一种应用原子力显微镜检测宫颈脱落细胞刚度的方法技术

技术编号:11510685 阅读:81 留言:0更新日期:2015-05-27 15:56
本发明专利技术涉及一种应用原子力显微镜检测宫颈脱落细胞刚度的方法,其包括步骤:采集宫颈上皮脱落细胞标本;制备宫颈上皮脱落细胞样品;采用现有原子力显微镜成像系统检测宫颈上皮脱落细胞样品的力-距离曲线,将所测定的力-距离曲线输出;根据测得的力-距离曲线对宫颈上皮脱落细胞刚度进行检测:采用Cft3ball计算方法,输入以下参数:压入深度、微悬臂敏感度、微悬臂弹性系数和微悬臂末端小球的半径,对力-距离曲线文件进行杨氏模量计算;杨氏模量大小与细胞的刚度呈负相关,根据计算得到的杨氏模量大小得到宫颈上皮脱落细胞的刚度变化值。本发明专利技术可以广泛在生物医学、纳米生物和生物力学领域中应用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种应用原子力显微镜检测宫颈脱落细胞刚度的方法,其包括以下步骤:1)采集宫颈上皮脱落细胞标本;2)制备宫颈上皮脱落细胞样品;3)采用现有原子力显微镜成像系统检测宫颈上皮脱落细胞样品的力‑距离曲线;(1)在原子力显微镜成像系统中采用原子力显微镜,在原子力显微镜成像系统扫描头上安装前段修饰有聚苯乙烯小球的CSG11/tipless型微悬臂,调整激光光斑位置使其位于扫描头毛玻璃正中央,并将偏转以及扭转的初始值分别设为‑2V和0V,通过预置在原子力显微镜成像系统中的Contact mode AFM Calibrated软件对微悬臂进行力‑距离曲线采集,从而计算出微悬臂的弹性系数和敏感度;(2)将培养皿固定于原子力显微镜成像系统的样品盘上,将探针安装在对微弱力极敏感的微悬臂一端,微悬臂另一端固定在原子力显微镜成像系统中的压电陶瓷管上,探针与培养皿中的样品表面轻轻接触,测得微悬臂对应于扫描点各点位置的变化,获得样品表面的形貌信息;(3)每个患者取10个以上形态正常、锚定良好的宫颈上皮脱落细胞样品,在目视下选择要采集力‑距离曲线的部位,每个细胞样品在胞浆区取两个点进行力‑距离曲线检测;(4)选择进针时间,在所选进针时间测定的力‑距离曲线代表探针在逐渐逼近样品、接触样品、局部施力下压、针尖逐渐抬起以及离开细胞的全过程中,微悬臂的振幅改变,得到力‑距离曲线,将所测定的力‑距离曲线以*.ivs格式输出;4)根据测得的力‑距离曲线对宫颈上皮脱落细胞刚度进行检测;(1)将*.ivs格式力‑距离曲线文件转换为*.txt格式力‑距离曲线文件,并采用Cft3ball计算方法,输入以下参数:压入深度、微悬臂敏感度、微悬臂弹性系数和微悬臂末端小球的半径,对*.txt格式力‑距离曲线文件进行杨氏模量计算;(2)杨氏模量大小与细胞的刚度呈负相关,根据步骤(1)中计算得到的杨氏模量大小得到宫颈上皮脱落细胞的刚度变化值。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:耿力
申请(专利权)人:北京大学第三医院
类型:发明
国别省市:北京;11

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