为0.1X 10 3g/mL?0.12X10 3g/mL，MgSOj^浓度为 0.11X10 3g/mL ?0.13X10 3g/mL，NaCl 的浓度为 2X 10 3g/mL ?3X10 VmL，KCl 的浓度为 2X10 3g/mL ~ 3X10 3g/mL ；二、加线虫并观察:向24孔培养皿的每个孔中依次加入ImL步骤一得到的灭菌后的混合液、1yL待测液体和入8条?12条秀丽隐杆线虫，培养24h时后肉眼观测秀丽隐杆线虫的咽动，如果秀丽隐杆线虫的咽动频率小于100下/分钟则表明待检液体中含有铜，如果秀丽隐杆线虫的咽动频率大于或等于100下/分钟则表明待检液体中不含有铜。本专利技术优点:本专利技术的检测方法利用了秀丽隐杆线虫的咽动频率作为指标，与传统的利用分析仪器鉴定铜的方法相比，可以直观高效的甄别铜；此外，本专利技术的检测方法对实验条件要求低，不需要特殊的高精分析仪器和检测设备，实验操作方便，成本低廉，易于培训和掌握。本专利技术应用于检测水溶液中铜的浓度大于或等于0.013 ymol/L的液体。【具体实施方式】【具体实施方式】一:本实施方式为是按以下步骤进行的:—、制备混合液并灭菌:将CaCl2、MgS04、NaCl和KCl溶于蒸馏水中，得到混合液，将混合液放入高压蒸汽灭菌锅中在温度为120°C的条件下灭菌15min?25min，取出后冷却，得到灭菌后的混合液；所述的混合液中CaClJ^浓度为0.1X 10 3g/mL?0.12X10 3g/mL，MgSOj^浓度为 0.11X10 3g/mL ?0.13X10 3g/mL，NaCl 的浓度为 2X 10 3g/mL ?3X10 VmL, KCl 的浓度为 2X10 3g/mL ~ 3X10 3g/mL ；二、加线虫并观察:向24孔培养皿的每个孔中依次加入ImL步骤一得到的灭菌后的混合液、1yL待测液体和入8条?12条秀丽隐杆线虫，培养24h时后肉眼观测秀丽隐杆线虫的咽动，如果秀丽隐杆线虫的咽动频率小于100下/分钟则表明待检液体中含有铜，如果秀丽隐杆线虫的咽动频率大于或等于100下/分钟则表明待检液体中不含有铜。【具体实施方式】二:本实施方式与【具体实施方式】一的不同点是:步骤一中将CaCl2、MgSO4, NaCl和KCl溶于蒸馏水中，得到混合液，将混合液放入高压蒸汽灭菌锅中在温度为120°C的条件下灭菌20min，取出后冷却，得到灭菌后的混合液。其他与【具体实施方式】一相同。【具体实施方式】三:本实施方式与【具体实施方式】一或二的不同点是:步骤二中向24孔培养皿的每个孔中依次加入ImL步骤一得到的灭菌后的混合液、1yL待测液体和入10条秀丽隐杆线虫，培养24h时后肉眼观测秀丽隐杆线虫的咽动。其他与【具体实施方式】一或二相同。【具体实施方式】四:本实施方式与【具体实施方式】一至三的不同点是:步骤二所述的待测液体为铜的浓度大于或等于0.013 μπιοΙ/L的液体。其他与【具体实施方式】一至三相同。【具体实施方式】五:本实施方式与【具体实施方式】一至四的不同点是:步骤一所述的混合液中CaCl^浓度为0.1X10 3g/mL，MgSO^浓度为0.12X10 3g/mL，NaCl的浓度为3X10 3g/mL，KCl的浓度为3X 10 3g/mL。其他与【具体实施方式】一至四相同。通过以下试验验证本专利技术的有益效果:试验一:本试验为对比试验:—、制备混合液并灭菌:将CaCl2、MgSO4, NaCl和KCl溶于蒸馏水中，得到混合液，将混合液放入高压蒸汽灭菌锅中在温度为120°C的条件下灭菌15min?25min，取出后冷却，得到灭菌后的混合液；所述的混合液中CaClj^浓度为0.1X10 3g/mL，MgSOj^浓度为0.12X10 3g/mL，NaCl 的浓度为 3X 10 3g/mL，KCl 的浓度为 3X 10 3g/mL ；二、加线虫并观察:向24孔培养皿的每个孔中依次加入ImL步骤一得到的灭菌后的混合液、1yL待测液体和入8条?12条秀丽隐杆线虫，培养24h时后肉眼观测秀丽隐杆线虫的咽动。步骤二中所述的待测液体为去离子水。肉眼观测得到秀丽隐杆线虫的咽动高于200下/分钟。试验二:本试验为，具体是按以下步骤进行的:—、制备混合液并灭菌:将CaCl2、MgSO4, NaCl和KCl溶于蒸馏水中，得到混合液，将混合液放入高压蒸汽灭菌锅中在温度为120°C的条件下灭菌15min?25min，取出后冷却，得到灭菌后的混合液；所述的混合液中CaClj^浓度为0.1X10 3g/mL，MgSOj^浓度为0.12X10 3g/mL，NaCl 的浓度为 3X 10 3g/mL，KCl 的浓度为 3X 10 3g/mL ；二、加线虫并观察:向24孔培养皿的每个孔中依次加入ImL步骤一得到的灭菌后的混合液、1yL待测液体和入8条?12条秀丽隐杆线虫，培养24h时后肉眼观测秀丽隐杆线虫的咽动。步骤二中所述的待测液体为铜离子浓度为0.013 μ mo I/L的溶液。肉眼观测得到秀丽隐杆线虫的咽动小于100下/分钟。试验三:本试验为，具体是按以下步骤进行的:—、制备混合液并灭菌:将CaCl2、MgSO4, NaCl和KCl溶于蒸馏水中，得到混合液，将混合液放入高压蒸汽灭菌锅中在温度为120°C的条件下灭菌15min?25min，取出后冷却，得到灭菌后的混合液；所述的混合液中CaClj^浓度为0.1X10 3g/mL，MgSOj^浓度为0.12X10 3g/mL，NaCl 的浓度为 3X 10 3g/mL，KCl 的浓度为 3X 10 3g/mL ；二、加线虫并观察:向24孔培养皿的每个孔中依次加入ImL步骤一得到的灭菌后的混合液、1yL待测液体和入8条?12条秀丽隐杆线虫，培养24h时后肉眼观测秀丽隐杆线虫的咽动。步骤二中所述的待测液体为铜离子浓度为0.13 μ mo I/L的溶液。肉眼观测得到秀丽隐杆线虫的咽动小于100下/分钟。试验四:本试验为，具体是按以下步本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用线虫咽动检测铜的方法，其特征在于利用线虫咽动检测铜的方法是按以下步骤进行的：一、制备混合液并灭菌：将CaCl2、MgSO4、NaCl和KCl溶于蒸馏水中，得到混合液，将混合液放入高压蒸汽灭菌锅中在温度为120℃的条件下灭菌15min～25min，取出后冷却，得到灭菌后的混合液；所述的混合液中CaCl2的浓度为0.1×10‑3g/mL～0.12×10‑3g/mL，MgSO4的浓度为0.11×10‑3g/mL～0.13×10‑3g/mL，NaCl的浓度为2×10‑3g/mL～3×10‑3g/mL，KCl的浓度为2×10‑3g/mL～3×10‑3g/mL；二、加线虫并观察：向24孔培养皿的每个孔中依次加入1mL步骤一得到的灭菌后的混合液、10μL待测液体和入8条～12条秀丽隐杆线虫，培养24h时后肉眼观测秀丽隐杆线虫的咽动，如果秀丽隐杆线虫的咽动频率小于100下/分钟则表明待检液体中含有铜，如果秀丽隐杆线虫的咽动频率大于或等于100下/分钟则表明待检液体中不含有铜。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王云彪，陈展彦，
申请(专利权)人：中国科学院东北地理与农业生态研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23