本发明专利技术公开了ActivinB在制备治疗神经退行性疾病的药物中的应用，本发明专利技术通过体内、体外实验的研究，发现ActivinB可用于治疗神经退行性疾病中，能有效减轻神经细胞凋亡，增加纹状体区TH+神经纤维密度，降低炎症反应，显著提高患有帕金森病小鼠的转棒时间、矿场运动路程和速度，且基本无毒副作用，是一种有开发前景的治疗神经退行性疾病的新药物，尤其是有望被开发为用于治疗帕金森病的新药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及Activin B在制备治疗神经退行性疾病的药物中的应用。
技术介绍
帕金森病是第二大常见的神经系统退行性病变，其主要症状是运动功能的改变，如运动过缓、静止震颤、步态畸形和姿势不稳等病变，最后导致运动能力丧失。黑质纹状体多巴胺神经元死亡是帕金森主要的病理特征。帕金森病的病因和发病机制十分复杂，至今仍未彻底明确，目前临床上帕金森病的治疗方案，包括药物治疗、细胞替代治疗和手术治疗等都未能达到理想的治疗效果。因此，寻找能够有效预防或改善帕金森症状的药物是目前最紧要的目标。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供Activin B在制备治疗神经退行性疾病的药物中的应用。本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术通过体内、体外实验的研究，发现Activin B对神经退行性疾病具有治疗作用，尤其是对帕金森这一类神经退行性疾病具有很好的治疗效果，并且Activin B对细胞基本无毒副作用，具有很好的开发前景，有望被开发为用于治疗神经退行性疾病的新药物。本专利技术的有益效果是：本专利技术将Activin B用于治疗神经退行性疾病的药物中的应用中，证明了Activin B可减轻神经细胞凋亡，增加纹状体区TH+神经纤维密度，降低炎症反应，显著提高患有帕金森病小鼠的转棒时间、矿场运动路程和速度，且基本无毒副作用，是一种有开发前景的治疗神经退行性疾病的药物，尤其是有望被开发为用于治疗帕金森病的新药物。附图说明图1为MTT法检测Activin B对MPP+诱导细胞凋亡的影响；saline：用生理盐水处理的对照组，MPP+：经MPP+处理后用正常培养基培养，act5ng/ml：经MPP+处理后用含5ng/ml Activin B的培养基培养，act10ng/ml：经MPP+处理后用含10ng/ml Activin B的培养基培养，act25ng/ml：经MPP+处理后用含25ng/ml Activin B的培养基培养；图2为Hoechst核染法检测Activin B对MPP+诱导细胞凋亡的影响；control：用生理盐水处理的对照组，MPP+：经MPP+处理后用正常培养基培养，mpp+act10ng/ml：经MPP+处理后用含10ng/ml Activin B的培养基培养，mpp+act25ng/ml：经MPP+处理后用含25ng/ml Activin B的培养基培养；图3为anti-TH免疫组织化学染色法检测Activin B对MPTP诱导脑组织损伤的影响；图4为不同处理组小鼠在转棒实验中的转棒时间；图5为不同处理组小鼠在旷场实验中的平均运动速度和运动总路程。具体实施方式 下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但并不局限于此。 Activin是转化生长因子超家族的一员，包括activin A，activin B及activin AB三种亚型，activin参与体内的激素水平调节、胚胎发育、抗炎以及器官与组织的损伤与修复。 实施例1一、体外实验1.1 实验细胞：SH-SY5Y细胞，培养于含1%青链霉素和10%胎牛血清的高糖DMEM培养基。MPP+和Activin B溶于生理盐水备用。1.2 实验方法及分组：将SH-SY5Y细胞血清饥饿24小时，用含25μm/ml MPP+的培养基孵育细胞12h，换至正常培养基培养24h后，随机分成4组（第①组为MPP+模型组，MPP+处理后，用正常培养基继续培养24h；第②组MPP++Activin B 5ng/ml：MPP+处理后用含5ng/ml Activin B的培养基培养24h；③MPP++Activin B 25ng/ml：MPP+处理后用含25ng/ml Activin B的培养基培养24h，④MPP++Activin B 50ng/ml：MPP+处理后用含50ng/ml Activin B的培养基培养24h；另取第⑤组saline对照组，取血清饥饿24小时的SH-SY5Y细胞用含saline的培养基进行培养。各组间的细胞用量、培养液体积、培养时间和温度等其他条件均一致。1.3 MTT法检测细胞活性将浓度为105个/mL细胞接种50μL于96孔板中，按照1.2中的实验方法及分组进行实验。检测前每孔加入50μL MTT，细胞送回培养箱孵育2h，每孔加100μL DMSO溶解，30min后紫外分光光度计读数。检测结果如图1所示，从中可以看出MPP+可诱导SH-SY5Y细胞发生凋亡，在加入10ng/ml、25ng/ml Activin B后，Activin B对MPP+处理的SH-SY5Y细胞发挥了神经保护作用，减少了细胞的凋亡。1.4 Hoechst核染检测细胞凋亡情况细胞接种于24孔板中，按照以上细胞实验方法及分组进行实验。Hoechst染核液与细胞共孵育15min，即拿去倒置荧光显微镜下拍照。观察核碎裂核固缩情况。检测结果如图2所述，从中可以看出MPP+可诱导SH-SY5Y细胞发生核碎裂核固缩（如图2中的箭头所示），在加入10ng/ml、25ng/ml Activin B后，Activin B对MPP+处理的SH-SY5Y细胞发挥了神经保护作用，减少了细胞的核碎裂核固缩。综上所述，体外实验MTT检测与Hoechst荧光染色结果显示Mpp+可显著诱导细胞凋亡， Activin B可以明显减轻MPP+导致的SH-SY5Y细胞凋亡，并且呈现出剂量依赖性。可见，Activin B可有效抑制SH-SY5Y细胞凋亡。二、体内实验2.1 实验动物：8-10周龄雄性C57小鼠（体重20-25g）。所有小鼠自由饮水饮食，并维持在12h：12h光：暗的恒温恒湿环境中。2.2 帕金森病小鼠模型的制备：MPTP 20mg/kg，连续腹腔注射5天，制作帕金森病小鼠模型，参照文献（V. Jackson-Lewis and S. Przedborski. Protocol for the MPTP mouse model of Parkinson's disease[J]. Nat Protoc, 2007, 2(1): 141-51.）2.3动物分组及药物处理：①Saline+saline组：连续腹腔注射Saline（生理盐水）5天，注射剂量和MPTP相同，小鼠脑纹状体尾壳核区（CPu）立体定位注射saline，每侧2μL。②MPTP+saline组：连续腹腔注射MPTP 5天，一天一次，注射量为20mg/kg，然后对小鼠脑纹状体尾壳核区（CPu）立体定位注射无菌生理盐水，每侧2μL，一天一次，共注射5天。③MPTP+activin B组: 连续腹腔注射MPTP 5天，一天一次，注射量为20mg/kg，然后对小鼠脑纹状体尾壳核区（CPu）立体定位注射Activin B，每侧注射2μL 25ng/μL的Activin B，一天一次，共注射5天。2.4 anti-TH免疫组织化学染色按上述2.3的动物本文档来自技高网...
【技术保护点】
Activin B在制备治疗神经退行性疾病的药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.Activin B在制备治疗神经退行性疾病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述神经退行性疾病为帕金森病。
3.一种制备治疗神经退行性疾病的药剂，其特征在于：其活性成分为Activin B。
4.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：张璐，张琳，李娟，薛进华，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44
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