一种固定化脂质酰基转移酶制备植物甾醇酯的方法技术

本发明专利技术提供一种固定化脂质酰基转移酶制备植物甾醇酯的方法。研究了大豆油添加量、植物甾醇添加量、固定化磷脂酶添加量、反应时间、磁力搅拌器的搅拌速度、磁力搅拌器反应温度等不同反应条件下对甾醇酯化为甾醇酯的酯化率的影响，并采用响应面的分析方法对所研究的因素进行优化。通过气相色谱仪测出甾醇和甾醇酯的峰面积，计算出油脂的酯化率，进一步证明了通过海藻酸钙-壳聚糖固定化磷脂酶A2的催化制备植物甾醇酯的转化率更高，简化了工艺过程，减少了工艺制备时间，对工业上生产植物甾醇酯具有重要的指导意义。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种固定化脂质酰基转移酶制备植物甾醇酯（Photysterol ester）的方法，其特征在于用海藻酸钙‑壳聚糖固定的脂质酰基转移酶制备植物甾醇酯通过以下步骤实现：一、脂质酰基转移酶的固定化；二、固定化酶酶活力的测定；三、用海藻酸钙‑壳聚糖固定化酶制备植物甾醇酯及制备条件的优化：首先，向洁净干燥的锥形瓶内连续通入一定时间的氮气，将锥形瓶内的空气置换出来，再准确称取5~10 g的大豆油放到锥形瓶内，同时称取1~5 g的植物甾醇放到锥形瓶内，再向大豆油和植物甾醇混合物中加入0.1~3.0 g的海藻酸钙­‑壳聚糖固定化磷脂酶A2，充分搅拌混匀；将锥形瓶置于磁力搅拌器中，调整搅拌速度100~1000 r/min,反应温度为40~90 ℃，开始计时，控制反应时间1~10 h，反应停止后，及时关闭纯氮气钢瓶和进气阀，停止搅拌，关闭冷凝水和停止加热，自然冷却到75 ℃左右，开启装置；四、采用响应面法进行分析讨论最终确定的最佳固定化条件；五、固定化脂质酰基转移酶重复利用性的研究；六、酯化率的检测，经过气相色谱的检测，得出甾醇及甾醇酯的峰面积，酯化率={甾醇酯峰面积/（甾醇峰面积 + 甾醇酯峰面积）}×100%。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：于殿宇，刘天一，李相昕，江连洲，王立琦，关忠，孙立斌，刘丹怡，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23