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一种检测硫化氢的增强型荧光探针的制备方法及应用技术

技术编号:11253294 阅读:157 留言:0更新日期:2015-04-02 02:16
本发明专利技术提供一种检测硫化氢的增强型荧光探针,所述荧光探针为NRS荧光探针,所述NRS荧光探针的结构通式如(I)所示,制备方法将尼罗红,2,4-二硝基氟苯和碳酸钾,加入到二甲基甲酰胺中,加热至70℃-80℃,回流反应3小时后,将反应液用二氯甲烷萃取收集有机相,将该有机相用无水硫酸镁干燥,经硅胶柱层析提纯得到目标产物。该探针具有线粒体定位功能,可以对线粒体进行实时、原位的在线检测,将有助于我们进一步了解硫化氢的生理功能,有助于增进对H2S生理作用的了解,为新型心血管药物的研发提供可视化的检测工具。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供一种检测硫化氢的增强型荧光探针,所述荧光探针为NRS荧光探针,所述NRS荧光探针的结构通式如(I)所示,制备方法将尼罗红,2,4-二硝基氟苯和碳酸钾,加入到二甲基甲酰胺中,加热至70℃-80℃,回流反应3小时后,将反应液用二氯甲烷萃取收集有机相,将该有机相用无水硫酸镁干燥,经硅胶柱层析提纯得到目标产物。该探针具有线粒体定位功能,可以对线粒体进行实时、原位的在线检测,将有助于我们进一步了解硫化氢的生理功能,有助于增进对H2S生理作用的了解,为新型心血管药物的研发提供可视化的检测工具。【专利说明】一种检测硫化氢的増强型荧光探针的制备方法及应用
本专利技术涉及对硫化氢进行检测的荧光探针,具体涉及一种检测硫化氢的增强型荧 光探针及制备方法及在线粒体中应用。
技术介绍
硫化氢(H2S)是一种有刺激性气味的气体,是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之 后的第3种具有信息传递功能的气体小分子。环境中的硫化氢主要来自于工业生产、水处 理、牲畜饲养过程中硫化氢的释放。硫化氢在很多生物的生理过程中都有重要作用,例如神 经传递的调节、胰岛素信号的抑制作用等。硫化氢水平异常可还可能与阿尔兹海默氏症、唐 氏综合症、糖尿病和肝硬化等疾病密切相关。硫化氢的生理学和病理学功能研宄已经成为 目前化学与生物学研宄的热点,而能在活体生物系统中准确快捷的检测硫化氢的方法成为 该领域的关键课题之一。 上世纪90年代发现内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)在体内发挥着重 要生理作用,比如胱硫醚-B-合成酶(cystathionine-B_synthase,CBS)、胱硫醚裂解酶 (cystathionine-lyase, CSE)和半胱氨酸转移酶的生理代谢过程中均会产生硫化氢,其产 生的场所是在线粒体中。来源于线粒体中的硫化氢对于心脑血管系统、免疫系统以及神经 系统具有非常重要的调节作用。目前对硫化氢进行检测的荧光探针种类很多,但是绝大多 数都不具有线粒体定位功能,更无法实现对线粒体中所产生的硫化氢进行检测。
技术实现思路
针对现有技术的不足,本专利技术提供一种检测硫化氢的增强型荧光探针,该探针具 有线粒体定位功能,可以对线粒体进行实时、原位的在线检测,将有助于我们进一步了解硫 化氢的生理功能,有助于增进对H 2S生理作用的了解,为新型心血管药物的研发提供可视化 的检测工具。 本专利技术采用的技术方案为: 一种检测硫化氢的增强型荧光探针,所述荧光探针为NRS荧光探针,所述NRS荧光 探针的结构通式如(I)所示: 【权利要求】1. 一种检测硫化氢的增强型荧光探针,其特征在于,所述荧光探针为NRS荧光探针,所 述NRS荧光探针的结构通式如(I)所示:2. -种如权利要求1所述的检测硫化氢的增强型荧光探针的制备方法,其特征在 于包括如下步骤:将尼罗红,2, 4-二硝基氟苯和碳酸钾,加入到二甲基甲酰胺中,加热至 70°C-80°C,回流反应3小时后,将反应液用二氯甲烷萃取收集有机相,将该有机相用无水 硫酸镁干燥,经硅胶柱层析提纯得到目标产物。3. 根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述尼罗红,2, 4-二硝基氟苯和碳酸 钾的摩尔比为1:1. 2:1. 2。4. 根据权利要求2或3所述的制备方法,其特征在于,所述硅胶柱层析中的洗脱剂为 CH2C12:CH30H= 40:1 ;Si02300-400 目。5. 如权利要求1所述的检测硫化氢的增强型荧光探针在检测水体中硫离子或硫化氢 的应用。6. 根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述荧光探针在检测活细胞线粒体中硫 化氢的应用。7. 根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述活细胞为Hela细胞株、MCF-7细胞株 或RAW264. 7细胞株。【文档编号】C09K11/06GK104479669SQ201410657865【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年11月18日 优先权日:2014年11月18日 【专利技术者】于海波, 李红玲, 方沛菊, 吕春娇, 宋有涛 申请人:辽宁大学本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种检测硫化氢的增强型荧光探针,其特征在于,所述荧光探针为NRS荧光探针,所述NRS荧光探针的结构通式如(I)所示:

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:于海波李红玲方沛菊吕春娇宋有涛
申请(专利权)人:辽宁大学
类型:发明
国别省市:辽宁;21

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