【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种重组鸡大肠杆菌外膜蛋白包涵体的纯化及高效复性液对其复性的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)包涵体蛋白的提取:4℃,4000~6000rpm,10~20min,离心收集菌体,PBS洗涤菌体,4℃,6000~8000rpm,10~20min,将菌体超声破碎,功率400瓦,超声5秒,间歇25秒,工作时间20~35分钟,所述菌体为重组鸡大肠杆菌;然后4℃,8000~10000rpm,10~20min高速冷冻离心得到鸡大肠杆菌外膜蛋白包涵体蛋白质;(2)包涵体蛋白质的纯化:首先按质量体积比1:10~1:30将包涵体重悬于第一洗涤液中,所述洗涤液为:NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 10mmol/L,KH2PO4 2mmol/L,0.2%~1.4%的tritonX‑100,pH 8.0~8.5;4℃,8000~10000rpm,10~20min高速冷冻离心;然后按质量体积比1:10~1:30将包涵体重悬于第二洗涤液种,所述第二洗涤液为:1~3mol/L尿素;4℃,8000~10000rpm,10~20min高速冷冻离心;接着按质量体积比1:20~1:5 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:王连民,刘珂飞,孙珊珊,
申请(专利权)人:天津生机集团股份有限公司,
类型:发明
国别省市:天津;12
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