本发明专利技术公开了属于纳米材料制备技术领域的一种用近红外荧光示踪的pH响应的疏水药物纳米胶囊及其制备方法，并将其应用于体内成像、癌症治疗、药物追踪的研究中。本发明专利技术合成包裹有疏水抗癌药物及Ag2S纳米颗粒的，pH响应(酸性环境中降解)的，直径为70-150nm左右的用近红外荧光示踪的pH响应的疏水药物纳米胶囊，在水相中分散性稳定，在808nm光激发下，发出稳定且强烈的近红外二区荧光，可用于药物在血液循环过程及其在肿瘤位置的实时追踪；本发明专利技术中纳米胶囊制备方法新颖简单，与之前报道过的药物运输载体比较，该药物载体具有癌细胞靶向、pH响应特性，可发出近红外二区荧光，荧光信号强，可用于药物实时追踪及疗效鉴定。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于纳米材料制备
，特别涉及一种pH响应的疏水药物纳米胶囊的药物释放及近红外荧光追踪药物体内分布的生物医药应用。技术背景药物追踪对于药代动力学研宄尤其重要。而药物在体内循环过程中的实时追踪往往受限于分析方法的空间分辨率或时间分辨率，如荧光成像采用的一般荧光探针发出可见光，难以穿透动物组织，而核磁共振成像、CT、B超等成像方法采集数据需要较长时间，并非实时成像。而近红外荧光成像法利用的近红外荧光探针Ag2S纳米颗粒在波长为808nm近红外光激发下发出近红外二区(IlOO-HOOnm)，均可穿透组织，而荧光成像本身即可瞬时成像，所得数据均为实时数据，非常适合用于药物在体内循环过程的实时追踪。药物运输研宄中靶向运输及可控释放尤为重要。纳米药物胶囊本身可利用肿瘤组织的高通透性和高滞留性，经过体内循环过程，在肿瘤组织积累，被称为被动靶向。主动靶向利用的是纳米胶囊表面偶联的多肽或其他识别肿瘤细胞表面蛋白的靶向分子，与肿瘤细胞特异结合时药物胶囊在肿瘤组织富集并释放药物。而药物的可控释放则关系到其能否在有效杀灭癌细胞的同时不伤害正常组织细胞，对减轻癌症治疗副作用至关紧要。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，并将其应用于体内成像、癌症治疗、药物追踪的研宄中。本专利技术所述的用近红外荧光示踪的pH响应的疏水药物纳米胶囊的制备方法，其具体步骤为:a.将0.2-2.0g聚琥珀酰亚胺加入20_50mL的N，N- 二甲基甲酰胺中，加热至60-120°C保持1-4小时直至溶解；然后加入0.3-3.0mL油胺，保持60_120°C 4-8小时；最后加入甲醇使其沉淀，离心分离，然后将沉淀分散于2-10mL三氯甲烷中，得到油胺接枝聚琥珀酰亚胺的三氯甲烷溶液；b.将 1-1Omg 聚(乙稀-乙二醇)，0.1-1.0mg疏水药物，50-200 μ L 0.01-0.1mmoI/L近红外荧光材料的三氯甲烷溶液，200-400 μ L油胺接枝聚琥珀酰亚胺的三氯甲烷溶液，200-800 μ L三氯甲烷以及8-15mL去离子水和50-100 μ L 0.05-0.2mmol/L NaOH水溶液混合，200-400W功率下超声4-9min，得到的乳液在40-60°C下搅拌0.5-2.5h蒸发三氯甲烷；反应结束后，离心洗涤，产物分散在l_5mL去离子水中得到纳米胶囊溶液；c.向ImL b步骤所得纳米胶囊溶液中加入1-1Omg的1_(3_ 二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亚胺盐酸盐、1-1Omg的N-羟基琥珀酰亚胺及1-1Omg的靶向多肽，常温下搅拌2_8小时，离心洗涤，沉淀重新分散到PH 7.4磷酸盐缓冲溶液中即得用近红外荧光示踪的pH响应的疏水药物纳米胶囊。所述的疏水药物为紫杉醇或喜树碱。所述的近红外荧光材料为表面螯合油酸、油胺、或十二硫醇的Ag2Sm米颗粒，粒径为3-10nm，激发光波长为808nm，发射光波长为1100_1400nm。所述的靶向多肽为含有RGD三肽的肽链。可识别癌细胞表面过度表达的蛋白，可使纳米胶囊定向运输到肿瘤位置。上述合成的用近红外荧光示踪的pH响应的疏水药物纳米胶囊在中性环境中稳定存在，而在酸性环境中降解，药物可从中释放。本专利技术的有益效果:本专利技术合成包裹有疏水抗癌药物及Ag2S纳米颗粒的，pH响应(酸性环境中降解)的，直径为70-150nm左右的用近红外荧光示踪的pH响应的疏水药物纳米胶囊，在水相中分散性稳定，在808nm光激发下，发出稳定且强烈的近红外二区荧光，可用于药物在血液循环过程及其在肿瘤位置的实时追踪；本专利技术中纳米胶囊制备方法新颖简单，与之前报道过的药物运输载体比较，该药物载体具有癌细胞靶向、PH响应特性，可发出近红外二区荧光，荧光信号强，可用于药物实时追踪及疗效鉴定。【附图说明】图1为实施例1制备包裹有紫杉醇及Ag2S纳米颗粒的纳米胶囊的TEM照片；图2为实施例1制备包裹有紫杉醇及Ag2S纳米颗粒的纳米胶囊在pH5.0磷酸盐缓冲溶液中培养24小时后的TEM照片；图3为实施例1包裹有紫杉醇及Ag2S纳米颗粒的纳米胶囊分别在pH7.4和pH5.0磷酸盐缓冲溶液中紫杉醇释放比例随时间的变化；图4为实施例1包裹有紫杉醇及Ag2S纳米颗粒的纳米胶囊经尾静脉注射入小鼠体内半小时后的近红外荧光成像图，激发光为808nm激光；图5为实施例1包裹有紫杉醇及Ag2S纳米颗粒的纳米胶囊经尾静脉注射入小鼠体内5小时后的近红外荧光成像图，激发光为808nm激光；图6为实施例2包裹有喜树碱的纳米胶囊的TEM照片。【具体实施方式】实施例1:a.油胺接枝聚琥珀酰亚胺的制备方法:将1.6g聚琥珀酰亚胺(PSI)加入32mL N, N- 二甲基甲酰胺中加热至80°C保持I小时直至溶解；然后加入2.1mL油胺，维持100°C 4小时；最后加入甲醇使其沉淀，离心分离，然后分散于8mL三氯甲烷，得到油胺接枝聚琥珀酰亚胺的三氯甲烷溶液；b.利用油胺接枝聚琥珀酰亚胺将疏水的抗癌药物及近红外荧光示踪材料包裹成纳米胶囊:将5mg聚(乙稀-乙二醇)，50 μ L 0.05mmol/L表面螯合油酸的Ag2S纳米颗粒的三氯甲烷溶液，200 μ L油胺接枝聚琥珀酰亚胺的三氯甲烷溶液，1.0mg紫杉醇，600 μ L三氯甲烷以及1mL去离子水和50 μ L 0.lmmol/L NaOH水溶液混合；300W功率下超声6min，得到的乳液在55°C下搅拌2小时蒸发三氯甲烷；反应结束后，离心洗涤，产物分散在5mL去离子水中得到纳米胶囊溶液；c.纳米胶囊偶联靶向多肽:向ImL b步骤所得纳米胶囊溶液中加入7mgl-(3_ 二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亚胺盐酸盐EDC、Img N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)及Img含有RGD三肽的肽链，常温下搅拌4小时，离心洗涤，沉淀重新分散到ImL pH 7.4磷酸盐缓冲溶液中。步骤b制得的包裹有紫杉醇和Ag2S纳米颗粒的纳米药物胶囊，大小约为70-150nm，其TEM照片如图1所示。在去离子水或pH 7.4磷酸盐缓冲溶液中分散稳定，在酸性的PH 5.0磷酸盐缓冲溶液中，纳米胶囊降解，其TEM照片如图2所示。药物紫杉醇可从中释放。紫杉醇在不同pH值缓冲溶液中释放随时间变化如图3所示。如图4、图5所示，所得纳米药物胶囊偶联识别癌细胞的多肽后可靶向到肿瘤组织，胶囊中的Ag2S纳米颗粒作为荧光示踪试剂。实施例2:a.油胺接枝聚琥珀酰亚胺的制备方法:将1.6g聚琥珀酰亚胺(PSI)加入32mL N, N- 二甲基甲酰胺中加热至80°C保持I小时直至溶解；然后加入2.1mL油胺，维持100°C 4小时；最后加入甲醇使其沉淀，离心分离，然后分散于8mL三氯甲烷，得到油胺接枝聚琥珀酰亚胺的三氯甲烷溶液；b.利用油胺接枝聚琥珀酰亚胺将疏水的抗癌药物包裹成纳米胶囊:将5mg聚(乙稀-乙二醇)，50 μ L 0.05mmol/L表面螯合十二硫醇的Ag2S纳米颗粒的三氯甲烷溶液，200 μ L 200mg/mL油胺接枝聚琥珀酰亚胺的三氯甲烷溶液，1.0mg喜树碱，600 μ L三氯甲烷以及1mL去离子水和50 μ L 0.lmmol/L NaOH水溶液混合；300W功率下超声6min，得到的乳液在55°C下搅拌2小时蒸发三氯甲烷；反应结束后，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用近红外荧光示踪的pH响应的疏水药物纳米胶囊的制备方法，其特征在于，其具体步骤为：a.将0.2‑2.0g聚琥珀酰亚胺加入20‑50mL的N,N‑二甲基甲酰胺中，加热至60‑120℃保持1‑4小时直至溶解；然后加入0.3‑3.0mL油胺，保持60‑120℃4‑8小时；最后加入甲醇使其沉淀，离心分离，然后将沉淀分散于2‑10mL三氯甲烷中，得到油胺接枝聚琥珀酰亚胺的三氯甲烷溶液；b.将1‑10mg聚(乙烯‑乙二醇)，0.1‑1.0mg疏水药物，50‑200μL0.01‑0.1mmol/L近红外荧光材料的三氯甲烷溶液，200‑400μL油胺接枝聚琥珀酰亚胺的三氯甲烷溶液，200‑800μL三氯甲烷以及8‑15mL去离子水和50‑100μL0.05‑0.2mmol/LNaOH水溶液混合，200‑400W功率下超声4‑9min，得到的乳液在40‑60℃下搅拌0.5‑2.5h蒸发三氯甲烷；反应结束后，离心洗涤，产物分散在1‑5mL去离子水中得到纳米胶囊溶液；c.向1mL b步骤所得纳米胶囊溶液中加入1‑10mg的1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、1‑10mg的N‑羟基琥珀酰亚胺及1‑10mg的靶向多肽，常温下搅拌2‑8小时，离心洗涤，沉淀重新分散到pH7.4磷酸盐缓冲溶液中即得用近红外荧光示踪的pH响应的疏水药物纳米胶囊。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：汪乐余，何倩，黄盛，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：北京;11
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