组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种组合物，由质量比为1.21～2.34∶97.76～98.79的核黄素与枯草芽孢杆菌Tpb55菌粉构成；及该组合物在防治烟草的黑胫病和赤星病方面的应用。本发明专利技术组合物与单独施用枯草芽孢杆菌Tpb55菌株相比，能显著提高对烟草黑胫病、赤星病等真菌病害的防治效果，与生产主用化学药剂的防治效果相当。两组分相容性好、并能增加防治效果的诱导植物抗病性物质，并利用其与生防微生物复配，兼做杀菌剂和诱抗剂来用于烟草赤星病、黑胫病等真菌病害的防治，并将其作为新型杀菌剂原料进行开发应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物药剂
，尤其是一种组合物，及其应用。
技术介绍
目前烟草黑胫病、赤星病等是烟草上重要的真菌病害，每年造成巨额经济损失，上述病害防治严重依赖化学药剂，由于药剂品种单一、使用年限较长，病原菌抗药性增加，防治效果明显下降，且随着人们对环境与健康的日益重视，化学农药的使用越来越受到严格限制，因此亟需寻找替代化学防治的技术。生物防治被认为非常有希望替代化学药剂的防治技术，成为人们研究的热点。然而，大量实践表明，单纯依赖生防微生物，往往存在效果慢、防效差、受环境影响大等不利因素，难以替代化学农药，在生产上难以推广。种植抗病品种、加强栽培管理以及化学防治是我国目前防治烟草赤星病的主要措施。但是，优良的抗性品种难以获得，且容易丧失，而且生产上的主栽品种均抗性较差。利用地膜覆盖，合理轮作，适时早移栽以及适宜的种植密度等措施，在一定程度上可以减轻病害的发生程度，但在病害选择压力大时往往效果并不明显，只能发挥辅助作用。因此，化学药剂的使用仍是主要手段，其中，菌核净是使用最广泛的药剂。黑胫病的防治同样以化学防治为主，常用药剂主要有甲霜灵系列、乙磷铝及乙磷铝锰锌、敌克松、恶霜灵锰锌、代森锌、福美双、代森锰锌等。这些化学药剂多为苯基酰胺类及乙磷铝等同一种或作用机制相同的几种内吸性杀菌剂，很容易产生耐药性，从而引起药效下降。烟草黑胫病和赤星病的防治严重依赖化学防治，存在诸多弊端。一是，造成环境污染和农药残留。二是产生抗药性，防治效果下降，防治成本增加。袁宗胜等检测了山东、湖南等9个主要烟区的烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性，发现所测菌株菌丝生长对甲霜灵都存在不同程度的敏感性，EC50值相差15倍左右，通过甲霜灵对烟草黑胫病菌继代培养物的测定，也证明了烟草黑胫病菌对甲霜灵的耐药性。三是药剂的使用受环境影响大，防治效果不理想。如高温多雨天气利于烟草赤星病的爆发，化学药剂难以使用。另外，新的化学农药研发不仅成本高，而且难度大，且有时使用效果不理想，而生物防治不仅环境友好，而且有时效果较为理想，成为近年来研究热点，针对烟草赤星病和黑胫病等真菌病害生物防治，国内研究者作了大量研究，特别是在拮抗菌的筛选上作了大量努力，获得了大量优良生防微生物。经过长期努力，我国烟草真菌病害生物防治取得了较大进展，但是还存在诸多问题，突出表现在：(1)研究多限于低水平的重复，突破少。目前大量研究仅限于低水平重复性的室内研究上，特别是菌株的筛选上。虽然高效菌株的获得是非常重要的，但仅仅停留在这个水平上，造成了大量的资源浪费；(2)多不具备产业化基础，技术走不出实验室，离生产应用距离尚远，生产上缺乏能推广应用的生防产品；(3)普遍单一依赖生防微生物，防治效果有限，且易受环境影响，防治效果不稳定，与化学药剂防治效果相比相差太远，无法替代化学农药施用。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提出一种组合物，能诱导烟草抗病性，对烟草黑胫病、赤星病等真菌病害防治效果能达到生产主用化学药剂的防治效果，具有较大应用价值，可以用于烟草真菌病害的绿色防控。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：一种组合物，由质量比为1.21～2.34∶97.76～98.79的核黄素与枯草芽孢杆菌Tpb55菌粉构成。优选的，核黄素与枯草芽孢杆菌Tpb55菌粉的质量比为1.88∶98.12。优选的，该枯草芽孢杆菌Tpb55菌粉的芽孢含量4×1010cfu/g。如上所述的组合物在防治烟草的黑胫病和赤星病方面的应用。优选的，防治赤星病时，在烟草赤星病发病初期施用组合物，稀释400倍液，叶片均匀喷雾，连续施药2～3次，每次间隔7～10天。优选的，防治烟草黑胫病时，在烟草移栽后7天施用组合物1次，稀释为400倍液，灌根，黑胫病发病初期连续施药2～3次，每次间隔7～10天。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：本专利技术组合物与单独施用枯草芽孢杆菌Tpb55菌株相比，能显著提高对烟草黑胫病、赤星病等真菌病害的防治效果，与生产主用化学药剂的防治效果相当。两组分相容性好、并能增加防治效果的诱导植物抗病性物质，并利用其与生防微生物复配，兼做杀菌剂和诱抗剂来用于烟草赤星病、黑胫病等真菌病害的防治，并将其作为新型杀菌剂原料进行开发应用。附图说明图1为诱导抗性物质对Tpb55菌株生长的影响；图2为诱导抗性物质与Tpb55菌株复配对黑胫病防治效果；图3为枯草芽孢杆菌Tpb55与核黄素组合物对POD酶活性影响；图4为枯草芽孢杆菌Tpb55与核黄素组合物对CAT酶活性影响；图5为枯草芽孢杆菌Tpb55与核黄素组合物对SOD酶活性影响。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术进行详细描述，本部分的描述仅是示范性和解释性，不应对本专利技术的保护范围有任何的限制作用。一种由核黄素与枯草芽孢杆菌Tpb55菌株按照质量比1.21～2.34∶97.76～98.79构成的组合物；将两种组分混匀即可。其中，枯草芽孢杆菌Tpb55菌株的制备，可参照专利ZL201110093415.4方法发酵完成后，喷雾干燥即得枯草芽孢杆菌Tpb55菌粉，芽孢含量4×1010cfu/g。上述组合物在防治烟草的黑胫病和赤星病方面，有显著地效果；可以通过以下措施达到：1、防治烟草赤星病时，在烟草赤星病发病初期开始施用枯草芽孢杆菌与核黄素的组合物，施用倍数为稀释为400倍液，施用方法为叶片均匀喷雾，连续施药2～3次，每次间隔7～10天。2、防治烟草黑胫病时，在烟草移栽后7天施用枯草芽孢杆菌与核黄素的组合物1次，黑胫病发病初期连续施药2～3次，每次间隔7～10天，施用倍数为稀释为400倍液，施用方法为灌根。为更好的说明本专利技术，特列举以下实施例，但不限于这些实施例。实施例1：抗烟草黑胫病诱导抗性物质筛选1.1材料供试烟草红花大金元，种子由本实验室保存。将种子播种在装有沃土的育苗盘内，置于28℃左右的温室里生长，至1-2片真叶时移至营养钵中单株培养，待烟苗生长至5-6片真叶时进行试验。供试病原菌烟草黑胫病菌(PhytophthoraParasiticaVarnicotianae)0号生理小钟，由本实验室保存。病原菌在燕麦培养基上培养，参照杨建卿的方法刺激游动抱子囊产生，制备游动抱子悬浮液，接种浓度为6×103个游动抱子/mL悬浮液。供试药剂如表1所示。表1供试诱导抗性物质温室防效对10个备选药剂分别选定5个不同梯度浓度进行诱导处本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组合物，由质量比为1.21～2.34∶97.76～98.79的核黄素与枯草芽孢杆菌Tpb55菌粉构成。

【技术特征摘要】
1.一种组合物，由质量比为1.21～2.34∶97.76～98.79的核黄素与枯草
芽孢杆菌Tpb55菌粉构成。
2.如权利要求1所述组合物，其特征在于：核黄素与枯草芽孢杆菌Tpb55
菌粉的质量比为1.88∶98.12。
3.如权利要求1或2所述组合物，其特征在于：该枯草芽孢杆菌Tpb55
菌粉的芽孢含量4×1010cfu/g。
4.如权利要求1所述组合物在防治...

【专利技术属性】
技术研发人员：张成省，孔凡玉，黄树立，张立猛，计思贵，李青诚，祖秉桥，高加明，李锡宏，郭利，杨海凌，焦永鸽，王静，冯超，
申请(专利权)人：中国农业科学院烟草研究所，中国烟草总公司湖北省公司，
类型：发明
国别省市：山东;37