一株肠膜明串珠菌及其在低温青贮中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株肠膜明串珠菌及其在低温青贮中的应用。本发明专利技术所提供的肠膜明串珠菌具体为肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M 2015254。本发明专利技术所提供的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254具有耐低温、耐盐、耐酸碱等抗逆性，并在低温青贮(5℃)过程中迅速繁殖并产酸降pH，有效的抑制有害杂菌的生长或产生，粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养成分有效保留，非营养物质如粗灰分成分降低，达到长期保存青贮饲料的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物领域，涉及一株肠膜明串珠菌及其在低温青贮中的应用。
技术介绍
青贮是在乳酸菌的厌氧发酵作用下将碳水化合物转化为有机酸，从而使pH降低达到长期贮存的目的。乳酸菌和温度是青贮饲料发酵品质好坏的决定性因素。燕麦是高寒地区冬春饲补的主要饲料作物，由于高寒地区温度低海拔高，不利于乳酸菌的生长，很难发酵出品质优良并可以长期贮存的饲料。因此，筛选出耐高低温、耐盐、耐酸碱的抗逆性较强的菌株，并将其作为发酵剂添加到低温青贮燕麦饲料中，将会对高寒地区的青贮饲料制作有着巨大的应用价值。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一株肠膜明串珠菌。本专利技术所提供的肠膜明串珠菌具体为肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605，该菌株已于2015年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内武汉大学保藏中心)，其保藏编号为CCTCC NO：M 2015254。所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605从中国青海省青海湖鸟岛湿地芦苇上分离得到的，该菌株单菌落为圆形状，革兰氏染色呈阳性，不产过氧化氢，不能发酵葡萄糖产气，发酵类型为同型发酵。在5℃和10℃均长势良好，45℃以上不能存活，表明该菌株有良好的耐低温性，耐高温性较差；在3.0％的NaCl培养基中长势良好，有一定的耐盐性；在pH3.5-9的培养环境中生长均良好，表明耐酸碱性能较好。表明该菌株的生长适应能力很强，可耐极端环境存活繁殖。可耐极端环境存活繁殖。其16S rDNA序列如序列表中序列1所示。本专利技术的第二个目的是提供一种菌剂。本专利技术所提供的菌剂的活性成分为所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254。所述菌剂除了包含作为活性成的所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254外，还可包含辅料，如MRS固体培养基(溶剂为水，溶质及其浓度如下：蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，三水合乙酸钠5g/L，吐温80 1g/L，磷酸氢二钾2g/L，柠檬酸铵2g/L，硫酸镁2g/L，硫酸锰0.25g/L，琼脂17g/L)。本专利技术的第三个目的是提供一种青贮饲料添加剂。本专利技术所提供的青贮饲料添加剂的活性成分为所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254。本专利技术的第四个目的是提供一种青贮饲料。本专利技术所提供的青贮饲料中含有所述青贮饲料添加剂。所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254或所述菌剂在如下任一中的应用也属于本专利技术的保护范围：(a1)抑制细菌；(a2)制备细菌抑制剂；(a3)制备所述青贮饲料添加剂；(a4)制备所述青贮饲料。所述(a1)的应用为非疾病诊断或治疗的应用。在所述(a1)和所述(a2)中，所述细菌具体可为藤黄微球菌和/或沙门氏菌。其中，所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M2015254或所述菌剂对所述细菌的抑制具体体现为30℃条件下的抑制。所述青贮饲料添加剂在制备所述青贮饲料中的应用也属于本专利技术的保护范围。本专利技术的第五个目的是提供一种制备所述青贮饲料的方法。本专利技术所提供的制备所述青贮饲料的方法，具体可包括：将青贮原料与所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254混合，进行厌氧固体发酵，收集所有发酵产物，得到所述青贮饲料；在本专利技术中，所述青贮原料为燕麦全株；具体为乳熟期燕麦全株，水分含量82.97％，切割成1-2cm小段。。在所述方法中，所述燕麦全株和所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254的配比可为100g：105cfu；所述发酵为低温发酵；所述低温可为5℃；所述发酵的时间可为30天。本专利技术所提供的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254具有耐低温、耐盐、耐酸碱等抗逆性，并在低温青贮(5℃)过程中迅速繁殖并产酸降pH，有效的抑制有害杂菌的生长或产生，粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养成分有效保留，非营养物质如粗灰分成分降低，达到长期保存青贮饲料的效果。保藏说明菌种名称：肠膜明串珠菌拉丁名：(Leuconostoc mesenteroides)菌株编号：QH1-605保藏机构：中国典型培养物保藏中心保藏机构简称：CCTCC地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内武汉大学保藏中心保藏日期：2015年4月28日保藏中心登记入册编号：CCTCC NO：M 2015254具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1、肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605的分离与鉴定一、菌株QH1-605的分离与筛选取中国青海省青海湖鸟岛湿地芦苇10g，放入90mL无菌水，震荡10秒，吸取1mL液体放于1.5mL离心管，依次稀释101，103，105倍，取稀释液体20μL分别涂布到MRS固体培养基上，30℃厌氧培养48小时，取单菌落MRS琼脂培养基扩大培养，将获得的其中一株菌编号为QH1-605。其中，所述MRS固体培养基的溶剂为水，溶质及其浓度如下：蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，三水合乙酸钠5g/L，吐温80 1g/L，磷酸氢二钾2g/L，柠檬酸铵2g/L，硫酸镁2g/L，硫酸锰0.25g/L，琼脂17g/L。二、菌株QH1-605的鉴定从以下几个方面对步骤一分离并筛选得到的菌株QH1-605进行鉴定。1、形态学鉴定步骤一分离并筛选得到的菌株QH1-605，革兰氏染色后，显微镜下观察单菌落形状呈圆形状。2、生理生化特征鉴本文档来自技高网...

【技术保护点】
肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1‑605，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M 2015254。

【技术特征摘要】
1.肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605，其在中国典型培养物保
藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M 2015254。
2.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂的活性成分为权利要求1所述的肠膜明串
珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605。
3.一种青贮饲料添加剂，其特征在于：所述青贮饲料添加剂的活性成分为权利
要求1所述的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605。
4.一种青贮饲料，其特征在于：所述青贮饲料中含有权利要求3所述的青贮饲
料添加剂。
5.根据权利要求4所述的青贮饲料，其特征在于：所述青贮饲料是按照权利要
求9或10所述的方法制备得到的。
6.权利要求1所述的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605或权
利要求2所述的菌剂在如下任一中的应用：
(a1)抑制细菌；
(a2)制备细菌抑制剂；
(a3)制备权利要求3所述的青贮饲料添加剂；...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦浈，陈骏，张淼，施环宇，候振，杨媚，李书博，谈重芳，王雁萍，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南;41