本发明专利技术公开了一种酶提取紫锥菊多糖的方法，将紫锥菊地上部分粉碎成适宜大小，脱脂，提取，加酶制剂酶解、灭酶、继续高温提取、离心、上清液进行旋转蒸发浓缩，醇沉，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，复溶后，喷干，得紫锥菊多糖。本发明专利技术的有益效果是：本制备方法，具有反应条件温和、提取时间短、提取率高等优点，并且重现性高，稳定，制备得到的紫锥菊多糖溶解性较好，外观均一、水溶性好，并且获得较好的活性组分，具有较好的免疫活性。
【技术实现步骤摘要】
【专利说明】
本专利技术涉及多糖提取领域，特别涉及。
技术介绍
紫锥菊（Echinacea)是闻名世界的免疫药草，原产地位于北美和加拿大南部。其 为一种松果菊属植物，该属植物共有8个种和数个变种，目前作为药物开发的主要有3个 品种：紫松果菊（Echinaceapurpurea，即通常所说的紫锥菊），狭叶紫锥菊（Echinacea augustifolia)和白色紫锥菊（Echinacenpallida)。研究表明紫锥菊含有多种活性成分， 咖啡酸衍生物类、多糖和糖蛋白、烷酰胺类、生物碱类、多炔类、黄酮类、挥发油、留醇等，其 活性成分已成为当前研究热点。 紫锥菊因具有显著的免疫增强活性，而被称为"天然抗生素"。在人类多种保健产 品及复方产品中都有应用。而相对紫锥菊中其他有效成分，紫锥菊多糖的研究相对较少， 研究较多的菊苣酸为主的活性成分提取过程复杂，所获得的活性成分产品原料量少且成本 高，虽然已有关于紫锥菊提取多糖的免疫活性研究的报道，但对其从药材到活性成分提取 的系统深入研究尤其是酶法处理提取多糖的系统研究至今未见报道，纯化方法也鲜有研 究。
技术实现思路
为了解决紫锥菊多糖提取时间过长，以及提取率低的问题，同时还能得到较好活 性成分，本专利技术提供了。 为了达到上述目的，本专利技术提供了，其中，提取方法 包括以下步骤： ① 药材预处理：将紫锥菊地上部分粉碎过40-60目筛；加入脱脂溶剂，脱脂后，将脱脂 溶剂于20-80°C条件下挥干，处理后的药材备用； ② 提取：称取①处理得到的药材适量，加入药材15-25倍量的水，调pH为2-4,预热至 40°C_60°C后，加入药材0. 04-0. 06倍量的酶制剂，酶解时间50min-70min，80°C-100°C灭酶 10-20min，在 80°C-100°C继续搅拌保温l_2h; ③ 浓缩：离心，将上清液旋蒸减压浓缩至生药量I:0. 9-1. 5的浓缩液； ④ 醇沉：向浓缩液中加入3-4倍的无水乙醇，0-4°C条件下静置24-48小时； ⑤ 洗涤：将④得到的醇沉液抽滤，得到的沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤； ⑥ 干燥：将沉淀物用1-2倍量的水复溶，在140°C_160°C的条件下喷雾干燥得到紫锥菊 多糖。 其中，所述脱脂溶剂为石油醚。 其中，所述脱脂溶剂为石油醚、1，2-环氧丙烷、乙醚的混合，其质量份数比为： 1-2:0. 05-0. 1:0. 02-0. 08〇 其中，所述酶制剂为果胶酶。 其中，所述酶制剂为纤维素酶、果胶酶、蜗牛酶、植酸酶的混合，其质量份数比为： 0. 5-1:1-2:0. 1-0. 5 ：0. 05-0. 1〇 其中，所述紫锥菊药材来源于紫锥菊属植物紫锥菊，取自盛花期到花后期的地上 部分。 本专利技术的有益效果是：本制备方法，具有反应条件温和、提取时间短、提取率高等 优点，并且重现性高，稳定，制备得到的紫锥菊多糖溶解性较好，外观均一、水溶性好，并且 获得较好的活性组分，具有较好的免疫活性。 说明书附图 图IEPPSI分子量测定谱图； 图2EPPSII分子量测定谱图； 图3EPPSIII分子量测定谱图； 图 4EPPSI、EPPSII、EPPSIIIXRD图； 图5EPPSI红外谱图； 图6EPPSII红外谱图； 图7EPPSIII红外谱图； 图 8EPPSI的 13CNMR谱图； 图 9EPPSI的 13CNMR谱图； 图10不同浓度EPPS、EPPSI、EPPSII及EPPSIII对RAW264. 7细胞的影响； 图11不同浓度EPPS、EPPSI、EPPSII及EPPSIII对RAW264. 7外观形态的影响。【具体实施方式】 实施例1 提取方法包括以下步骤： ① 药材预处理：将紫锥菊地上部分粉碎过60目筛；加入脱脂溶剂，脱脂后，将石油醚于 60°C条件下挥干，处理后的药材备用； ② 提取：称取①处理得到的药材l〇〇g，加入1500g水，调pH为3,预热至50°C后，加入 药材5g果胶酶，酶解时间60min，80°C灭酶lOmin，在80°C继续搅拌保温l_h; ③ 浓缩：离心，将上清液旋蒸减压浓缩至生药量1 9的浓缩液； ④ 醇沉：向浓缩液中加入3倍的无水乙醇，4°C条件下静置24小时； ⑤ 洗涤：将④得到的醇沉液抽滤，得到的沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤； ⑥ 干燥：将沉淀物用1倍量的水复溶，在140°C的条件下喷雾干燥得到紫锥菊多糖。 实施例2 提取方法包括以下步骤： ①药材预处理：将紫锥菊地上部分粉碎过40目筛；加入石油醚，脱脂后，将石油醚于 60°C条件下挥干，处理后的药材备用； ② 提取：称取①处理得到的药材l〇〇g，加入1500g水，调pH为2,预热至40°C后，加入 药材4g果胶酶，酶解时间50min，80°C灭酶lOmin，在80°C继续搅拌保温Ih; ③ 浓缩：离心，将上清液旋蒸减压浓缩至生药量1 9的浓缩液； ④ 醇沉：向浓缩液中加入3倍的无水乙醇，(TC条件下静置24小时； ⑤ 洗涤：将④得到的醇沉液抽滤，得到的沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤； ⑥ 干燥：将沉淀物用1倍量的水复溶，在140°C的条件下喷雾干燥得到紫锥菊多糖。 实施例3 提取方法包括以下步骤： ① 药材预处理：将紫锥菊地上部分粉碎过60目筛；加入石油醚脱脂溶剂，脱脂后，将石 油醚于60°C条件下挥干，处理后的药材备用； ② 提取：称取①处理得到的药材l〇〇g，加入2500g水，调pH为4,预热至60°C后，加入 药材6g果胶酶，酶解时间70min，100°C灭酶20min，在100°C继续搅拌保温2h; ③ 浓缩：离心，将上清液旋蒸减压浓缩至生药量I:1. 5的浓缩液； ④ 醇沉：向浓缩液中加入4倍的无水乙醇，4°C条件下静置48小时； ⑤ 洗涤：将④得到的醇沉液抽滤，得到的沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤； ⑥ 干燥：将沉淀物用2倍量的水复溶，在160°C的条件下喷雾干燥得到紫锥菊多糖。 实施例4 提取方法包括以下步骤： ① 药材预处理：将紫锥菊地上部分粉碎过60目筛；加入脱脂溶剂，脱脂后，将脱脂溶剂 于60°C条件下挥干，处理后的药材备用； ② 提取：称取①处理得到的药材l〇〇g，加入1500g水，调pH为3,预热至60°C后，加入 药材5g酶制剂，酶解时间60min，80°C灭酶10min，在80°C继续搅拌保温Ih; ③ 浓缩：离心，将上清液旋蒸减压浓缩至生药量1 :1的浓缩液； ④ 醇沉：向浓缩液中加入3倍的无水乙醇，4°C条件下静置24小时； ⑤ 洗涤：将④得到的醇沉液抽滤，得到的沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤； ⑥ 干燥：将沉淀物用2倍量的水复溶，在150°C的条件下喷雾干燥得到紫锥菊多糖。 其中，所述脱脂溶剂为石油醚、1，2-环氧丙烷、乙醚的混合，其质量份数比为： 1-2:0. 05-0. 1:0. 02-0. 08〇 其中，酶制剂为I. 19g纤维素酶、2. 38g果胶酶、I. 19g蜗牛酶、0. 24g植酸酶的混 合。 实施例5 提取方法包括以下步骤： ① 药材预处理：将紫锥菊地上部分粉碎过60目筛；加入脱脂溶剂，脱脂后，将脱脂溶剂 于60°C条件下挥干，处理后的药材备用； ② 提取：称取本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种酶提取紫锥菊多糖的方法，其特征在于，提取方法包括以下步骤：①药材预处理：将紫锥菊地上部分粉碎过40‑60目筛；加入脱脂溶剂，脱脂后，将脱脂溶剂于20‑80℃条件下挥干，处理后的药材备用；②提取：称取步骤①处理得到的药材适量，加入药材15‑25倍量的水，调pH为2‑4，预热至40℃‑60℃后，加入药材0.04‑0.06倍量的酶制剂，酶解时间50min‑70min，80℃‑100℃灭酶10‑20min，在80℃‑100℃继续搅拌保温1‑2h；③浓缩：离心，将上清液旋蒸减压浓缩至生药量1：0.9‑1.5的浓缩液；④醇沉：向浓缩液中加入3‑4倍的无水乙醇，0‑4℃条件下静置24‑48小时；⑤洗涤：将步骤④得到的醇沉液抽滤，得到的沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤；⑥干燥：将沉淀物用1‑2倍量的水复溶，在140℃‑160℃的条件下喷雾干燥得到紫锥菊多糖。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郝智慧，杨芬芳，黄婷婷，赵莉，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
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