门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法技术

本发明专利技术为门冬氨酸钾原料、门冬氨酸镁原料及其相关制剂如口服制剂、注射剂等的安全性分析方法，可更简便地控制药品质量，尤其针对如门冬氨酸钾注射液、门冬氨酸钾镁注射液、注射用门冬氨酸钾镁等较口服制剂风险较高的注射剂，可更好控制药品非预期的严重不良反应风险。

【技术实现步骤摘要】
门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法
门冬氨酸钾是门冬氨酸的钾盐，门冬氨酸镁是门冬氨酸的镁盐，为电解质补充药。门冬氨酸是体内草酰乙酸的前体，在三羧酸循环中起重要作用，促进能量代谢，是高能磷酸化合物合成分解的催化剂；参与核苷酸生成，是细胞修复和再生的重要物质；可促进胆汁及胆色素的排泄，有排黄、减少肝脂肪、增加肝糖原等作用；促进T淋巴细胞发育分化为成熟T淋巴细胞，有抗病毒和抗肿瘤的作用。同时，门冬氨酸也参加鸟氨酸循环，使NH3与CO2生成尿素达到解毒作用。门冬氨酸与细胞有很强的亲和力，可作为钾离子进入细胞的载体，使钾离子重返细胞内，促进细胞除极化和细胞代谢，维持心肌收缩力，从而改善心肌收缩功能，并降低耗氧量，因而在缺氧状态下，对心脏具有保护作用。镁是重要的阳离子，是多种酶系的成分及激活剂，与钾代谢关系密切。低镁时肾保钾作用降低可加重缺钾。补镁后能激活钠-钾-三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATP酶)，调节钾于钙离子的膜转运，促进钾内流，阻止钾进一步外流，使细胞内钾含量增加，在机体补钾时起到显著的保钾作用。门冬氨酸钾、门冬氨酸镁制剂国内外有如有门冬氨酸钾注射液、门冬氨酸钾片、门冬氨酸钾镁片、门冬氨酸钾镁注射液等上市，在临床上可应用于补钾。门冬氨酸钾、门冬氨酸镁的合成多采用门冬氨酸与钾盐或镁盐反应的原理，由于门冬氨酸钾、门冬氨酸镁易溶于水，门冬氨酸与钾盐或镁盐反应后产生的反应液粘稠，结晶性很差且吸湿性强，无法用传统工艺制得合格原料，门冬氨酸钾镁复方制剂多采用门冬氨酸与钾盐(如氢氧化钾)和氧化镁投料的生产工艺，该生产工艺在实际生产中易产生质量问题而产生安全性隐患及影响临床应用效果，如投料不准确，不同批次之间质量不均一、不稳定，引入了较大量杂质等，尤其对于注射剂，直接用门冬氨酸与钾盐(如氢氧化钾)和氧化镁投料的生产工艺将无法去除原料引入的杂质，所增加的临床应用不安全因素可能带来较严重的后果。虽然ZL200810101612.4和ZL200810101613.9分别提供了一种高质量的门冬氨酸钾和门冬氨酸镁原料的制备方法，但未提供其杂质的具体指标，并且，即使是高质量的门冬氨酸钾、门冬氨酸镁原料，具体制剂的工艺制备过程中也可能新增加杂质，尤其是涉及的安全性杂质。2012年09月19日国家食品药品监督管理局发布的药品不良反应信息通报(第50期)警惕门冬氨酸钾镁注射剂的严重过敏反应(http://www.sfda.gov.cn/WS01/CL0078/74984.html)，进一步反映了门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂中存在潜在过敏的因素，所述的过敏反应的药物是在药品经检验质量合格的基础上发生的，即药品本身符合相关的药品法定质量标准，排除了如无菌、热原(细菌内毒素)等的影响，而现有国内外相关的药品标准中未涉及有控制的杂质，成为最为可能的潜在因素。
技术实现思路
药品的安全、有效、质量可控为药品本身的要求，本专利技术所述的门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂有效性已得到证明，质量控制方面，也分别有国家批准的标准用以控制，质量控制方法也有局限性，尤其针对安全性的影响因素，如上述的门冬氨酸钾镁注射剂的严重过敏反应，目前尚缺少可靠的方法予以检测和控制，而动物试验(如豚鼠的过敏试验)繁琐，且周期长，存在个体差异性，不能准确定量区别产品的质量情况。鉴于上述背景，本专利技术研究建立了门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性杂质分析方法，以对其进行更好的质量控制，具体的除安全性杂质分析以外的门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的质量指标控制方法，在目前可获得国家食品药品监督管理局批准的相关门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的质量标准中有所体现。专利技术人经过研究，意外发现其富马酸、马来酸杂质及含量与过敏反应相关，并据此建立了以富马酸、马来酸为安全性杂质质控指标的控制方法，富马酸与马来酸经常作为酸根与很多药物成盐并用作静脉途径给药(如富马酸伊布利特注射液、马来酸桂哌齐特注射液等)，且富马酸是人体内组织的正常成分，本身具有良好的安全性。目前尚无直接的文献证据表明，该杂质为直接引起如上述门冬氨酸钾镁注射剂的严重过敏反应的原因，专利技术人经过研究，如豚鼠的过敏试验结果表明，较高富马酸、马来酸含量的门冬氨酸钾镁注射液，其致敏性提高，表明该杂质的不同增加程度与过敏反应有相关性，门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂在一定破坏条件下(如热)，其上述杂质含量不同程度增加，药品质量发生变化，即使不是富马酸、马来酸杂质本身直接引起可能的严重过敏反应，而或是质量变化过程中产生的其他未知杂质引起的过敏反应，但富马酸、马来酸作为间接的安全性指标，可以反应该质量变化，从而作为安全性质控指标以反应门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的质量情况，而现有技术的质控标准无法真实反应该质量变化。药物的杂质不一定都和安全性有关，多是反应药物制备工艺对药物的影响或药物的货架期稳定性，如和制备工艺引入的反应副产物、中间体，多与药物的纯度有关，或和有效性有关，如对应异构体杂质。富马酸、马来酸作为本专利技术安全性有关的杂质，可以采用现代分析方法检测其含量。在原料合成过程中，不同的反应、干燥温度，及制剂过程中，不同的制剂工艺，如固体制剂的湿法制粒，干燥，如门冬氨酸钾注射液、门冬氨酸钾镁注射液，均需要终端高温过度灭菌工艺，而注射用门冬氨酸钾镁则采用无菌生产工艺，用冷冻干燥方法制备，无需经过高温处理，即不同的灭菌工艺及处方工艺措施，药物的杂质可能不同，尤其针对终端灭菌工艺制剂，不同的灭菌设备、不同的灭菌温度、不同的灭菌时间，杂质水平明显不同，从而造成临床的安全性隐患，即使同一灭菌工艺，可能会因为操作人员、设备状态、生产地点等情况变化而产品的杂质发生变化。本专利技术是这样实现的：门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法，以富马酸、马来酸作为安全性控制指标。门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性杂质分析方法，以富马酸、马来酸作为安全性杂质指标，采用高效液相色谱法检测，以波长为190～240nm进行检测，包括：a.取门冬氨酸钾、门冬氨酸镁或其相关制剂，用水或流动相溶解，必要时滤过，配成每1ml中约含0.5～5.0mg的溶液，作为供试品溶液，另取马来酸及富马酸对照品适量，加流动相溶解并稀释制成含富马酸1～5μg/ml和马来酸0.2～5μg/ml的混合溶液，作为对照品溶液；b.取上述溶液适量，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中如有与富马酸、马来酸峰保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算，即得。高效液相色谱法中液相色谱柱选自以阳离子交换树脂为填充剂，可以为磺酸基阳离子交换树脂为填充剂，流动相为酸水溶液，如0.01～0.04mol/L硫酸水溶液，如0.02mol/L硫酸水溶液。检测波长为210nm，室温～45℃，流速：0.3～1.0ml/min。方法可以为：取门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1.0mg的溶液，作为供试品溶液，另取马来酸及富马酸对照品适量，加流动相溶解并稀释制成含马来酸1μg/ml及富马酸5μg/ml的混合溶液，作为对照品溶液，照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)试验。用磺酸基阳离子交换树脂为填充剂，以0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法，其特征在于以富马酸、马来酸作为安全性指标的分析检测。

【技术特征摘要】
1.门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法，其特征在于以富马酸、马来酸作为安全性指标的分析检测，采用高效液相色谱法检测，液相色谱柱以阳离子交换树脂为填充剂，以0.01～0.04mol/L硫酸水溶液为流动相，以波长为190～240nm进行检测。2.根据权利要求1所述的门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法，其特征在于液相色谱柱以磺酸基阳离子交换树脂为填充剂。3.根据权利要求1或2所述的门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法，包括以下步骤：a.取门冬氨酸钾、门冬氨酸镁或其相关制剂，用水或流动相溶解，必要时滤过，配成每1ml中含0.5～5.0mg的溶液，作为供试品溶液，另取马来酸及富马酸对照品适量，加流动相溶解并稀释制成含富马酸1～5μg/ml和马来酸0.2～5μg/ml的混合溶液，作为对照品溶液；b.取上述溶液适量，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中如有与富马酸、马来酸峰保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算，即得。4.根据权利要求3所述的门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法，其特征在于高效液相色谱法中液相色谱柱以磺酸基阳离子交换树脂为填充剂，以0.02mol/L硫酸水溶液为流动相，检测波长为210nm，流速：0.3～1.0ml/min。5.根据权利要求4所述的门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂的安全性分析方法，其特征在于：取门冬氨酸钾、门冬氨酸镁及其相关制剂适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1.0mg的溶液，作为供试品溶液，另取马来酸及富马酸对照品适量，加流动相溶解并稀释制成含马来酸1μg...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡军，刘烽，谢景凤，乐琴波，付国莉，张勇，
申请(专利权)人：北京京卫信康医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11