蚕用益生枯草芽孢杆菌Swl‑19及其应用制造技术

本发明专利技术公开了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Swl‑19及其应用，枯草芽孢杆菌Swl‑19由家蚕中肠中分离，芽孢大小为0.8～1.2×1.2～2.4μm，椭圆形柱状，菌落表面干燥粗糙不透明、乳白色，边缘成整齐，能够产生胞外消化酶，如α‑淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等，还能提高家蚕丝叶转化率和健康性，因此可以作为蚕用益生菌，对蚕业生产具有重要作用。

【技术实现步骤摘要】
蚕用益生枯草芽孢杆菌Swl-19及其应用
本专利技术属于生物领域，具体涉及蚕用益生枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)Swl-19及其应用。
技术介绍
益生菌(Probiotics)是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于宿主肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称，常见的益生菌芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌、霉菌、光合细菌等。目前，益生菌已被广泛应用于食品、医药保健和饲料等各领域。通过美国食品与药物安全管理局(FDA)和美国饲料管理会(AAFCO)认可的可以饲喂的微生物有43种，其中芽孢杆菌有5种，分别是短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)、缓慢芽孢杆菌(Bacilluslentus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)和地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)。我国农业部2006年公布的允许使用的饲料微生物添加剂有16种，其中添加的芽孢杆菌有2种，分别是枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。随着国内外研究的深入，更多的芽孢杆菌的益生作用被证实，国内外报道用于畜禽生产中的芽孢杆菌除上述几种外，还有巨大芽孢杆菌Bacillusmegaterium、环状芽孢杆菌Bacilluscirculans、东洋芽孢杆菌Bacillustoyoi、坚强芽孢杆菌Bacillusfirmus、蜡样芽胞杆菌Bacilluscereus、纳豆芽孢杆菌Bacillusnatto。家蚕是一种特种经济动物，饲养具有一定的特殊性，其常见的益生菌并不适用于家蚕，因此筛选出来针对家蚕饲养的芽胞杆菌具有潜在的益生功能，以促进蚕业生产。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的之一在于提供对蚕业生产有促进作用而且具有益生菌，该菌株可以作为产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶的菌株，为蚕业生产相关的酶制剂带来帮助；本专利技术的目的之二在于提供枯草芽孢杆菌Swl-19在制备蚕用益生菌中的应用；本专利技术的目的之三在于提供枯草芽孢杆菌Swl-19在提高家蚕丝叶转化率中的应用。为实现上述专利技术目的，经研究，本专利技术提供如下技术方案：1、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)Swl-19，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCCNo.10333。枯草芽孢杆菌为Swl-19单个细胞1.0～1.4×3.4～4.4μm，颜色均匀、无荚膜、周生鞭毛、能运动并且需氧；芽孢大小为0.7～0.9×1.2～2.4μm，椭圆形柱状；菌落表面干燥粗糙不透明、乳白色，边缘成整齐；可利用蛋白质、多种糖及淀粉，能分解色氨酸形成吲哚。枯草芽孢杆菌广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖因此而得名；有的枯草芽孢杆菌是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌；有的枯草芽孢杆菌具有强烈降解核苷酸的酶系，故常作为核苷生产菌的亲株或制取5’-核苷酸酶的菌种。并且枯草芽孢杆菌具有如下作用：1)枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；2)枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值，间接抑制其它致病菌生长；3)刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力；4)枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用。5.能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。枯草芽孢杆菌不仅在饲料中应用比较广泛，在污水处理及生物肥发酵或发酵床制作中应用也相当广泛，是一种多功能的微生物。应用范围：1.市政和工业污水处理，工业循环水处理，腐化槽、化粪池等处理，畜牧养殖动物废料、臭味处理，粪便处理系统，垃圾、粪坑、粪池等处理。2.畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖，水产养殖。3.可以与多种菌种混配，在农业生产中具有重要作用。2、所述枯草芽孢杆菌Swl-19在作为家蚕益生菌中的应用。优选的，所述益生菌为产胞外消化酶的益生菌。优选的，所述胞外消化酶为蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶或/和纤维素酶。3、所述枯草芽孢杆菌Swl-19在提高家蚕丝叶转化率中的应用。优选的，所述丝叶转化率为上蔟率、结茧率、全茧量或茧层率。本专利技术的有益效果在于：本专利技术公开了枯草芽孢杆菌Swl-19，该菌株是家蚕肠道内的优势菌群，可以产生α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶等消化酶类，对家蚕的健康性和桑丝转化率起到促进作用；将其应用到蚕业饲养中能提高家蚕成活率，促进上蔟后家蚕的吐丝量，对蚕业生产有极大的帮助作用。附图说明为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图：图1为枯草芽孢杆菌Swl-19的扫描电镜结果。图2为枯草芽孢杆菌Swl-1916SrDNA序列PCR电泳图(M：NMW012；Swl-19：16SrDNA序列PCR扩增结果)。图3为基于16SrDNA序列的N-J法系统发育分析(Bacilluscirculans：环状芽胞杆菌；Bacillusfirmus：强固芽胞杆菌；Bacillusazotoformans：产氮芽胞杆菌；Bacilluslentus：迟缓芽胞杆菌；Bacillusfastidiosus：苛求芽胞杆菌；Bacillusmegaterium：巨大芽胞杆菌；Virgibacilluspantothenticus：泛酸枝芽胞杆菌；Bacillusglobisporus：硅酸盐矿物分解细菌；Bacilluspasteurii：巴氏芽孢杆菌；Bacillusalcalophilus：嗜碱芽胞杆菌；Bacilluspumilus：短小芽孢杆菌；Bacilluslicheniformis：地衣芽孢杆菌；Paenibacilluspopilliae：乳白色致病细菌；Paenibacilluslentimorbus：泛酸枝芽胞杆菌；Bacillusamyloliquefaciens：解淀粉芽孢杆菌；Bacillustequilensis：特基拉芽孢杆菌；Bacillussubtilisstrain：枯草芽孢杆菌菌株；Bacilluscoagulans：凝结芽孢杆菌；Geobacillusstearothermophilus：嗜热脂肪地芽孢杆菌；Bacillusmycoides：蕈状芽孢杆菌；Bacillusanthracis：炭疽杆菌；Bacilluscereus：蜡样芽孢杆菌；Bacillusthuringiensis：苏云金芽胞杆菌)。图4为菌株Swl-19的溶血性试验结果。图5为菌株Swl-19在筛选培养基上形成的水解圈(A：产蛋白酶菌株在筛选培养基上形成的水解圈；B：产脂肪酶菌株在筛选培养基上形成的水解圈；C：产纤维素酶菌株在筛选培养基上形成的水解圈；D产淀粉酶菌株在筛选培养基上形成的水解圈)。图6为菌株Swl-19产胞外消化酶能力。图7为添食菌株Swl-19后家蚕肠道菌群的DGGE图谱。菌种保藏本专利技术中枯草芽孢杆本文档来自技高网...

【技术保护点】
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Swl‑19，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.10333。

【技术特征摘要】
1.枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）Swl-19，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCCNo.10333。2.权利要求1所述枯草芽孢杆菌Swl-19在制备家蚕益生菌制剂中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述益生菌为...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱勇，李冠楠，夏雪娟，隆耀航，赵欢欢，唐文超，郭东东，何石宝，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆;85