本发明专利技术公开了一种冬凌草多糖的闪式提取方法及其在卷烟中的应用。首先将冬凌草粉碎成粉末、加水混匀，所得物料置于闪式提取器中提取，提取液离心、得到上清液；将上清液进行闪式浓缩，浓缩液中加入乙醇进行处理，得到沉淀物；沉淀物加水溶解，所得溶液采用Sevage法脱蛋白，脱蛋白后的溶液浓缩，所得浓缩液经干燥得到冬凌草粗多糖；将粗多糖利用DEAE-Celluose凝胶色谱柱和Sephadex G200凝胶色谱柱分离纯化得到精制冬凌草多糖。利用本发明专利技术能够得到高纯度冬凌草多糖，操作简单、成本低、提取时间短。经实验证明，将提取的冬凌草多糖作为保润剂应用于卷烟中，能够降低卷烟的刺激性和杂气，提高卷烟的圆润感和舒适性。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种植物中有效成分的提取方法及其应用，具体涉及一种冬凌草多糖 的闪式提取方法及其在卷烟中的应用。
技术介绍
在卷烟生产中通常需要加入一种或几种保润剂以起到提高卷烟物理保润性能及 耐加工性能的作用。同时，保润剂的使用可使卷烟在不同区域环境消费时保持烟气中的水 分，降低卷烟吸食过程中烟气的干燥感和辛辣感，保障卷烟的抽吸品质，保证卷烟设计者对 卷烟抽吸时轻松感、舒适感和满足感的传递。目前我国卷烟工业中主要采用甘油、丙二醇、 山梨醇等多羟基物质为保润剂，使用此类保润剂的目的在于维持加工过程中烟丝的含水 率，提高烟丝的耐加工性，但保润剂对于卷烟产品含水率的维持，吸食舒适度的改善效果不 太理想。我国地大物博，植物种类繁多，所含有效成分也各有特点，为新型烟用保润剂的开 发提供了丰富的资源。植物多糖是由大量单糖聚合而成，含有大量的羟基，其大量的羟基可 以和水分子形成氢键，从而使多糖具有较强的持水能力。天然植物多糖来源丰富，其开发与 应用是丰富烟用添加剂资源、改善卷烟感官质量的有效途径之一。 冬凌草为唇形科香茶菜属植物"碎米桠"的全草，有较强的抗肿瘤、抗菌、消炎镇痛 作用，其全株对食管癌、喷门癌、乳腺癌、直肠癌、白血病等有缓解症状并延长生存时间的作 用。冬凌草中主要化学成分除贝壳杉烯类二萜，还有三萜、黄酮和酚酸、多糖等化学成分。目 前关于冬凌草多糖的应用要集中抗氧化和抗肿瘤等方面，在烟草上的应用尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：提供一种冬凌草多糖的闪式提取方法及其在卷烟中 的应用。利用本专利技术闪式提取方法能够得到纯度较高的冬凌草多糖，并且操作简单、成本 低、提取时间短。利用本专利技术提取得到的冬凌草多糖能够应用到卷烟中。经实验证明，将提 取的冬凌草多糖作为保润剂应用于卷烟中，能够降低卷烟的刺激性和杂气，提高卷烟的圆 润感和舒适性等。 为了解决上述问题，本专利技术采取的技术方案是： 本专利技术提供一种冬凌草多糖的闪式提取方法，所述提取方法包括以下步骤： a、 将冬凌草粉碎成40~60目的粉末，然后加入蒸馏水混匀，所得混合物料的料液比为 15 ~25:1 ; b、 将步骤a得到的混合物料置于闪式提取器中进行闪式提取，得到提取液； c、 将步骤b所得提取液进行离心，得到上清液； d、 离心后剩余的残渣按照步骤b、c方法再次进行提取、离心，得到第二次上清液，合并 两次所得上清液； e、 将步骤d所得上清液采用闪式浓缩器进行浓缩，得到浓缩液； f、 步骤e得到的浓缩液中加入95%乙醇至体系乙醇浓度为60~80%，进行醇沉，静置、 离心后得到沉淀物； g、 将得到的沉淀物用蒸馏水溶解，配制成质量浓度为10~50mg/mL溶液，通过Sevage 常规方法脱除蛋白质，脱除蛋白质后的冬凌草多糖溶液采取闪式浓缩器进行浓缩，所得浓 缩液经真空冷冻干燥，得到冬凌草粗多糖； h、 将步骤g所得冬凌草粗多糖加入蒸馏水配制成粗多糖溶液，然后采用 DEAE-Cellu0se凝胶色谱柱进行分离，收集主要色谱峰的液体进行冻干；将所得冻干后固 体采用0. 05mol/L的见14110)3溶液溶解，所得溶液采用S印hadexG200凝胶色谱柱进行再 次分离，收集主要色谱峰液体进行冻干，冻干后得到精制冬凌草多糖固体。 根据上述的冬凌草多糖的闪式提取方法，步骤b中提取时的提取条件为：提取温 度为50~70°C，在15000~20000转/min下提取2~3min。 根据上述的冬凌草多糖的闪式提取方法，步骤c、f中离心时的条件均为：在4°C、 8000~10000转/min条件下离心8~lOmin。 根据上述的冬凌草多糖的闪式提取方法，步骤e、g中浓缩时的条件均为：在真空 度为0. 08~0. 098MPa、温度为70~80°C的条件下，浓缩20~25s。 根据上述的冬凌草多糖的闪式提取方法，步骤f?中静置的条件为4°C条件下静置 Mh0 根据上述的冬凌草多糖的闪式提取方法，DEAE-Celluose凝胶色谱柱的规格为 5.OX50cm;采用DEAE-Celluose凝胶色谱柱进行分离时，以0? 5mol/L的NaCl溶液为流动 相，流速为2.OmL/min，以硫酸苯酸法对层析液显色； SephadexG200凝胶色谱柱的规格为5.OX50cm，采用SephadexG200凝胶色谱柱进行 分离时，以0. 05mol/L的NH4HCO3溶液为流动相，流速为2.OmL/min，以硫酸苯酚法对层析液 显色。 -种利用上述方法提取的冬凌草多糖在卷烟中的应用。 根据上述的冬凌草多糖在卷烟中的应用，冬凌草多糖在卷烟中应用时的用量占烟 丝质量的0. 005~0. 1%。 在卷烟中应用时，添加方式为用水稀释后均匀喷洒到烟丝中，多糖加入量为烟丝 质量的〇. 005~0. 1%。 本专利技术的积极有益效果： 1、利用本专利技术提取纯化方法能够获得高纯度的精制冬凌草多糖，并将其应用于卷烟， 可以降低卷烟的刺激性和杂气，提高卷烟的圆润感和舒适性。在卷烟中应用时，添加方式为 用水稀释后均匀喷洒到烟丝中，多糖加入量为烟丝质量的0. 005~0. 1%。 2、本专利技术闪式提取方法和现有技术相比，主要有以下显著优点： a、采用本专利技术闪式提取法提取冬凌草多糖，可以缩短提取时间，提高提取率。 b、采用凝胶色谱柱层析分离纯化两次，获得高纯度的精制冬凌草多糖。 c、本专利技术提取工艺简便，设备运行和维护成本低。利于保持多糖的结构完整性和 生物活性。 d、经过实验证明，本专利技术提取的冬凌草多糖对烟草制品的保润效果明显。【具体实施方式】： 以下结合实施例，进一步阐述本专利技术，但并不限制本专利技术的内容。 实施例I: 本专利技术冬凌草多糖的闪式提取方法，其详细步骤如下： a、 将冬凌草粉碎成40~60目的粉末100g，然后加入蒸馏水混匀，所得混合物料的料液 比为18:1 ; b、 将步骤a得到的混合物料置于闪式提取器中进行闪式提取，提取温度为50°C，在 20000转/min下提取2min，得到提取液； c、 将步骤b所得提取液在4°C、8000转/min条件下离心lOmin，得到上清液；d、离心后 剩余的残渣按照步骤b、c方法再次进行提取、离心，得到第二次 上清液，合并两次所得上清液； e、 将步骤d所得上清液采用闪式浓缩器进行浓缩(在真空度为0. 08MPa、温度为80°C的 条件下，浓缩20s)，得到浓缩液； f、 步骤e得到的浓缩液中加入95%乙醇至体系乙醇浓度为60%，进行醇沉，4°C条件下静 置24h，静置后进行离心(在4°C、8000转/min条件下离心lOmin)，得到沉淀物； g、 将得到的沉淀物用蒸馏水溶解，配制成质量浓度为lOmg/mL溶液，通过Sevage常规 方法脱除蛋白质，脱除蛋白质后的冬凌草多糖溶液采取闪式浓缩器进行浓缩(在真空度为 0. 08MPa、温度为80°C的条件下，浓缩20s)，所得浓缩液经真空冷冻干燥，得到冬凌草粗多 糖3. 10g，收率为3. 10% ; h、 取所得冬凌草粗多糖1.0 g用蒸馏水溶解，溶解后的粗多糖溶液采用DEAE-Cellu0se 凝胶色谱柱（5. 0X50cm)进行分离，以0. 5mol/L的NaCl溶液为流动相，流速为2本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种冬凌草多糖的闪式提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤：a、将冬凌草粉碎成40～60目的粉末，然后加入蒸馏水混匀，所得混合物料的料液比为15～25:1；b、将步骤a得到的混合物料置于闪式提取器中进行闪式提取，得到提取液；c、将步骤b所得提取液进行离心，得到上清液；d、离心后剩余的残渣按照步骤b、c方法再次进行提取、离心，得到第二次上清液，合并两次所得上清液；e、将步骤d所得上清液采用闪式浓缩器进行浓缩，得到浓缩液；f、步骤e得到的浓缩液中加入95%乙醇至体系乙醇浓度为60～80%，进行醇沉，静置、离心后得到沉淀物；g、将得到的沉淀物用蒸馏水溶解，配制成质量浓度为10～50mg/mL溶液，通过Sevage常规方法脱除蛋白质，脱除蛋白质后的冬凌草多糖溶液采取闪式浓缩器进行浓缩，所得浓缩液经真空冷冻干燥，得到冬凌草粗多糖；h、将步骤g所得冬凌草粗多糖加入蒸馏水配制成粗多糖溶液，然后采用DEAE‑Celluose凝胶色谱柱进行分离，收集主要色谱峰的液体进行冻干；将所得冻干后固体采用0.05mol/L的NH4HCO3溶液溶解，所得溶液采用Sephadex G200 凝胶色谱柱进行再次分离，收集主要色谱峰液体进行冻干，冻干后得到精制冬凌草多糖固体。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：姬小明，可钰，吕全建，陶陶，赵华新，夏萍，焦桂珍，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：河南;41
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