组织生成的方法技术

本文提供了在体内形成三维组织的方法。在一种实施方式中，本文提供了在体内形成三维组织的方法，包括在受试者体内或体表的表面上沉积至少一种包含细胞的组合物。在另一种实施方式中，本文提供了在体内形成三维组织的方法，包括在受试者体内或体表的表面上沉积至少一种包含细胞的组合物和至少一种包含细胞外基质(ECM)的组合物。在另一种实施方式中，本文提供了在体内形成三维组织的方法，包括在受试者体内或体表的表面上沉积至少一种包含细胞的组合物、至少一种包含细胞外基质(ECM)的组合物、和至少一种其他附加组分。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】 本申请要求2012年9月4日提交的美国临时专利申请号61/696, 487的优先权， 通过引用将其全文公开的内容合并入本文。 L 介绍 本文提供了在体内生成三维组织的方法，包括向受试者沉积和/或施用细胞和细 胞外基质组分。 2.
技术介绍
生物打印（例如器官打印）属于研宄和工程领域，其涉及打印设备，例如改良的喷 墨打印机，其沉积生物材料。该技术涉及快速产生和释放包含细胞的液滴，并随后将其精确 沉积在基材上。使用基础的细胞材料通过生物打印的方式构建的组织和器官代表着现今标 准移植方法中所使用的供者来源的组织和器官的有前景的替代物。 3.概沭 本专利技术提供了在体内形成三维组织的方法。在一种实施方式中，本文提供了在体 内形成三维组织的方法，包括在受试者体内或体表的表面上沉积至少一种包含细胞的组合 物。在另一种实施方式中，本文提供了在体内形成三维组织的方法，包括在受试者体内或体 表的表面上沉积至少一种包含细胞的组合物和至少一种包含细胞外基质（ECM)的组合物。 在另一种实施方式中，本文提供了在体内形成三维组织的方法，包括在受试者体内或体表 的表面上沉积至少一种包含细胞的组合物，至少一种包含细胞外基质（ECM)的组合物，和 至少一种其他附加组分。下述4. 1.1节描述了根据本文所述方法可用的细胞。下述4. 1.2 节描述了根据本文所述的方法可以沉积在其上的组织和器官的细胞、ECM、和/或其他附加 组分。下述4. 1. 3节描述了根据本文所述方法可用的ECM。在下述4. 1. 4节描述了根据本 文所述的方法可以沉积在其上的表面细胞，ECM，和/或其他附加组分。 在一种实施方式中，本文描述的在体内形成三维组织的方法中使用的细胞和ECM 作为同一组合物的部分进行沉积。在另一种实施方式中，本文描述的在体内形成三维组织 的方法中使用的细胞和ECM作为不同的组合物的部分进行沉积。在一种【具体实施方式】中， 本文描述的在体内形成三维组织的方法中使用的ECM包含可流动ECM。在另一种具体实施 方式中，本文描述的在体内形成三维组织的方法中使用的细胞和ECM作为不同的组合物的 部分沉进行积，例如，其中ECM与细胞的沉积分开沉积，例如在细胞沉积之前沉积，和/或其 中在细胞沉积之前使ECM脱水。在ECM脱水的实施方式中，它可以之后在期望的时间再水 化，例如在细胞沉积到已经沉积有ECM和细胞的表面上的时间。 在一种【具体实施方式】中，本文所述的在体内形成三维组织的方法中使用的细胞和 /或ECM与一种或多种附加组分，例如生长因子、交联剂、可聚合单体、聚合物、水凝胶等等 的沉积同时，在其之前，或在其之后沉积到受试者体内或体表的表面上。在一种具体实施方 式中，根据本文所述的方法，将一种或多种附加组分生物打印到所述表面上。 在一种具体体表上的表面上，其中所述生物分子包含一种类型的胶原、一种类型 的纤连蛋白、一种类型的层粘连蛋白、或组织粘合剂。在一种【具体实施方式】中，根据本文所 述的方法，将生物分子生物打印到所述表面上。 在一种【具体实施方式】中，不是将本文所述的在体内形成三维组织的方法中使用的 细胞和/或ECM三维打印到受试者体内或体表的表面上，例如不是生物打印细胞和ECM，而 是通过不包括生物打印的方法将其施加于所述表面上。在一种【具体实施方式】中，将不是被 生物打印到受试者体内或体表的表面上的细胞和/或ECM施加于已经过生物打印的表面 上，例如将细胞和/或可流动ECM施加到已经过生物打印到受试者体内或体表的支架，例如 合成支架（如合成基质）上。在一种【具体实施方式】中，细胞和/或ECM仅被施加于支架（例 如表面）的一部分，例如一面上。在另一种【具体实施方式】中，细胞和/或ECM被施加于支架 的所有面上，即整个支架都具有施加于其上的细胞和/或ECM。在另一种【具体实施方式】中， 该支架是聚己酸内酯（PCL)。 在某些实施方式中，本文所述的在体内形成三维组织的方法中使用的细胞和/或 可流动ECM(以及附加组分）被打印到所述表面上，例如细胞和ECM被生物打印（例如使用 喷墨打印机）。在某些实施方式中，本文所述的在体内形成三维组织的方法中使用的细胞和 可流动ECM(以及附加组分）被喷涂到所述表面上。在某些实施方式中，本文所述的在体内 形成三维组织的方法中使用的细胞和/或可流动ECM(以及附加组分）通过雾化沉积到所 述表面上。 在一种【具体实施方式】中，可将细胞、ECM、和/或附加组分沉积于其上的表面包括 人造表面，即人为制造的表面。在另一种【具体实施方式】中，可将细胞、ECM、和/或附加组 分沉积于其上的表面包括受试者（例如人受试者）的组织或一种具体的实施方式中，根据 本文描述的方法，可将ECM、和/或附加组分沉积于其上的表面是已进行生物打印，例如已 根据本文所述的方法进行生物打印的表面。在一种【具体实施方式】中，该表面是聚己酸内酯 (PCL) 〇 在一种【具体实施方式】中，本文所述的方法用于治疗目的，例如该方法用于将对应 于特定组织类型的细胞，或对应于多种组织类型的细胞沉积到所述受试者的表面（组织或 器官）上，所述受试者将会从所述细胞的沉积中受益。这种方法可以另外包括将ECM(例如 可流动ECM)和/或附加组分沉积到所述受试者的所述表面上。 在另一个方面，本文提供了包含细胞和ECM(例如可流动ECM)的组合物，其中所述 组合物适用于本文所述的方法。本文还提供了包含所述组合物的试剂盒，其中所述组合物 在一个或多个容器中，以及根据本文所述的一种或多种方法使用所述组合物的说明书。 3. 1附图简述 图1显示包含聚己酸内酯（PCL)的支架，所述PCL以不同的角度并以产生不同孔 径的支架的方式被生物打印。 图2显示生物打印支架的多个视图，其中细胞外基质（ECM)被施加于支架的两面 上并随后被脱水。 图3显示细胞增殖检测的结果。在包含生物打印的PCL和脱水的ECM的混合支架 上培养的胎盘干细胞在8天的培养期中增殖。 图4显示细胞活力检测的结果。在包含生物打印的PCL和脱水的ECM的混合支架 上培养的胎盘干细胞在8天的培养期中增殖并保持存活。 图5显示包含PCL、ECM和胎盘干细胞的完整的三维混合支架，其中每一个被生物 打印成层（PCL层和ECM/细胞层）。 图6证明在7天的培养期中胎盘干细胞遍布在整个三维生物打印支架上。 图7显示细胞活力检测的结果。与ECM和PCL -起生物打印以形成三维混合支架 的胎盘干细胞在7天的培养期中增殖并保持存活。 图8证明与ECM和PCL -起生物打印以形成三维混合支架的胎盘干细胞在7天的 培养期中遍布在混合支架的ECM上。 图9显示细胞增殖检测的结果。在通过生物打印PCUECM和胎盘干细胞生成的三 维混合支架上培养的胎盘干细胞在7天的培养期中增殖。 图10显示包含PCL、胎盘ECM和胰岛素产生细胞（β -TC-6细胞）的生物打印支 架。 图11显示细胞增殖检测的结果，在包含PCL、胎盘ECM和胰岛素产生细胞的生物打 印支架中的胰岛素产生细胞（β-Τ06细胞）的数量在14天的培养期中保持稳定。 图12显示由包含PCL、胎盘ECM和胰岛素产生细胞（I3-TC-6细胞）的生物打印支 架产生的胰岛素水平本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种形成三维组织的方法，包括将至少一种细胞组合物和细胞外基质(ECM)沉积在受试者体内或体表的表面上。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：莫希特·B·巴迪亚，罗伯特·J·哈黎里，沃尔夫冈·霍弗伽纳尔，王佳伦，叶倩，
申请(专利权)人：人类起源公司，
类型：发明
国别省市：美国;US