黑加仑中矢车菊‑3‑芸香糖苷的HPLC测定方法技术

一种黑加仑中矢车菊‑3‑芸香糖苷的HPLC测定方法，包括如下步骤：步骤一、选取成熟新鲜的黑加仑果实，清洗干净后充分压榨打浆；步骤二、将步骤一所得浆液及黑加仑果实残渣利用乙醇充分提取矢车菊‑3‑芸香糖苷；步骤三、将步骤二所得含有矢车菊‑3‑芸香糖苷的滤液利用高效液相色谱仪Agilent 2600，采用Zorbax SB C18柱；紫外检测器：VWD，G1314F，检测波长为520nm；流动相A液选取浓度1.6％的甲酸水溶液，B液选取浓度1.6％的甲酸乙腈溶液；柱温箱温度30；℃进样量10ul；流速1ml/min，进行梯度洗脱；步骤四、依据梯度洗脱数据建立矢车菊‑3‑芸香糖苷标准曲线回归方程。本发明专利技术方法简便、准确，可用于黑加仑果实质量控制。平均回收率分别为96.4％。

【技术实现步骤摘要】
黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法
本专利技术涉及药物分析提取
，特别涉及一种黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法。
技术介绍
黑加仑学名黑穗醋栗(RibesnigrumL.)又名黑醋栗，黑豆果，紫梅，虎耳草目茶藨子科茶藨子属，小型灌木，其成熟果实为黑色小浆果，内富含维生素C、花青素，可以食用。也可以加工成果汁，果酱等食品。黑加仑含有非常丰富的维生素C、磷、镁、钾、钙、花青素、酚类物质。目前已经知道的黑加仑的保健功效包括预防痛风、贫血、水肿、关节炎、风湿病、口腔和咽喉疾病、咳嗽等。黑加仑是我国北方的主要浆果产品，产量较高，果实营养丰富并具有多种花青素昔，还具有重要的生理功能和保健功能，具有很好的市场前景。现有的黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的测定方法，步骤繁琐，准确率低，且在测定过程中会对黑加仑果实造成较大损耗，造成产品经济效益低下。矢车菊-3-芸香糖苷是黑加仑果实中的主要色素成分。本专利技术在现有技术基础上建立了一种黑加仑果实中矢车菊素-3-O-芸香糖苷含量的HPLC测定方法。
技术实现思路
为解决上述现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法。为达到上述目的，本专利技术的技术方案为：一种黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法，包括如下步骤：步骤一、选取成熟新鲜的黑加仑果实，清洗干净后充分压榨打浆；步骤二、将步骤一所得浆液及黑加仑果实残渣利用乙醇充分提取矢车菊-3-芸香糖苷；步骤三、将步骤二所得含有矢车菊-3-芸香糖苷的滤液利用高效液相色谱仪Agilent2600，采用ZorbaxSBC18柱；紫外检测器：VWD，G1314F，检测波长为520nm；流动相A液选取浓度1.6％的甲酸水溶液，B液选取浓度1.6％的甲酸乙腈溶液；柱温箱温度30；℃进样量10ul；流速1ml/min，进行梯度洗脱；步骤四、依据梯度洗脱数据建立矢车菊-3-芸香糖苷标准曲线回归方程。进一步的，所述步骤三中，ZorbaxSBC18柱的具体参数为250mm×4.60mm，5μm。进一步的，所述步骤三中，梯度洗脱的具体操作为：0-5min，85％A液，15％B液；5-10min，80％A液，20％B液；10-30min，72％A液，28％B液；30-36min，100％B液。进一步的，所述步骤四中：矢车菊-3-芸香糖苷标准曲线回归方程为：Y＝2×107X－33120(r＝0.9998)，在0.1041～1.041μg范围内线性关系良好，平均回收率分别为96.4％，矢车菊素-3-O-芸香糖苷含量范围为5.263～12.829mg/g。相对于现有技术，本专利技术的有益效果为：本专利技术方法简便、准确，可用于黑加仑果实质量控制。结果显示利用本专利技术矢车菊-3-芸香糖苷标准曲线回归方程为：Y＝2×107X－33120(r＝0.9998)，在0.1041～1.041μg范围内线性关系良好，平均回收率分别为96.4％，矢车菊素-3-O-芸香糖苷含量范围为5.263～12.829mg/g。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术技术方案做进一步详细描述：试验例：仪器：Agilent2600；检测波长：515nm,，检测器：VWD(G1314F)；柱温箱温度：30℃，TCC(G1316A)；进样量：10ul流速：1ml/min流动相：A液：1.6％甲酸水溶液；B液：1.6％甲酸甲醇溶液运行程序：时间A液(％)B液(％)085155802010722830406036100矢车菊-3-芸香糖苷保留时间为13.5min采用HPLC法测定黑加仑果实中矢车菊素-3-O-芸香糖苷的含量，仪器型号为Agilent2600；采用ZorbaxSBC18柱(250mm×4.60mm，5μm)；紫外检测器(VWD，G1314F)，检测波长为520nm；流动相A液为1.6％甲酸水溶液，B液为1.6％甲酸乙腈溶液；柱温箱温度30；℃进样量10ul；流速1ml/min。进行梯度洗脱：0-5min，85％A液，15％B液；5-10min，80％A液，20％B液；10-30min，72％A液，28％B液；30-36min，100％B液。结果：矢车菊-3-芸香糖苷标准曲线回归方程为：Y＝2×107X－33120(r＝0.9998)，在0.1041～1.041μg范围内线性关系良好，平均回收率分别为96.4％，矢车菊素-3-O-芸香糖苷含量范围为5.263～12.829mg/g。以上所述，仅为本专利技术的具体实施方式，但本专利技术的保护范围并不局限于此，任何不经过创造性劳动想到的变化或替换，都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。因此，本专利技术的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黑加仑中矢车菊‑3‑芸香糖苷的HPLC测定方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、选取成熟新鲜的黑加仑果实，清洗干净后充分压榨打浆；步骤二、将步骤一所得浆液及黑加仑果实残渣利用乙醇充分提取矢车菊‑3‑芸香糖苷；步骤三、将步骤二所得含有矢车菊‑3‑芸香糖苷的滤液利用高效液相色谱仪Agilent 2600，采用Zorbax SB C18柱；紫外检测器：VWD，G1314F，检测波长为520nm；流动相A液选取浓度1.6％的甲酸水溶液，B液选取浓度1.6％的甲酸乙腈溶液；柱温箱温度30℃；进样量10ul；流速1ml/min，进行梯度洗脱；步骤四、依据梯度洗脱数据建立矢车菊‑3‑芸香糖苷标准曲线回归方程。

【技术特征摘要】
1.一种黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、选取成熟新鲜的黑加仑果实，清洗干净后充分压榨打浆；步骤二、将步骤一所得浆液及黑加仑果实残渣利用乙醇充分提取矢车菊-3-芸香糖苷；步骤三、将步骤二所得含有矢车菊-3-芸香糖苷的滤液利用高效液相色谱仪Agilent2600，采用ZorbaxSBC18柱；紫外检测器：VWD，G1314F，检测波长为520nm；流动相A液选取浓度1.6％的甲酸水溶液，B液选取浓度1.6％的甲酸乙腈溶液；柱温箱温度30℃；进样量10ul；流速1ml/min，进行梯度洗脱；梯度...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏惠，梁东，唐懿，吕秀兰，王迅，王志辉，孙国超，林玲，朱婷婷，杨涛，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：四川;51