肿瘤干细胞分子标记制造技术

本发明专利技术涉及分子标记，该分子标记为用于检测作为检测对象的细胞团中的肿瘤干细胞的分子标记，其在该检测对象所含的肿瘤干细胞中能检测到，但在非肿瘤干细胞的癌细胞和正常细胞中检测不到；还涉及以该分子标记为指标来判定判定对象中是否存在肿瘤干细胞的方法。进而，本发明专利技术涉及试剂盒，其为用于判定肿瘤干细胞是否存在的试剂盒，至少含有用于检测前述分子标记的试剂。进而，本发明专利技术还涉及前述分子标记所编码的多肽、识别该分子标记的基因表达产物的表位的抗体、抑制该分子标记表达的核酸、含有来源于该分子标记的基因的核酸疫苗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子标记，其为用于检测作为检测对象的细胞团中的肿瘤干细胞的分 子标记，其在该检测对象所含的肿瘤干细胞中能检测到，但在非肿瘤干细胞的癌细胞和正 常细胞中检测不到。
技术介绍
肿瘤干细胞被认为是癌症复发、转移的主要原因，癌症治疗中以肿瘤干细胞为靶 标的重要性已被指出。但是肿瘤组织中肿瘤干细胞比率较低（非专利文献4)，特异性识别 肿瘤干细胞并进行治疗是极其困难的。肿瘤干细胞的检测技术以及以肿瘤干细胞为靶标的 新疗法的开发已成为癌症医疗中的重要课题。目前，作为已知的肿瘤干细胞标记，有⑶133、⑶24、⑶44等分子标记（非专利文献 1~7)，据说仅在极少数癌细胞中具有有效性，为了在更多种类的癌症中检测肿瘤干细胞， 需要鉴定新的分子标记。 现有技术文献非专利文献 I :Shu Zhang et al.，Cancer Res. 68:(11)4311-4320, 2008非专利文献 2：Sh i h-Hwa Chiou et al. , Clin. Cancer Res. 14(13)4085-4095, 2008非专利文献 3 :Gang-Ming Zou, J. Cell. Physiol. 217 :598-604, 2008非专利文献 4 :Cheong J. Lee et al., J Clin Oncol 26 :2806-2812,2008非专利文献 5 :Madhuri Kakarala et al. , J Clin Oncol 26 :2813-2820, 2008非专利文献 6 :Craig D. Peacock et al., J Clin Oncol 26 :2883-2889,2008非专利文献 7 :Xing Fan et al. , J Clin Oncol 26 :2821-2827, 2008
技术实现思路
专利技术要解决的问题 本专利技术的目的在于，提供在肿瘤干细胞的检测中有用的分子标记。 解决问题的手段 为解决上述课题，本专利技术人等在持续进行深入研究时着眼于如下新的见解，所述 新见解为：对于肿瘤干细胞标记基因而言必不可少的是，在至少1种组织中有用性更高且 优选在多个组织中的来源于该组织的正常细胞中看不到表达、在肿瘤干细胞中能看到表 达，即在鉴定肿瘤干细胞基因时的待测物中通常含有正常组织的情况下在该待测物中的正 常组织中几乎不表达。并且判明：迄今为止所报告的针对肿瘤干细胞的标记基因在正常组 织中几乎都高水平表达，而本专利技术人等在进一步研究中发现，已知的转录因子基因-性别 决定Y区域转录因子2(Sex determinig Region Y-box2，Sox2)基因虽然在成人正常细胞中 看不到表达，但意外的是其在肿瘤干细胞中表达。并且，进一步研究时发现，以精子线粒体 相关富含半胱酸蛋白（Sperm Mitochondria-associated Cysteine-rich Protein, Smcp) 基因为首的其它基因也是在成人正常细胞中几乎不表达而在肿瘤干细胞中表达，从而完成 了本专利技术。 即，本专利技术涉及分子标记，其为用于检测作为检测对象的细胞团中的肿瘤干细胞 的分子标记，其在该检测对象所含的肿瘤干细胞中能检测到，但在非肿瘤干细胞的癌细胞 和正常细胞中检测不到。此外，本专利技术涉及前述分子标记，检测对象为来源于选自心脏、脑、胎盘、肺、肝脏、 骨骼肌、肾脏、胰脏、脾脏、胸腺、前列腺、精巢、卵巢、小肠、白细胞、结肠、胃、骨髓、大肠和末 梢血单核细胞所组成的组中的1种或2种以上细胞或组织的细胞团。进而，本专利技术涉及前述分子标记，其在本专利技术全部检测对象的非肿瘤干细胞的癌 细胞和正常细胞中检测不到。进而，本专利技术还涉及前述分子标记，该分子标记为选自0r7cl、Dnajb8、Sox2、Smcp、 Intsl、Koxl2、Mdn、FU13464、667J232、Surf6、Pcdhl9、Dchs2、Pcdh21、Gal3stl、Raslllb、 Hes6、Znf415、Nkx2 - 5、Pamci、Pnmt和Scgb3al所组成的组中的1种或2种以上基因的表 达产物。 此外，本专利技术涉及以前述分子标记为指标来判定判定对象中是否存在肿瘤干细胞 的方法。 进而，本专利技术涉及前述方法，细胞团含有正常细胞和/或非肿瘤干细胞的癌细胞。 进而，本专利技术涉及前述方法，细胞团来源于选自心脏、脑、胎盘、肺、肝脏、骨骼肌、 肾脏、胰脏、脾脏、胸腺、前列腺、精巢、卵巢、小肠、白细胞、结肠、胃、骨髓、大肠和末梢血单 核细胞所组成的组中的1种或2种以上细胞或组织。 此外，本专利技术涉及前述方法，判定是指：在检测到选自0r7cl、Dnajb8、Sox2、Smcp、 Intsl、Koxl2、Mdn、FU13464、667J232、Surf6、Pcdhl9、Dchs2、Pcdh21、Gal3stl、Raslllb、 Hes6、Znf415、Nkx2 - 5、Pamci、Pnmt和Scgb3al所组成的组中的I种或2种以上基因的表 达产物的情况下，判定为存在肿瘤干细胞。 此外，本专利技术涉及前述方法，基因的表达产物为mRNA和/或内源性多肽。 此外，本专利技术涉及前述方法，基因的表达产物为mRNA，该方法包括利用RT - PCR法 检测的步骤。此外，本专利技术涉及前述方法，基因的表达产物为内源性多肽，该方法包括利用与该 内源性多肽特异性反应的试剂检测的步骤。此外，本专利技术涉及前述方法，试剂为抗体。 此外，本专利技术涉及前述方法，判定在体外或体内进行。此外，本专利技术涉及癌症治疗药的筛选方法，其包括下述步骤： i)测定前述分子标记的、对细胞团投与候补化合物前的检测量A的步骤， ii)对细胞团投与候补化合物的步骤， iii)测定i)中所测定的分子标记的、对细胞团投与候补化合物后的检测量B的步 骤，和 iv)比较A和B，在A显著大于B的情况下，将候补化合物判定为候补癌症治疗药 的步骤。 进而，本专利技术涉及用于判定肿瘤干细胞是否存在的试剂盒，其含有用于检测前述 分子标记的试剂。 此外，本专利技术涉及前述试剂盒，用于检测的试剂为用于检测mRNA的、具有与下述 基因互补的碱基序列的探针和/或引物，所述mRNA为选自0r7cl、Dnajb8、Sox2、Smcp、 Intsl、Koxl2、Mdn、FU13464、667J232、Surf6、Pcdhl9、Dchs2、Pcdh21、Gal3stl、Raslllb、 Hes6、Znf415、Nkx2 - 5、Pamci、Pnmt和Scgb3al所组成的组中的I种或2种以上基因的表 达产物。 此外，本专利技术涉及用于判定肿瘤干细胞是否存在的试剂盒，用于检测的试剂为 用于检测多肽的抗体，所述多肽为选自0r7cl、Dnajb8、Sox2、Smcp、Intsl、Koxl2、Mdfl、 FU13464、667J232、Surf6、Pcdhl9、Dchs2、Pcdh21、Gal3stl、Raslllb、Hes6、Znf415、Nkx2 - 5、Pamci、Pnmt和Scgb3al所组成的组中的I种或2种以上基因的表达产物。 本专利技术还涉及癌症的判定方法，其使用前述试剂盒。 本专利技术还涉及多肽，所述多肽为能够用作用于抑制肿瘤干细胞的功本文档来自技高网...

【技术保护点】
肽在用于细胞毒性T细胞(CTL)诱导的药物制造中的应用，其特征在于，所述肽为由选自Or7c1、Dnajb8、Smcp、Ints1、Kox12、Mdf1、FLJ13464、667J232、Surf6、Pcdh19、Dchs2、Pcdh21、Gal3st1、Rasl11b、Hes6、Znf415、Nkx2－5、Pamci、Pnmt和Scgb3a1中的基因所编码的肽，或者在该肽中缺失、置换或添加1个或多个氨基酸而形成的肽。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：岛越俊彦，广桥良彦，佐藤昇志，上口権二郎，守田玲菜，西泽哲，高桥阿卡利，
申请(专利权)人：北海道公立大学法人札幌医科大学，大日本住友制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP