红林蚁AChE基因、红林蚁AChE及其制备方法技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，具体涉及一种红林蚁乙酰胆碱酯酶（AChE）基因、所编码的红林蚁乙酰胆碱酯酶（AChE）、制备该酶的方法。红林蚁AChE基因及所编码的红林蚁AChE，其碱基序列及氨基酸序列如序列表所示。该酶的制备方法包括以下步骤：（1）构建并PCR扩增红林蚁AChE基因全序列；（2）构建红林蚁AChE全序列构建真核重组表达载体；（3）转化毕赤酵母宿主细胞，培养，诱导表达；（4）纯化。本发明专利技术通过实验证明，所制备的红林蚁AChE相较于现有的果蝇AChE具有更高的活性和灵敏度，因而在未来的农药检测试剂制备技术领域具有较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
红林蚁AChE基因、红林蚁AChE及其制备方法
本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种红林蚁乙酰胆碱酯酶（AChE）基因、所编码的红林蚁乙酰胆碱酯酶（AChE）、制备该酶的方法。
技术介绍
现在全球环境污染尤其是农药污染日益严重，能快速、简便地检测农药残留尤显迫切。多数农药是有机磷及氨基甲酸酯类，已被大量运用于各类农作物的生产。但此类农药已经给环境造成严重污染、毒害人畜，为此开发灵敏快速的农药残留监测具有重要实意义。目前运用较广的检测农药残留方法是利用乙酰胆碱酯酶（achetylcholinesterase，AChE）与有机磷和氨基甲酸类农药的抑制反应，通过分光光度检测的方法来定量农药残留量的多少。此方法具有成本低、检测快、相对较灵敏的优点，适宜于较大范围的农残检测需求。因此，农残检测试剂盒的核心试剂原料——乙酰胆碱酯酶的制备即成为技术的关键。运用基因工程手段以毕赤酵母真核表达体系来制备AChE是主流发展趋势。现有技术中，虽有大量有关利用昆虫乙酰胆碱酯酶基因制备的真核表达体系的研究和报道，但由于对农药的灵敏度仍不太理性，因而仍待改进。而到目前为止，尚未见到有关利用红林蚁的乙酰胆本文档来自技高网...

【技术保护点】
红林蚁乙酰胆碱酯酶基因，其特征在于，碱基序列如序列表序列1所示。

【技术特征摘要】
1.红林蚁乙酰胆碱酯酶基因，其特征在于，碱基序列如序列表序列1所示。2.权利要求1所述红林蚁乙酰胆碱酯酶基因所编码的红林蚁乙酰胆碱酯酶，其特征在于，氨基酸序列如序列表序列2所示。3.权利要求2所述红林蚁乙酰胆碱酯酶的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）构建并PCR扩增红林蚁乙酰胆碱酯酶基因全序列；（2）利用步骤（1）所构建的红林蚁乙酰胆碱酯酶基因全序列构建真核重组质粒表达载体；（3）将步骤（2）所构建的真核重组质粒表达载体转化进入毕赤酵母...

【专利技术属性】
技术研发人员：翁海波，张佳丽，李倩，张欢，安秀丽，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南;41