一种测定板栗淀粉含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种测定板栗淀粉含量的方法，属于食品检测技术领域。本发明专利技术的方法，其步骤为，用乙醚和乙醇的淋洗待测样品，然后用α-淀粉酶酶解待测样品，再用硫酸蒽酮与酶解产物反应，在620nm波长下测定产物的吸光值。用上述方法检测标准淀粉溶液的的吸光值，制作标准曲线。将样品的吸光值与标准曲线比对，再通过公式计算出淀粉浓度。本发明专利技术的方法专一性强，适用于同时含有大量淀粉和其它糖类果实的测定，二、可彻底去除样品中其它糖类物质干扰，提高实验结果的准确性；三、操作流程简单，工作效率高，可提高实验结果的精确性。

【技术实现步骤摘要】
一种测定板栗淀粉含量的方法
本专利技术涉及一种测定板栗淀粉含量的方法，属于食品检测

技术介绍
淀粉和总糖是板栗坚果品质的重要组成成分，二者同时存在于板栗果肉中，并随着贮藏时间延长，淀粉逐渐转化为糖类物质。在进行板栗品质测定时，淀粉往往是必不可少的测定指标，但由于淀粉和糖同时存在，且二者均属多糖类物质，因此在单独测定淀粉时容易受到其它糖类物质干扰，从而影响测定结果的准确性和精确性。就现有淀粉测定方法，如蒽酮法，酶水解法，酸水解法等，或因无法排除糖类干扰，或因操作繁杂，都无法准确测定类似板栗等同时含淀粉和总糖的果实中的淀粉含量。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能准确测定板栗淀粉含量的方法。本专利技术的技术方案一种测定板栗淀粉含量的方法，包括以下步骤：一、检测待测样品（1-1）板栗鲜果肉切碎后于80℃烘干至恒重，然后粉碎至过0.125mm孔径筛，得样品；（1-2）称取100mg样品置于中速定性滤纸上，先用乙醚冲洗，再用体积浓度为85%的酒精冲洗；（1-3）将滤纸上的残留物于沸水浴加热15min，取出冷却；冷却至室温；（1-4）向冷却后的残留物中加入10ml质量浓度为0.5%的α-淀粉酶溶液，于60℃下酶解至残留物中的淀粉完全酶解，得酶解液；（1-5）将酶解液过滤，滤液用蒸馏水定至100ml，得待测液；（1-6）取0.4ml待测液与0.6ml蒸馏水和5ml硫酸蒽铜溶液混合，于沸水浴加热6min后迅速冷却；然后以蒸馏水作为对照，在620nm波长下测定吸光值A；所述硫酸蒽铜溶液的浓度为2.0g·L-1；二、制作标准曲线（2-1）将250mg·L-1的淀粉溶液于沸水浴加热15min，取出冷却，然后加入10ml质量浓度为0.5%的α-淀粉酶溶液，于60℃酶解至淀粉溶液中的淀粉完全酶解，得酶解液；（2-2）将酶解液用蒸馏水稀释，得不同浓度的标准液；（2-3）将标准液于沸水浴中加热6min后迅速冷却，然后以蒸馏水作为对照，在620nm波长下测定吸光值；以标准液的淀粉含量B（单位为μg）作为横坐标，吸光值A0作为纵坐标，绘制标准曲线；三、将步骤一的测得的A与步骤二的准曲线比对，得出淀粉含量B，然后根据公式I计算出样品中淀粉含量；公式I：式中：W为样品质量，mg。上述方法，步骤（1-2）中，用50ml乙醚分多次冲洗，用50ml酒精分多次冲洗。上述方法，步骤（1-4）中，所述完全酶解是指：向酶解液加入I-KI溶液，酶解液不显示蓝色；所述I-KI溶液：3.6gKI、1.3gI溶于20ml蒸馏水中而成。本专利技术方法的测定原理：脂肪溶于乙醚，可溶性总糖溶于乙醇和水，而淀粉不溶于乙醚和乙醇，因此可通过乙醚和乙醇的淋洗作用去除淀粉中夹杂的脂肪和可溶性总糖，并保证淀粉含量不受损失。α-淀粉酶可将淀粉水解成双糖，在较高温度下，浓硫酸可使糖类物质脱水生成糖醛或其衍生物，生成的糖醛类物质与蒽酮脱水缩合，形成蓝绿色化合物，该物质在620nm处有最大吸收值。在20-200μg范围内其颜色深浅与可溶性总糖含量成正比，而且这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30μg左右即可进行测定，因此可做为微量糖类物质测定之用。上述方法，步骤1-1中，于80℃烘干，有助于杀死一些酶类，同时不会破坏样品中的化学成分。烘干时低于80℃导致干燥时间过长，也可能无法抑制某些酶的活性。淀粉酶有3种，即α-淀粉酶、β淀粉酶和淀粉磷酸解酶。其功能为：α-淀粉酶能同时水解直链淀粉和支链淀粉，其产物为葡萄糖、麦芽糖及小分子的糊精，分解的产物较为彻底；β-淀粉酶也能水解直链淀粉和支链淀粉，但产物为麦芽糖和极限糊精，极限糊精为大分子大分子糖类物质，因此β-淀粉酶的分解产物不彻底，无法定量测定；淀粉磷酸解酶与前两种酶不同，其分解淀粉并不需要水，而是加入磷酸，其实质是磷酸化酶而非水解酶。板栗中的淀粉既有支链淀粉又有直链淀粉，故步骤1-4中在水解时使用α-淀粉酶。在本专利技术中，由于添加了足量的α-淀粉酶（10ml），可保证淀粉被充分水解，因此提高了测定的准确性。所述硫酸蒽铜溶液为采用2.0g·L-1的浓度；该浓度下，硫酸蒽酮的颜色适中，不会对反应后出现的颜色产生干扰，保证产物在620nm下吸收值的准确性。有益效果本专利技术的方法的优点在于：一、专一性强，适用于同时含有大量淀粉和其它糖类果实的测定，二、可彻底去除样品中其它糖类物质干扰，提高实验结果的准确性；三、操作流程简单，工作效率高，可提高实验结果的精确性。说明书附图图1，标准曲线图。具体实施方式实施例11.准备主要仪器、试剂（1）仪器：粉碎机；烘箱；0.125mm样品筛；水浴锅；可见分光光度计；150ml三角瓶；100ml容量瓶；75mm玻璃漏斗；10ml具塞试管；12.5cm中速定性滤纸；（2）试剂：0.5%α-淀粉酶；乙醚；85%乙醇；蒸馏水；2.0g·L-1硫酸蒽酮（0.5g蒽酮溶于250ml浓硫酸）；I-KI溶液（3.6gKI、1.3gI溶于20ml蒸馏水中）。2.标准曲线制作（1）配置250mg·L-1淀粉标准溶液：准确称取250mg淀粉置于150ml三角瓶中，再加入50ml蒸馏水。将三角瓶置于水浴锅中沸水浴15min，取出冷却。在冷却后的三角瓶中加入10ml浓度为0.5%的α-淀粉酶溶液，60℃水浴锅中保温1小时。然后用I-KI溶液检测三角瓶中溶液，如果不显蓝色即为淀粉已经彻底分解为糖；如检测仍为蓝色，则继续保温，直至溶液检测不到蓝色为止。将检测好的溶液过滤到1000ml的容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀备用。（2）取6支洁净的具塞大试管，编号后按下表数据配制系列不同浓度的溶液：管号123456250mg·L-1淀粉标准液（ml）0.00.20.40.60.81.0蒸馏水（ml）10.80.60.40.00.0硫酸蒽酮（ml）020406080100以上各管加完后盖塞摇匀，沸水浴中准确加热6min，取出后用自来水迅速冷却。在620nm波长下比色，测定吸光值（A）。以淀粉含量（μg)（试管中淀粉标准液的淀粉含量）作为横坐标，以吸光值A作为纵坐标，做出标准曲线（如图1所示）。3.样品测定（1）板栗鲜果肉切碎，80℃烘干至恒重；烘干后的样品用粉碎机粉碎，过孔径0.125mm样品筛；（2）称取100mg粉碎后的样品置于直径为12.5cm的中速定性滤纸上，将滤纸置于150ml三角瓶上；先用50ml乙醚分多次冲洗样品，再用50ml浓度为85%的酒精分多次冲洗样品；（3）用50ml蒸馏水将滤纸上的残留物转移到150ml三角瓶中；（4）把三角瓶放到沸水中加热15min，取出冷却至室温；（5）冷却后在三角瓶中加入10ml质量浓度为0.5%的α-淀粉酶溶液，60℃的水浴锅中保温1小时；（6）用I-KI溶液检测三角瓶中溶液，如果不显蓝色即为淀粉已经彻底分解为糖；如检测仍为蓝色，则继续在60℃水浴锅中保温，直至溶液检测不到蓝色为止；得酶解液；（7）将酶解液过滤，滤液置于100ml的容量瓶中，用蒸馏水定容100ml，摇匀，备用；（8）用移液枪依次吸取容量瓶中溶液0.4ml、蒸馏水0.6ml、硫酸蒽铜溶液5ml置于10ml具塞试管中，摇匀；沸水浴6分钟，迅速冷却；（12）以淀粉标准曲线的1号管为空白溶液，用分光光度计测定波长620nm下样品溶液的吸光值本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定板栗淀粉含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：一、检测待测样品（1‑1）板栗鲜果肉切碎后于80℃烘干至恒重，然后粉碎至过0.125mm孔径筛，得样品；（1‑2）称取100mg样品置于中速定性滤纸上，先用乙醚冲洗，再用体积浓度为85%的酒精冲洗；（1‑3）将滤纸上的残留物于沸水浴加热15min，取出冷却；冷却至室温；（1‑4）向冷却后的残留物中加入10ml质量浓度为0.5%的α‑淀粉酶溶液，于60℃下酶解至残留物中的淀粉完全酶解，得酶解液；（1‑5）将酶解液过滤，滤液用蒸馏水定至100ml，得待测液；（1‑6）取0.4ml待测液与0.6ml蒸馏水和5ml硫酸蒽铜溶液混合，于沸水浴加热6min后迅速冷却；然后以蒸馏水作为对照，在620 nm 波长下测定吸光值A；所述硫酸蒽铜溶液的浓度为2.0g·L‑1；二、制作标准曲线（2‑1）将100mg·L‑1的淀粉溶液于沸水浴加热15min，取出冷却，然后加入10ml质量浓度为0.5%的α‑淀粉酶溶液，于60℃酶解至淀粉溶液中的淀粉完全酶解，得酶解液；（2‑2）将酶解液用蒸馏水稀释，得不同浓度的标准液；（2‑3）将标准液于沸水浴中加热6min后迅速冷却，然后以蒸馏水作为对照，在620 nm 波长下测定吸光值；以标准液的淀粉含量B/μg作为横坐标，吸光值A0作为纵坐标，绘制标准曲线；三、将步骤一的测得的A与步骤二的准曲线比对，得出淀粉含量B，然后根据公式I计算出样品中淀粉含量；公式I：式中：W为样品质量，mg。...

【技术特征摘要】
1.一种测定板栗淀粉含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：一、检测待测样品（1-1）板栗鲜果肉切碎后于80℃烘干至恒重，然后粉碎至过0.125mm孔径筛，得样品；（1-2）称取100mg样品置于中速定性滤纸上，先用乙醚冲洗，再用体积浓度为85%的酒精冲洗；（1-3）将滤纸上的残留物于沸水浴加热15min，取出冷却；冷却至室温；（1-4）向冷却后的残留物中加入10ml质量浓度为0.5%的α-淀粉酶溶液，于60℃下酶解至残留物中的淀粉完全酶解，得酶解液；（1-5）将酶解液过滤，滤液用蒸馏水定至100ml，得待测液；（1-6）取0.4ml待测液与0.6ml蒸馏水和5ml硫酸蒽铜溶液混合，于沸水浴加热6min后迅速冷却；然后以蒸馏水作为对照，在620nm波长下测定吸光值A；所述硫酸蒽铜溶液的浓度为2.0g·L-1；二、制作标准曲线（2-1）将100mg·L-1的淀粉溶液于沸水浴加热15...

【专利技术属性】
技术研发人员：田寿乐，沈广宁，孙晓莉，
申请(专利权)人：山东省果树研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37