本发明专利技术涉及一种降胆固醇副干酪乳杆菌KL1-Liu益生菌巧克力的制作方法，适用于糖果制品中益生菌巧克力的生产。本发明专利技术配方是由副干酪乳杆菌KL1-Liu菌粉、半甜黑巧克力浆、白巧克力浆、芝麻、抹茶粉、草莓粉、杏仁碎、葡萄干碎组成。本发明专利技术利用副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)KL1-Liu CGMCC No.7029，经高密度发酵、离心浓缩、微胶囊处理及冷冻干燥等工序制备微胶囊菌粉；将原料经过精磨、精炼、调温、加入微胶囊菌粉、冷却、脱模及包装后制备成益生菌巧克力。本发明专利技术制作的益生菌巧克力具有良好的贮藏稳定性。本发明专利技术制作的巧克力原料来源方便，工艺简单，制作周期短，适于工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种降胆固醇的副干酪乳杆菌益生菌巧克力制作方法，适用于糖果制品中降胆固醇益生菌巧克力的制作和生产。
技术介绍
益生菌(Probiotics)因其能改善肠道微生物生态平衡并控制肠道感染、降低血清胆固醇水平、改善乳糖不耐症和刺激特异性或非特异性免疫反应，以及增强免疫力等作用而被越来越多的研究者和消费大众推崇。但目前食品中的益生菌制品主要集中在功能性酸奶和益生菌奶片方面。巧克力是一种美味时尚的食品，随着人们对生活水平要求的提高，其在国内的消费量日益增加。但巧克力产品因具有高糖与高脂肪的特点使得很多注重健康的消费者严谨控制自己的食用量，甚至将其拒之门外。本专利技术将可可的营养作用和益生菌保健功效巧妙结合，使人们在尽情享受美味丝滑的巧克力产品的同时又达到了降低血清胆固醇、调节肠道菌群平衡等效果。将副干酪乳杆菌KL1-Liu制成的发酵剂用于动物实验，实验表明其具有显著的降血清胆固醇的功效。试验数据显示，该菌对高胆固醇血症大鼠血清的TC、TG、LDL-C含量分别有极显著(P＜0.01)和显著(P＜0.05)降低功效，而对高胆固醇血症大鼠血清的HDL-C含量有一定程度升高作用，说明了副干酪乳酸菌发酵剂对实验型高胆固醇血症大鼠血清有显著的降胆固醇作用。进入人体的益生菌必须具有较高的活菌数量和定植能力，确保经过消化道后能大量存活而发挥其益生菌的作用。为此将具有降胆固醇作用与耐受胃肠道逆环境的副干酪乳杆菌KL1-Liu采用特殊的微胶囊化技术，处理后的微胶囊菌粉能耐受巧克力基料和夹心馅料的制作温度，并在常温下保持活力。检测结果表明：该产品益生菌活菌数量≥108CFU/g，菌落总数、大肠菌群、可可含量均合格。目前国内关于巧克力的专利主要集中在制作方法和外形及包装设计方面。天津市食品加工工程中心申请的“一种含益生菌夹心的巧克力”(公开号：CN104068187A)，将益生菌加入到夹心馅料中，但专利中没有涉及益生菌活菌检测试验。润盈生物工程(上海)有限公司公开了专利“一种含益生菌的巧克力及其制作方法和用途”(公开号：CN101518294A)，该专利技术虽然涉及到将菌体进行冻干或经微胶囊处理，但其气体悬浮微胶囊技术的设备投资较大，且专利中提及的益生菌为较普遍的双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。但是关于具有降胆固醇功效的益生菌巧克力的制作方法国内尚未见专利和文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用产胆盐水解酶并具有降低血清胆固醇功效的副干酪乳杆菌KL1-Liu制备降胆固醇益生菌巧克力的制作方法。本专利技术是通过以下技术方案实现的：为达到上述目的，本专利技术的益生菌巧克力配方组成(W/W，质量分数)：配方1(芝麻夹心口味)：副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊菌粉0.1％～1.0％[益生菌活菌数为(1.0～5.0)×1011CFU/g]，半甜黑巧克力浆60％～70％，白巧克力浆30％～38％，芝麻2～4％；配方2(抹茶口味)：副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊菌粉0.1％～1.0％[益生菌活菌数为(1.0～5.0)×1011CFU/g]，白巧克力浆95％～97％，抹茶粉3％～5％；配方3(草莓口味)：副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊菌粉0.1％～1.0％[益生菌活菌数为(1.0～5.0)×1011CFU/g]，半甜黑巧克力浆90％～95％，草莓粉5％～10％；配方4(果仁口味)：半甜黑巧克力浆60％～70％，白巧克力浆20％～25％，杏仁碎8％～12％，葡萄干碎3％～5％。上述配方中的半甜黑巧克力浆由一定比例的可可液块、可可脂、白砂糖、食盐、卵磷脂以及香料混合在44℃～48℃下融化后制备得到。上述配方中的白巧克力浆由一定比例的可可脂、淡奶油、全脂奶粉以及白砂糖混合在44℃～48℃下融化后制备得到。所述方法中，副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)KL1-Liu分离筛选自吉林、呼和浩特市普通家庭的藏灵菇(又称开菲尔粒)，并已于2012年12月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址：北京市朝阳区大屯路，其保藏号为：CGMCC No.7029(菌株KL1-Liu)。在含有碳酸钙和纳他霉素的MRS选择性培养基上，副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)KL1-Liu菌株的菌落大小2～3mm，菌落有较高黏性，表面粗糙如雪花状，边缘不规则，无光泽，扁平，灰白色，半透明；个体形态呈杆状，长短不等，短链状排列，G+无芽孢杆菌。所述方法中，副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊菌粉为副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊处理后的菌粉与冻干保护剂的混合物。所述方法中，副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊菌粉的制备步骤如下：(1)采用立式高速冷冻离心机将经过扩大培养与高密度发酵的副干酪乳杆菌KL1-Liu发酵液于4℃条件下，6000r/min离心10～20min，弃上清液，收集得到菌泥。(2)将收集的菌泥经过微胶囊化处理，按离心前发酵液1/10体积的量，加入含有11％～16％脱脂奶粉(伊利牌高蛋白高钙脱脂奶粉)冻干保护剂的冻干机中，混合均匀后，得到微胶囊化浓缩活菌制剂。(3)将微胶囊化浓缩活菌制剂于-40℃低温冰箱中预冻10h至完全冻结状态，得到预冻微胶囊活菌制剂。(4)利用6L LABCONCO真空冷冻干燥机(美国)将预冻活菌制剂于冻干温 度-55℃、真空度0.14mBar的条件下，冻干48h至完全干燥状态，得到冻干微胶囊活菌制剂。所述方法中，益生菌巧克力中的主要菌种为藏灵菇源副干酪乳杆菌KL1-Liu益生菌。该菌株具有良好的降低血清胆固醇功效，并有整肠作用，可在肠道内建立一个有利于健康长寿的微生态平衡系统，促进消化吸收，并有改善便秘作用，可以预防消费者的心血管疾病、胃肠道疾病等病症。上述方法得到降胆固醇的副干酪乳杆菌KL1-Liu益生菌巧克力制作配方及其产品，以及专用生产菌株属于本专利技术保护范围。附图说明图1为应用副干酪乳杆菌KL1-Liu生产降胆固醇芝麻夹心口味益生菌巧克力的流程图，说明如下：(1)半甜黑巧克力浆制备：将可可液块35％～40％(W/W，质量分数，以下相同)，可可脂20％～25％，白砂糖35％～40％以及食盐0.05％～0.1％等原料按比例经过混合，将上述混合物投入精磨机进行精磨，控制合适的温度，进行适当时间的精炼，在精炼快结束时加入卵磷脂0.3％～0.5％，香料0.05％～0.1％，精炼结束后由于巧克力浆温度较高，需在保温缸中调温，然后制备得到半甜黑巧克力浆。(2)外壳制备：在30℃条件下将半甜黑巧克力浆浇注到事先经过清洗、干燥的半球形硅胶模具中适量注模，制备得到巧克力外壳。(3)白巧克力浆制备：将可可脂65％～70％，淡奶油8％～10％，白砂糖10％～15％，全脂奶粉10％～15％等原料经过混合、精磨、精炼以及调温后制备得到白巧克力浆。(4)夹心制备：将炒熟并研磨的芝麻粉和副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊菌粉与白本文档来自技高网...
【技术保护点】
副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)KL1‑Liu CGMCC No.7029。
【技术特征摘要】
1.副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)KL1-Liu CGMCC No.7029。
2.一种利用产胆盐水解酶的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)
KL1-Liu CGMCC No.7029制备芝麻夹心口味益生菌巧克力的方法，其特征在于：
(1)益生菌巧克力配方组成：副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊菌粉0.1％～1.0％，
半甜黑巧克力浆60％～70％，白巧克力浆30％～38％，芝麻2％～4％；(2)KL1-Liu
益生菌微胶囊菌粉的制备：将经过扩大培养与高密度发酵的副干酪乳杆菌
KL1-Liu发酵液于4℃条件下，6000r/min离心10～20min，弃上清液，收集得
到菌泥；将收集的菌泥经过微胶囊化处理，按离心前发酵液1/10体积的量，加
入含有11％～16％脱脂奶粉冻干保护剂的冻干机中，混合均匀后，得到微胶囊化
浓缩活菌制剂；将浓缩活菌制剂于-40℃低温冰箱中预冻10h至完全冻结状态，
得到预冻微胶囊活菌制剂；利用美国6L LABCONCO真空冷冻干燥机将预冻发
酵剂于-55℃、真空度0.14mBar的条件下，冻干48h至完全干燥状态，得到副干
酪乳杆菌KL1-Liu益生菌微胶囊菌粉；(3)芝麻夹心口味益生菌巧克力的制备：
将经过精磨、精炼、调温得到的半甜黑巧克力浆制备得到巧克力外壳；将经过
精磨、精炼、调温得到的白巧克力浆与益生菌微胶囊菌粉和芝麻粉混合制成芝
麻夹心；将芝麻夹心球投入巧克力外壳中，经封顶、冷却、脱模、包装后制备
成芝麻夹心口味益生菌巧克力。
3.一种利用产胆盐水解酶的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)KL1-Liu
CGMCC No.7029制备抹茶口味益生菌巧克力的方法，其特征在于：(1)益生菌巧
克力配方组成：副干酪乳杆菌KL1-Liu微胶囊菌粉0.1％～1.0％，白巧克力浆
95％～97％，抹茶粉3％～5％；(2)KL1-Liu益生菌微胶囊菌粉的制备：将经过扩
大培养与高密度发酵的副干酪乳杆菌KL1-Liu发酵液于4℃条件下，6000r/min
离心10～20min，弃上清液，收集得到菌泥；将收集的菌泥经过微胶囊化处理，
按离心前发酵液1/10体积的量，加入含有11％～16％脱脂奶粉冻干保护剂的冻
干机中，混合均匀后，得到微胶囊化浓缩活菌制剂；将浓缩活菌制剂于-40℃低
温冰箱中预冻10h至完全冻结状态，得到预冻微胶囊活菌制剂；利用美国6L
LABCONCO真空冷冻干燥机将预冻发酵剂于-55℃、真空度0.14mBar的条件下，
冻干48h至完全干燥状态，得到副干酪乳杆菌KL1-Liu益生菌微胶囊菌粉；(3)
抹茶口味益生菌巧克力的制备：将经过精磨、精炼、调温得到的白巧克力浆与
抹茶粉混匀，经注模、冷却、脱模、包装后制备成抹茶...
【专利技术属性】
技术研发人员：高秀芝，刘慧，熊利霞，张营营，金君华，张红星，谢远红，
申请(专利权)人：北京农学院，
类型：发明
国别省市：北京;11
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