一种获得五星1号回交导入群体的方法技术

本发明专利技术公开了一种获得五星1号回交导入群体的方法。本发明专利技术提供的方法包括如下步骤：(1)五星1号种子与大豆ms1雄性不育种子3：1混合后种植，收获不育株种子；(2)种植步骤(1)获得的种子，收获可育株种子；(3)五星1号种子与步骤(2)获得的种子3：1混合后种植，收获不育株种子；(4)种植步骤(3)获得的种子，收获可育株种子；(5)五星1号种子与步骤(4)获得的种子3：1混合后种植，收获不育株种子；(6)种植步骤(5)获得的种子，收获可育株种子；(7)五星1号种子与步骤(6)获得的种子3：1混合后种植，收获不育株种子；(8)种植步骤(7)获得的种子，收获可育株的子。本发明专利技术为分子辅助育种奠定良好的基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
回交导入系因其遗传背景单一，是基因定位的优良材料，已在大白菜、水稻、小麦、 玉米等作物或蔬菜上得到了应用。 在大豆的基因定位上，回交导入系也起到了很大的作用。然而，大豆是一种严格的 自花授粉作物，天然异交率在1 %以内。由于大豆花器小，人工去雄授粉操作困难，所以大豆 回交导入系的建立非常困难，这影响了导入系在大豆基因定位上的应用。 五星1号是河北省农林科学院粮油作物研宄所通过有性杂交培育而成，亲本为冀 豆9和Century-2. 3。2000年育成，2001年通过河北省农作物品种审定委员会审定，2003 年通过农作物品种审定委员会审定。该品种脂肪氧化酶双缺失（Iox- 2, 3)无豆腥味；蛋 白质含量43. 01%、脂肪含量19. 91%，五星1比高产对照品种冀豆7增产6. 8%。2001年 河北省农林科学院组织同行专家组对定兴县姚村40亩五星1繁种示范田实收实打验收亩 产达到250. 7公斤。2002年河北省科技厅组织同行专家组对辛集市马兰农场50亩示范田 现场测产验收亩产264. 15公斤。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。 本专利技术提供了，包括如下步骤： (1)将五星1号的种子与大豆msl雄性不育种子按数量比3 :1混合，然后种植，成 熟时收获不育株上的种子； (2)种植步骤（1)获得的种子，成熟时收获可育株的种子； (3)将五星1号的种子与步骤（2)获得的种子按数量比3 :1混合，然后种植，成熟 时收获不育株上的种子； (4)种植步骤（3)获得的种子，成熟时收获可育株的种子； (5)将五星1号的种子与步骤（4)获得的种子按数量比3 :1混合，然后种植，成熟 时收获不育株上的种子； (6)种植步骤（5)获得的种子，成熟时收获可育株的种子； (7)将五星1号的种子与步骤（6)获得的种子按数量比3 :1混合，然后种植，成熟 时收获不育株上的种子； (8)种植步骤（7)获得的种子，成熟时收获可育株的种子，即为五星1号回交导入 群体。 msl是雄性核不育基因，含有msl基因的大豆在减数分裂末期II后败育不能形成 花粉，因而雌性正常雄性不育。以大豆msl雄性不育种子做回交导入的供体亲本，用于建立 回交导入系。利用五星1建立回交导入系是创造优良脂氧酶缺失材料的一种快捷便利的方 法，同时五星1回交导入系的构建还可以在小范围内改良现有五星1品种的不足，培育更加 优良的大豆品种。本专利技术中为分子辅助育种奠定良好的基础。【具体实施方式】 以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验 方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自 常规生化试剂商店购买得到的。大豆msl雄性不育种子：河北省农林科学院粮油作物研宄 所。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。 提及五星1号的文献：王月明，侯春燕，张孟臣，杨春燕，王冬梅.河北省推广 大豆品种对六个SMV株系的抗性鉴定.华北农学报，2006, 21 :183-186。 实施例1、构建五星1号回交导入群体 -、五星1号花粉导入率确定 2011年6月，按种子个数比例3 :1充分混合五星1号种子和大显msl雄性不育种 子，然后种植于30X30平方米试验田内（行距为50cm，株距IOcm)，成熟时随机从不同不育 株上收获种子150粒。 提取种子的基因组DNA，用SSR分子标记检测五星1号的花粉导入率。在大豆不同 连锁群上随机选择1对引物，共选择10对引物。辨别标准：如果不育粒DNA在所检测的10 个位点中均含有五星1号特征带谱则说明该种子在形成接受的花粉是来于五星1号，如果 带谱中含有非五星1号特征带谱则说明该种子在形成时接受的花粉是来于不育群体中可 育株花粉。 在150粒种子中有72粒存在五星1号花粉飘入Msl群体事件，另外78个非五星 1号飘入，五星1号花粉导入率为48%，置换群体中24%遗传物质为五星1号。 二、构建五星1号回交导入群体 1、将五星1号的种子与大显msl雄性不育种子（又称CO群体）按数量比3 :1充 分混合，然后种植，成熟时收获不育株上的种子。 2、种植步骤1获得的种子，成熟时收获可育株的种子，即为Cl群体。 3、将五星1号的种子与Cl群体按数量比3 :1充分混合，然后种植，成熟时收获不 育株上的种子。 4、种植步骤3获得的种子，成熟时收获可育株的种子，即为C2群体。 5、将五星1号的种子与C2群体按数量比3 :1充分混合，然后种植，成熟时收获不 育株上的种子。 6、种植步骤5获得的种子，成熟时收获可育株的种子，S卩为C3群体。 7、将五星1号的种子与C3群体按数量比3 :1充分混合，然后种植，成熟时收获不 育株上的种子。 8、种植步骤7获得的种子，成熟时收获可育株的种子，即为C4群体（五星1号回 交导入群体）。 三、各个群体中脂氧酶材料比例分析 2014年五星1号、CO群体、C4群体隔行种植，6米行长，共种植120行，植株成熟时 随机选择各个群体的200可育株，测量脂氧酶缺失情况（马志民、秦君、杨春燕、邸锐、闫龙、 张梅申、李子千、李亚璞、史晓蕾、鲍聪、许宁、封树平、张孟臣.大豆脂肪氧化酶同功酶联合 鉴定技术的建立?河北农业科学.2014, 18 (2) : 52-59)。结果表明，五星1全部为脂氧酶缺失类型，C4群体中有165株为脂氧酶缺失个体， 占测试株的82. 5%。 四、回交群体中遗传物质来源分析 利用R语言模拟五星1专用群体回交过程，设花粉导入率为48 %，模拟C4代群体 中随机选择200株。设五星1位点用-1表示，msl群体位点用1表示，位点间距离为5cM， 每条连锁群上有30个位点，设msl基因位于第13号染色体与控制花色相近的位点，染色体 三分之一处。共计600个位点。每条染色体遗传距离为150cM。模拟结果表明（见表1)， C4群体中五星1遗传物质约占85. 50%，不育群体中遗传物质约占8. 87%，杂合遗传物质约 占5. 63%，第13号染色体有msl不育位点，最近选择的为可育株，所以杂合型比例较高为 23. 08% 〇 表1五星1遗传物质在群体中所占的比例【主权项】1. ，包括如下步骤： (1) 将五星1号的种子与大豆msl雄性不育种子按数量比3 :1混合，然后种植，成熟时 收获不育株上的种子； (2) 种植步骤（1)获得的种子，成熟时收获可育株的种子； (3) 将五星1号的种子与步骤（2)获得的种子按数量比3 :1混合，然后种植，成熟时收 获不育株上的种子； (4) 种植步骤（3)获得的种子，成熟时收获可育株的种子； (5) 将五星1号的种子与步骤（4)获得的种子按数量比3 :1混合，然后种植，成熟时收 获不育株上的种子； (6) 种植步骤（5)获得的种子，成熟时收获可育株的种子； (7) 将五星1号的种子与步骤（6)获得的种子按数量比3 :1混合，然后种植，成熟时收 获不育株上的种子； (8) 种植步骤（7)获得的种子，成熟时收获可育株的种子，即为五星1号回交导入群体。【专利摘要】本专利技术公开了。本专利技术提供的方法包括如下步骤：(1)五星1号种子与大豆ms1雄性不育种子3：1混合后种植，收本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种获得五星1号回交导入群体的方法，包括如下步骤：(1)将五星1号的种子与大豆ms1雄性不育种子按数量比3：1混合，然后种植，成熟时收获不育株上的种子；(2)种植步骤(1)获得的种子，成熟时收获可育株的种子；(3)将五星1号的种子与步骤(2)获得的种子按数量比3：1混合，然后种植，成熟时收获不育株上的种子；(4)种植步骤(3)获得的种子，成熟时收获可育株的种子；(5)将五星1号的种子与步骤(4)获得的种子按数量比3：1混合，然后种植，成熟时收获不育株上的种子；(6)种植步骤(5)获得的种子，成熟时收获可育株的种子；(7)将五星1号的种子与步骤(6)获得的种子按数量比3：1混合，然后种植，成熟时收获不育株上的种子；(8)种植步骤(7)获得的种子，成熟时收获可育株的种子，即为五星1号回交导入群体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵青松，张梅申，闫龙，杨春燕，张孟臣，史晓蕾，陈强，
申请(专利权)人：河北省农林科学院粮油作物研究所，
类型：发明
国别省市：河北;13