本发明专利技术涉及一种新交替假单胞菌属的海洋细菌，具体的说是一种低温生产几丁质酶的新菌及其发酵方法研究，命名为Pseudoalteromonas sp.DL-6，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏单位名称：中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏日期：2013年12月13日，其保藏编号为CGMCC NO.8580。本发明专利技术对该菌发展了一套培养技术，能从该菌稳定发酵生产几丁质酶。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物学、酶工程、发酵工程、生物化学等领域，具体涉及一种交替假 单胞菌属的海洋细菌，特别是研究。该专利技术生 产的几丁质酶主要应用于食品工业、酿造、发酵、医药等行业。
技术介绍
几丁质酶是催化几丁质水解生成N-乙酰氨基葡萄糖的酶。几丁质（Chitin)又称 甲壳质或甲壳素，是一种由N-乙酰氨基葡萄糖以β -1，4-糖苷键连接而成的生物直链多聚 物，广泛分布与自然界。自然界每年生成的几丁质约一百亿吨，陆地储量仅次于纤维素，海 洋环境中含量最丰富的多糖。 目前已确定出3种以氢键相连的天然结晶形态：含量最大的a-几丁质，由两条 反向平行链组成，多氢键相连，浸水不胀；β -几丁质，由两条同向平行链构成，分子链间的 氢键较小几丁质少的多，遇水会膨胀；Y -几丁质，为三条链，两条同向，一条反向，类似于 a-和β-几丁质的混和晶体。几丁质由于分子内氢键较强，所以稳定性强、溶解性能差（不 溶于水、稀酸、稀碱和一般有机溶剂）。 几丁质若脱乙酰化即成壳聚糖（Chitosan)，是啤酒酵母的子囊孢子外壳、毛霉细 胞壁的主要成分。壳聚糖的溶解性大为改善，虽不能直接溶于水但却能溶于酸或酸性水溶 液中。几丁质分子中的氨基并非全部置换成N-乙酰氨基基团，分子中还存在一些游离的氨 基基团，几丁质正是通过这种呈碱性的氨基基团与适当的离子基团如β_葡萄糖胺、特定 蛋白质等结合成络合物或共价化合物。几丁质及其衍生物在食品、医药、化工、生物、农业、 纺织、印染、造纸、环保等众多领域中均具有极其重要的用途。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能低温生产几丁质酶的新菌种，并提供该新菌种的分 离培养方法和发酵研究。 本专利技术所述的低温生产几丁质酶生产菌株DL-6,即Pseudoalteromonas sp. DL-6 菌株（0611〇：勵.8580)分离自辽宁省大连星海湾的海洋底泥中，经形态学、165扣嫩分析表 明它属于假交替单胞菌属（又称交替假单胞菌属，下同），命名为低温生产几丁质酶菌株 DL-6,即Pseudoalteromonas sp. DL-6。申请人已针对该菌发展了一套培养技术，能从该菌 稳定低温发酵生产几丁质酶。该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 保藏，保藏单位名称：中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏日期：2013年12月13日，其 保藏编号为CGMCC NO. 8580。 所述低温几丁质酶菌株的生物化学特征为： 菌落形态特征为：菌落为淡黄色、不透明、表面光滑、边缘整齐、易挑取。通过简单 染色、革兰氏染色、荚膜染色、芽孢染色等方法对该菌株生物学特性进行初步鉴定，结果表 明该菌株为细菌，杆状、〇. 1-0. 5 μ mX 1. 3-2. 0 μ m、革兰氏阴性、无荚膜、无芽孢、端生鞭毛。 遗传学特征： 所述低温生产几丁质酶菌株DL-6,即 Pseudoalteromonas sp. DL-6 的 16S rDNA全 基因碱基序列（表1);菌株16S ri)NA全基因序列共1450bp(Genbank登录号为：KF208362); I acgctggcgg caggcctaac acatgcaagt cgagcggtaa cagaaagtag cttgctactt 61 tgctgacgag cggcggacgg gtgagtaatg cttgggaaca tgccttgagg tgggggacaa 121 cagttggaaa cgactgctaa taccgcataa tgtctacgga ccaaaggggg cttcggctct 181 cgcctttaga ttggcccaag tgggattagc tagttggtga ggtaatggct caccaaggcg 241 acgatcccta gctggtttga gaggatgatc agccacactg ggactgagac acggcccaga 301 ctcctacggg aggcagcagt ggggaatatt gcacaatggg cgcaagcctg atgcagccat 361 gccgcgtgtg tgaagaaggc cttcgggttg taaagcactt tcagtcagga ggaaaggtta 421 gtagttaata cctgctagct gtgacgttac tgacagaaga agcaccggct aactccgtgc 481 cagcagccgc ggtaatacgg agggtgcgag cgttaatcgg aattactggg cgtaaagcgt 541 acgcaggcgg tttgttaagc gagatgtgaa agccccgggc tcaacctggg aactgcattt 601 cgaactggca aactagagtg tgatagaggg tggtagaatt tcaggtgtag cggtgaaatg 661 cgtagagatc tgaaggaata ccgatggcga aggcagccac ctgggtcaac actgacgctc 721 atgtacgaaa gcgtggggag caaacaggat tagataccct ggtagtccac gccgtaaacg 781 atgtctacta gaagctcgga acctcggttc tgtttttcaa agctaacgca ttaagtagac 841 cgcctgggga gtacggccgc aaggttaaaa ctcaaatgaa ttgacggggg cccgcacaag 901 cggtggagca tgtggtttaa ttcgatgcaa cgcgaagaac cttacctaca cttgacatac 961 agagaactta ccagagatgg tttggtgcct tcgggaactc tgatacaggt gctgcatggc 1021 tgtcgtcagc tcgtgttgtg agatgttggg ttaagtcccg caacgagcgc aacccctatc 1081 cttagttgct agcaggtaat gctgagaact ctaaggagac tgccggtgat aaaccggagg 1141 aaggtgggga cgacgtcaag tcatcatggc ccttacgtgt agggctacac acgtgctaca 1201 atggcgcata cagagtgctg cgaacctgcg aaagtaagcg aatcacttaa agtgcgtcgt 1261 agtccggatt ggagtctgca actcgactcc atgaagtcgg aatcgctagt aatcgcgtat 1321 cagaatgacg cggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca ccgcccgtca caccatggga 1381 gtgggttgct ccagaagtag atagtctaac cctcgggagg acgtttacca cggagtgatt 1441 catgactggg 本专利技术菌株与交本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种低温生产几丁质酶的菌株，其特征在于：命名为低温生产几丁质酶菌株DL‑6，即Pseudoalteromonas sp.DL‑6，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏单位名称：中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏日期：2013年12月13日，其保藏编号为CGMCC NO.8580。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：尹恒，王晓辉，杜昱光，迟乃玉，李曙光，曹海龙，赵勇，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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