赤杆菌及其在降解十溴联苯醚中的应用制造技术

技术编号:11898657 阅读:160 留言:0更新日期:2015-08-19 10:07
赤杆菌及其在降解十溴联苯醚中的应用,涉及微生物应用领域。赤杆菌(Erythrobacter sp.)TAW-CT125,保藏编号为CCTCC NO.M2015210。赤杆菌(Erythrobacter sp.)TAW-CT125可在降解十溴联苯醚中应用。降解十溴联苯醚的方法:将赤杆菌(Erythrobacter sp.)TAW-CT125接种于十溴联苯醚为唯一碳源的液体培养基中,避光条件下置于摇床中富集培养。赤杆菌(Erythrobacter sp.)TAW-CT125在pH7.4,28℃,摇床的转动频率为160rpm,在以十溴联苯醚为唯一碳源的降解培养基中培养8天,该菌对十溴联苯醚的降解率达到85%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物应用领域,具体是涉及赤杆菌及其在降解十溴联苯醚中的应 用。
技术介绍
多溴联苯醚(polybrominated diphenyl ethers, PBDEs)是一类的溴系阻燃剂,被 广泛应用于电子、电器、化工、纺织以及建筑等领域。PBDEs主要的工业产品有三种:五溴联 苯醚(Penta-BDE)、八溴联苯醚(Octa-BDE)、十溴联苯醚(Deca-BDE)。其中含溴量最高的 十溴联苯醚是目前市场上需求量最大的一类。十溴联苯醚为一种非反应添加型阻燃剂,由 于缺少化学键的束缚,在生产、运输、使用以及废弃物处理等过程中很容易释放到环境介质 中。且十溴联苯醚具有环境持久性、生物易积累性及疏水亲脂性等特点,易吸附于颗粒物和 沉积物中,并可以在环境中长距离迀移,在土壤、水体(及沉积物)、大气、及各类生物体(人 体、鱼类、贝类等)等各种环境介质中均有检出。目前,五溴联苯醚和八溴联苯醚被禁用,而 十溴联苯醚在今后的一段时间内仍将被大量生产和使用,且有逐年增加的趋势。实验数据 表明,十溴联苯醚具有潜在的致癌性以及对子代免疫功能产生影响等。十溴联苯醚在各种 环境介质中的长期积累,已经对环境及生物健康构成巨大的威胁。因此,十溴联苯醚的降解 研宄已成为环保工作者关注的热点问题之一。 关于十溴联苯醚的降解方法主要有零价铁还原法、光降解法和微生物降解法等。 微生物降解方法包括微生物厌氧降解和微生物好氧降解。厌氧降解主要为还原脱溴的过 程,即不断脱去溴原子而产生低溴代联苯醚,再进一步降解,该过程所需时间较长。而好氧 降解则主要为共代谢作用,耗时较短、降解效率高。因为十溴联苯醚好氧降解的研宄处于初 始阶段,相关的研宄报道较少,所以筛选高效的十溴联苯醚好氧降解菌并探讨其降解特性, 对于十溴联苯醚的环境污染处理具有重要的科学意义和应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供赤杆菌(Erythrobacter sp.)TAW-CT125。 本专利技术的另一目的在于提供赤杆菌(Erythrobacter sp. )TAW-CT125在降解十溴 联苯醚中的应用。 所述赤杆菌(Erythrobacter sp.) TAW-CT125,已于2015年4月8日保藏于中国 典型培养物保藏中心,地址:中国武汉武汉大学,邮编:430072,保藏中心保藏编号为CCTCC NO. M 2015210。 所述赤杆菌(Erythrobacter sp.)TAW-CT125是从福建省厦门市近海表层沉积物 (E118° 1CT,N24° 3Y )中分离筛选得到,属于赤杆菌科(Erythrobacteraceae)。赤杆菌(Erythrobacter sp. )TAW_CT125的富集筛选采用等浓度添加污染物 作为其生长的唯一碳源,在人工海水培养基MMC(NaCl 24g/L,NH4N03lg/L,KCl 0. 7g/L, KH2P042. 0g/L,Na2HP043. 0g/L,pH 7. 4, MgS047g/L)中加入十溴联苯醚-二氯甲烷溶液 及微量元素(CaCl 2mg/L,FeCl3 ? 6H20 50mg/L,CuS040. 5mg/L,MnCl2 ? ? H20 0? 5mg/L, ZnS04 ? ? 7H20 lOmg/L),十溴联苯醚浓度为100mg/L,pH7. 4。该菌落为圆形,边缘规则整齐, 橙色,光滑,湿润,凸起;菌体呈短杆状,革兰氏染色阴性。 所述赤杆菌(Erythrobacter sp.) TAW-CT125可在降解十溴联苯醚中应用。 所述降解十溴联苯醚的方法可为:将赤杆菌(Erythrobacter sp. )TAW_CT125接 种于十溴联苯醚为唯一碳源的液体培养基中,避光条件下置于摇床中富集培养。 所述十溴联苯醚降解培养基DM (Degradation Medium)是人工海水培养基 MMC(NaCl 24g/L,NH4N03lg/L,KCl 0.7g/L,KH2P042.0g/L,Na2HP043.0g/L,pH 7.4,MgS047g/ L)中加入十溴联苯醚-二氯甲烷溶液及微量元素(CaCl 2mg/L,FeCl3,6H20 50mg/L, CuS040. 5mg/L,MnCl2 ? ? H20 0? 5mg/L,ZnS04 ? ? 7H20 10mg/L),十溴联苯醚浓度为 50mg/L, pH7. 4。 所述降解条件为pH7. 4,温度为28°C,摇床的转动速率为160rpm。 所述十溴联苯醚降解培养基DM中十溴联苯醚为唯一碳源。 培养物经GC-MSD测定,可分析该菌株对十溴联苯醚的降解效果,在以十溴联苯醚 为唯一碳源的情况下,该菌株对十溴联苯醚具有一定的降解作用。 本专利技术的有益效果如下: 本专利技术的赤杆菌(Erythrobacter sp.) TAW-CT125 在 pH7. 4, 28°C,摇床的转动频 率为160rpm,在以十溴联苯醚为唯一碳源的降解培养基中培养8天,该菌对十溴联苯醚的 降解率达到85%。【附图说明】 图1为基于AW-CT125菌株的16S rRNA序列所构建的系统发育树。 图2为BDE-209甲苯-异辛烷混合溶液(v/v = 1 : 9)标准溶液总离子流色谱图。图 3 为 BDE-209 特征图谱(m/z)。【具体实施方式】 下面结合具体实施例,进一步阐述本专利技术。 实施例一 一、赤杆菌(Erythrobacter sp. ) TAW-CT125 的分离和鉴定 1、赤杆菌(Erythrobacter sp. )TAW-CT125 的富集、分离和纯化 培养基: 人工海水培养基(MMC):每升培养基中含有NaCl 24g,NH4N03lg,KC1 0. 7g, KH2P042. 0g,Na2HP043. 0g,pH 7. 4, MgS047g (灭菌后加入)。 微量元素盐溶液:每升微量元素盐溶液中含有CaCl 2mg,FeCl3 ? 6H20 50mg, CuS040. 5mg,MnCl2 ? ? H20 0? 5mg,ZnS04 ? ? 7H20 10mg。 海生菌琼脂2216培养基和海生菌肉汤2216培养基购买于碧迪医疗器械(上海) 有限公司。 十溴联苯醚母液:有机溶剂二氯甲烷,浓度为lg/L。 本专利技术的赤杆菌(Erythrobacter sp. )TAW_CT125是从厦门附近海域所采集的表 层沉积物经富集、分离、纯化而得。 样品富集及单菌株分离纯化方法:取3~5g沉积物样品添加于含有100mL培养 基(人工海水培养基+微量元素盐溶液)的250mL的三角烧瓶中,加入十溴联苯醚作为菌 株生长所需要的唯一碳源,浓度为l〇〇mg/L。把三角烧瓶用锡箔纸做避光处理,置于28°C、 160rpm摇床中震荡培养。震荡培养分4个阶段,每阶段的时间为4w,四个阶段的不同之处 为在第一阶段的富集培养基中加入5mL海生菌肉汤2216培养基,为菌体生长提供丰富的营 养物质,而第二、三、四阶段未添加该培养基。取lmL上一阶段的富集培养液作为下一阶段 的菌种来源接种到新的培养基中。待第四阶段富集培养结束后,取lmL第四阶段的富集培 养液,用无菌超纯水进性10倍梯度稀释,然后取1〇_ 本文档来自技高网
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【技术保护点】
赤杆菌(Erythrobacter sp.)TAW‑CT125,已于2015年4月8日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏中心保藏编号为CCTCC NO.M 2015210。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:邵宗泽王万鹏蔡庆涛赵苒
申请(专利权)人:国家海洋局第三海洋研究所
类型:发明
国别省市:福建;35

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