一种H9N2亚型禽流感病毒的大规模培养方法技术

本发明专利技术公开了一种H9N2亚型禽流感病毒的大规模培养方法，本方法中H9N2病毒在MDCK适应快速，适应后病毒HA效价为28；以7.5L反应器为种细胞罐，cytodex1为载体培养MDCK细胞为种子细胞，放大到40L固定床篮式搅拌系统反应器的大规模培养，收获血凝效价（HA）可以达到210H9N2病毒80L。本方法生产的病毒效价高、产量大，方法易于标准化，适用于所有的H9亚型流感病毒，解决了目前H9N2禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种H9N2亚型禽流感病毒的大规模培养方法，其步骤是:禽流感病毒H9N2快速适应MDCK细胞：H9N2在MDCK细胞上的快速适应：F60‑F105代MDCK细胞6孔板中长满单层，病毒36.5‑37.5℃吸附1‑2小时，去除病毒液，以含TPCK‑胰酶1.0‑1.5ug/ml的高糖DMEM为病毒稀释液清洗MDCK细胞2‑4次后，更换含TPCK‑胰酶0.3‑1.8ug/ml高糖DMEM细胞维持液，取血凝效价>24且病毒稀释倍数最高的病毒液或者致细胞最晚产生病变的最高稀释倍数病毒作为种子病毒继续适应；病毒在6代以内适应MDCK细胞，且病毒血凝效价为28；以F6‑F11代次病毒为40L反应器种子病...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金梅林，李国红，周明光，徐高原，洪灯，左静，徐晓娟，喻文波，王丹，张盼，陈绣镯，陈焕春，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42