【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种银杏叶片叶绿体蛋白质的提取方法,其特征在于包括以下步骤:(1)银杏叶片经24小时以上暗处理,耗尽淀粉粒;(2)将叶片冰浴下用研钵碾碎,加入提取缓冲液研磨成浆后4层纱布过滤,取滤液,所述提取缓冲液成分为:0.3M山梨醇,1mM MgCl2,50mM HEPES/KOH(pH 7.8),2mM EDTA,0.04%巯基乙醇,0.1%PVP;(3)滤液于4℃,1500g离心10min进行沉积得叶绿体沉淀颗粒,并用分离缓冲液悬浮,所述分离缓冲液成分为:0.3M山梨醇,1mM MgCl2,50mM HEPES/KOH(pH 7.8),2mM EDTA;(4)Percoll密度梯度液制备:用分离缓冲液分别配制40%和80%Percoll,由上至下分别加入5ml的40%Percol和2.5ml的80%Percoll,形成Percoll密度梯度液;(5)将悬浮的叶绿体颗粒1ml加入到制好的Percoll密度梯度液的顶端,经4℃,6000g离心30min后,在80%和40%Percoll细胞分离液之间的分界面上收集完整叶绿体,并用分离缓冲液清洗两次,分离得到完整的叶绿体颗粒;(6)将蛋白质提取缓冲液 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:何梅,施大伟,谢寅峰,魏晓东,
申请(专利权)人:南京林业大学,江西省林业科学院,江苏省农业科学院,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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