RON组合物及其使用方法技术

本发明专利技术涉及RON组合物、尤其是包含RON激动剂的RON组合物，和使用该组合物治疗疾病的方法。本发明专利技术还涉及诊断RON相关疾病或MSP相关疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】RON组合物及其使用方法 相关申请 本申请涉及并要求2012年11月30日提交的美国临时申请号61/732, 048和2013 年5月15日提交的美国临时申请号61/823, 744的优先权权益，所述专利申请通过引用的 方式完整并入本文。 序列表 本申请含有通过EFS网提交的序列表并因而通过引用方式将其完整并入。所述 ASCII副本在2013年11月20日创建，命名为P5505R1-W0_SL. txt，大小是382千比特。 相关技术背景 克罗恩氏病（CD)和溃疡性结肠炎（UC)是以肠道内部慢性炎症反应为特征的两 种炎性肠病（IBD)形式。在CD和UC患者中检查单核苷酸多态性（SNP)频率的全基因组 相关性研宄（GWAS)已经鉴定到许多共有的和独特的易感性等位基因。使用GWAS和候选 基因方法，已经鉴定到巨噬细胞刺激蛋白（MSP)中认为与CD和UC易感性相关的多态性。 参见例如，Barrett 等人，2008, Nat Genet 40:955-62,和 Consortium WTCC. 2007, Nature 447:661-78。 负责这种增加的遗传风险的可能起因性等位基因是MSP中导致氨基酸689处精 氨酸变成半胱氨酸（689R至689C)的非同义编码性SNP(rs3197999)。参见Goyette等 人，2008, Mucosal Tmmunol 1:131-8。 MSP是由肝表达的纤维蛋白溶酶原相关的可溶性生长因子，以不能够结合其受体 (Met家族受体酪氨酸激酶，Recepteur d'Origine Nantais(RON))的无活性单链蛋白（MSP 原）形式分泌至血清中。MSP原在R483和V484之间的蛋白酶剪切使其转变成能够以高 亲和力结合RON并诱导受体信号传导的有活性、二硫键连接的双链α/β异二聚体。参见 Gaudino 等人，1994, EMBO J 13:3524-32 和 Wang 等人，1994, Science 266:117-9。α 链包 含N末端PAN结构域和后续的4个三环结构域，β -链含有C末端胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶 结构域。MSP原可以由许多不同的丝氨酸蛋白酶以蛋白酶解方式激活，所述丝氨酸蛋白酶包 含参与凝血级联和在炎症反应期间诱导的那些。参见例如，Wang等人，1994, J Biol Chem 269:3436-40。因此，MSP在组织损伤部位的切割导致RON局部激活。 已经报道RON表达在上皮细胞、巨噬细胞亚群、神经内分泌组织和正在发育的骨 中，并且已经与诱导上皮细胞增殖、存活、移行和黏附于胞外基质关联。参见例如Iwama等 人，1995, Blood 86:3394-403、Gaudino 等人，1995, Oncogene 11:2627-37、Danilkovitch 等人，1999，Exp Cell Res248:575-82 和 Danilkovitch 等人，2000，M〇1 Cell Biol 20:2218-27。最近，已经提出MSP-RON途径是炎症反应的关键负向调节物。主要基于对鼠 腹膜巨噬细胞的脂多糖和干扰素-γ刺激的研宄，发现RON信号传导抑制促炎性因子的表 达并上调可能参与组织修复的途径。参见例如，Chen等人，1998, J Immunol, 161:4950-9和 Wilson等人，2008, J Immunol, 181:2303-10。RON在先天炎症反应中的阻抑作用已经得到 体内研宄支持，所述体内研宄显示在RON中具有定向突变的小鼠显示出增强的内毒素攻击 敏感性。参见Waltz等人，2001，J Clin Invest, 108:567-76。这些体外和体内研宄导致了 以下推论：与MSP 689C多态性相关的增加的IBD遗传风险是由MSP和RON之间结合作用的 改变、以及RON介导的巨噬细胞活化抑制作用方面的缺陷所导致的直接结果。参见Khor等 人，2011，Nature 474:307-17、Gorlatova 等人，2011，PLoS One 6:e27269。矛盾的是，更 为近来的研宄发现，689C多态性增加人单核细胞系中的MSP刺激性活性，引起更大的体外 移行和增殖。Hauser 等人，2012, Genes Tmmun 13:321-7〇 因此，需要更好地理解MSP多态性在RON信号传导和RON相关疾病（包括IBD)中 的作用、和更好的疗法用于治疗。 专利技术概述 本申请提供涉及受体d'Origine Nantais(RON)的试剂和组合物，尤其是RON激动 剂，以及其使用方法和生产方法。在一个方面，本专利技术提供一种RON激动剂，其包含抗RON 激动剂抗体或其抗原结合片段、或者与RON结合的巨噬细胞刺激蛋白（MSP)融合蛋白或其 功能性片段。在一些实施方案中，RON激动剂包含MSP融合蛋白或其功能性片段。在一些实 施方案中，MSP融合蛋白包含MSP β和融合结构部分。在某些优选的实施方案中，融合结构 部分包含二聚化结构域，包括而不限于免疫球蛋白Fc结构域。在一些实施方案中，免疫球 蛋白Fc结构域包含IgG Fc结构域；并且在某些其他实施方案中，Fc结构域是IgGl、IgG2、 IgG3或IgG4Fc结构域。在某些其他实施方案中，Fe结构域是IgGlFc结构域。在一些实施 方案中，Fc结构域还包含D265A和N297A(DANA)突变。在某些具体实施方案中，MSP融 合蛋白是二聚体。在某些其他实施方案中，MSP融合蛋白在RON结合方面是双价的。在 ? 某些其他实施方案中，MSP融合蛋白还包含连接MSP β和融合结构部分的接头、优选地肽接 头。在一些实施方案中，肽接头具有2至20个氨基酸残基长度、优选地4-16个氨基酸残基 长度和更优选地8-16个氨基酸残基长度。在一些实施方案中，肽接头具有16个氨基酸残基 长度。在某些其他实施方案中，肽接头具有4个氨基酸残基长度。在某些具体实施方案中， MSP融合蛋白是人MSP融合蛋白。在其他实施方案中，MSP融合蛋白包含人MSPI3。在某些 其他实施方案中，MSP融合蛋白包含人IgGlFc结构域。在一些实施方案中，RON激动剂包含 与 SEQ ID Ν0:20、22 或24 的氨基酸序列具有至少85%、88%、90%、91%、92%、93%、94%、 95 %、96 %、97 %、98 %或99 %序列同一性的MSP融合蛋白。在某些其他实施方案中，RON激 动剂包含与SEQ ID Ν0:20的氨基酸序列具有至少85%、88%、90%、91%、92%、93%、94%、 95 %、96 %、97 %、98 %或99 %序列同一性的MSP融合蛋白。在某些具体实施方案中，MSP融 合蛋白包含SEQ ID Ν0:20的氨基酸序列。 在另外的其他实施方案中，RON激动剂包含抗RON激动剂抗体或其抗原结合片段。 在一些实施方案中，抗RON激动剂抗体包含单克隆抗体YW651. 1或2Ε5. 8. 1的一个或多个 高变区。在某些其他实施方案中，抗体是抗人RON激动剂抗体。在某些其他实施方案中，抗 体是单克隆抗体、嵌合抗体人抗体、双特异性抗体或人源化抗体。 在另一个方面本文档来自技高网...

【技术保护点】
受体d’Origine Nantais(RON)激动剂，其包含抗RON激动剂抗体或其抗原结合片段、或者巨噬细胞刺激蛋白(MSP)融合蛋白或其功能性片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·G·埃根，JA·宏格，S·卡武德尔，R·A·拉扎勒斯，L·桑特尔，吴嫣，M·哈森，WC·梁，
申请(专利权)人：弗·哈夫曼拉罗切有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH