一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系及方法技术

一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系及方法，该鲁米诺化学发光体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水，该鲁米诺化学发光体系的总体积为2mL。该鲁米诺化学发光体系的化学发光在一定质量范围内与化学发光强度呈良好的线性关系，可用于过氧碳酸钠的检测，其检测限为3mg-5mg，线性关系良好，R2为0.9986，满足检测要求；检测鱼浮灵效价的方法快速简便、灵敏度较高、易操作，检测结果准确、明了，试剂用量少；可掌握鱼浮灵用量，缓解养殖过程中鱼类浮头泛塘等缺氧现象的发生，又可避免由于鱼浮灵的用量过多，导致对人体造成不必要的损害。

【技术实现步骤摘要】
一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系及方法
本专利技术涉及检测鱼浮灵效价领域，具体为一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系及方法。
技术介绍
鱼浮灵是由中国科学院水生生物研究所和武汉农药厂联合开发的一种高效化学增氧剂，其主要成分是过碳酸钠，通常情况下为颗粒状的固体。遇水后能够快速分解，使水中的溶解氧含量增加。鱼浮灵在鱼类养殖过程中应用较为广泛，当发现鱼类浮头泛塘等缺氧现象时，将鱼浮灵加入水中后可以使将要死亡的鱼类重新活跃起来，缓解了因水中缺氧而引起水中鱼类死亡的现象，鱼浮灵在此起的主要作用就是直接增加水中溶解氧含量。化学发光法是分子发光光谱法的一类，指物质在化学反应时，吸收了化学能，使产物分子激发跃迁至激发态，受激分子由激发态回到基态时，发出一定波长的光。根据其化学发光强度或总量来确定组分含量的分析方法叫化学发光分析法。常见的化学发光反应体系有：鲁米诺化学发光反应体系、光泽精化学发光反应体系等。本专利技术中使用的是鲁米诺化学发光体系。鲁米诺体系在碱性溶液中可被氧化剂氧化处于激发态，激发态发射蓝光回到基态时产生化学发光。鲁米诺可与各种氧化剂如过氧化氢、氧气、次氯酸盐、碘、高锰酸钾等反应产生化学发光。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系及方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系，该鲁米诺化学发光体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水，该鲁米诺化学发光体系的总体积为2mL。作为本专利技术进一步的方案，所述碱性缓冲液是由硼砂及氢氧化钠配置而成的pH值为10.1的碱性缓冲液。作为本专利技术进一步的方案，所述硫酸钴溶液为0.1mol/L的硫酸钴溶液。作为本专利技术进一步的方案，所述鲁米诺工作液为用pH值为12.5的氢氧化钠溶液配置成0.02mol/L的鲁米诺工作液。一种检测鱼浮灵效价的方法，包括如下步骤：(1)调整发光测量仪参数保证其最佳信噪比；发光测量仪参数为：高压1000V，标准光源14C，每秒发光强度1500，背景值6cps，测量温度25℃；(2)在反应杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁米诺工作液0.2ml，水0.2ml，制备鲁米诺化学发光体系，且总体积为2ml，然后加入待检测的鱼浮灵4mg，迅速混匀后放入样品室中，放下盖子，使反应溶液处于完全黑暗状态下开始计数，每0.5s计数一次，计数时间为100s，通过发光测量仪记录发光强度。(3)根据100s内平均发光值，经线性回归方程计算出样品中过氧碳酸钠的质量。所述线性回归方程式为：y＝91972x-170962，相关系数R2为0.9986。所述发光测量仪为BPCL型微弱发光测量仪。与现有技术相比，本专利技术的优点：该鲁米诺化学发光体系的化学发光在一定质量范围内与化学发光强度呈良好的线性关系，可用于过氧碳酸钠的检测，其检测限为3mg-5mg，线性关系良好，R2为0.9986，满足检测要求；检测鱼浮灵效价的方法快速简便、灵敏度较高、易操作，检测结果准确、明了，试剂用量少；可以检测鱼浮灵投入水中后的产生氧的能力；根据鲁米诺化学发光体系发光强度检测市售鱼浮灵中过氧碳酸钠的含量，鉴定各品牌鱼浮灵的优劣，并为鱼贩提供较优的鱼浮灵用量，既可缓解养殖过程中鱼类浮头泛塘等缺氧现象的发生，又可避免由于鱼浮灵的用量过多，导致对人体造成不必要的损害。附图说明图1为分别只加入H2O2和Na2CO3的两个对照组实验图；图2是过氧碳酸钠固体颗粒质量递增对体系发光强度的影响示意图；以前10s内和100s内总发光强度平均值表示；图3为标准工作曲线图；图4为对过氧碳酸钠固体颗粒为30mg的实验组进行延长测量时间，测量时间延长至1000s得到的光谱图。具体实施方式下面结合附图及实施例对本专利技术作进一步阐述。一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系，该鲁米诺化学发光体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水，该鲁米诺化学发光体系的总体积为2mL。所述碱性缓冲液是由硼砂及氢氧化钠配置而成的pH值为10.1的碱性缓冲液。所述硫酸钴溶液为0.1mol/L的硫酸钴溶液。所述鲁米诺工作液为用pH值为12.5的氢氧化钠溶液配置成0.02mol/L的鲁米诺工作液。一种检测鱼浮灵效价的方法，包括如下步骤：(1)调整发光测量仪参数保证其最佳信噪比；所述发光测量仪为BPCL型微弱发光测量仪。发光测量仪参数为：高压1000V，标准光源14C，每秒发光强度1500，背景值6cps，测量温度25℃；(2)在反应杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁米诺工作液0.2ml，水0.2ml，制备鲁米诺化学发光体系，且总体积为2ml，然后加入待检测的鱼浮灵4mg，迅速混匀后放入样品室中，放下盖子，使反应溶液处于完全黑暗状态下开始计数，每0.5s计数一次，计数时间为100s，通过发光测量仪记录发光强度。(3)根据100s内平均发光值，经回归方程式计算出样品中过氧碳酸钠的质量。所述线性回归方程式为：y＝91972x-170962，相关系数R2为0.9986。下面以实验说明，用不同质量过氧碳酸钠固体颗粒对鲁米诺化学体系发光的影响。在样品杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁米诺工作液0.2ml，水0.2ml，再加入过氧碳酸钠固体颗粒,混匀后迅速放入样品室中进行测量，反应体系总体积为2ml，反应温度为25℃，每0.5s计数一次，计数时间为100s。通过改变过碳酸钠质量由3mg—3mg递增。表1不同质量固体过碳酸钠实验组试剂配比编号缓冲液CoSO4鲁米诺H2O过碳酸钠总体积a1.2mL0.4mL0.2mL0.2mL3.03mg2mLb1.2mL0.4mL0.2mL0.2mL3.51mg2mlc1.2mL0.4mL0.2mL0.2mL4.06mg2mLd1.2mL0.4mL0.2mL0.2mL4.50mg2mle1.2mL0.4mL0.2mL0.2mL5.02mg2mLf1.2mL0.4mL0.2mL0.2mL6.05mg2mLg1.2mL0.4mL0.2mL0.2mL8.03mg2mL如图1(a)和(b)是分别只加入H2O2和Na2CO3的两个对照组实验。由图(a)可以看出，在鲁米诺体系中只有双氧水时，鲁米诺体系发光强度平缓上升，在100s时上升接近30万。由图(b)中由于未加双氧水，基本没有发光，这与实际相符。图2是过氧碳酸钠固体颗粒质量递增对体系发光强度的影响，以前10s内和100s内发光强度平均值表示。由图可以看出，随着过氧碳酸钠固体颗粒质量的增加，发光强度增加，并在5mg时达到最大值30万，在质量达到8mg后开始下降。在3mg-5mg质量范围内,100s内化学发光平均值与过氧碳酸钠固体颗粒质量呈良好的线性关系。由于10s测量时间短，且前10s内发光值变化幅度大，有较大波动，故以100s内总平均发光值与过氧碳酸钠的质量绘制工作曲线如图3，其线性回归方程式为y＝91972x-170962，相关系数R2为0.9986。延长过氧碳酸钠固体颗粒为30mg的实验组的发光时间，观察其长效发光规律在样品杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁米诺工作液0.2ml，水0.2ml再本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系，其特征在于，该鲁米诺化学发光体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水，该鲁米诺化学发光体系的总体积为2mL。

【技术特征摘要】
1.一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系，其特征在于，该鲁米诺化学发光体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水，该鲁米诺化学发光体系的总体积为2mL，所述碱性缓冲液是由硼砂及氢氧化钠配置而成的pH值为10.1的碱性缓冲液，所述硫酸钴溶液为0.1mol/L的硫酸钴溶液，所述鲁米诺工作液为用pH值为12.5的氢氧化钠溶液配置成0.02mol/L的鲁米诺工作液；检测鱼浮灵效价的方法，包括如下步骤：(1)调整发光测量仪参数保证其最佳信噪比；发光测量仪参数为：高压1000V，标准光源14C，每秒发光强度1500，背景值6cps，测量温度25℃；(2)在反应杯中依次...

【专利技术属性】
技术研发人员：耿红，宋雨姮，杨振华，张月霞，卢铁彦，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西;14