一种PCR反应液及试剂盒和PCR方法技术

技术编号:11002002 阅读:109 留言:0更新日期:2015-02-04 23:46
本发明专利技术涉及生物技术领域,具体涉及一种PCR反应液及试剂盒和PCR方法。所述PCR反应液,包括如下原料制备而成:二甲亚砜,牛血清蛋白,DNTP,10×PCR buffer,溴酚蓝溶液,溶质体积百分数为30%的甘油溶液和rTaq酶。本发明专利技术优化了PCR实验的PCR反应液,特别是加入一定比例的甘油溶液,并加入BSA与DMSO的组合,保证了Tag酶的稳定性及活性,并减少引物二聚体的形成,减少PCR反应液配置时间,在琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物时,只需加入核酸染料即可检测,可以大量节省PCR产品检测时间,提高PCR的扩增效率。

【技术实现步骤摘要】
-种PCR反应液及试剂盒和PCR方法
本专利技术涉及生物
,具体涉及一种PCR反应液及试剂盒和PCR方法。
技术介绍
聚合酶链式反应(Polymerasechainreaction,PCR)是一种体外快速扩增特定 DNA片段的技术,它是现代分子生物学最重要的手段之一。其基本原理是根据获诺贝尔 1953年生理学奖的DNA双螺旋模型所建立的体细胞复制的机制以及双链DNA在体外可随温 度变化发生变性与复性的特点设计。1985年Randll.K.Skaii等利用KlenowDNA聚合酶建 立了聚合酶链式反应技术,并将其应用于镰刀形贫血病的基因诊断。它是80年代分子生物 学领域的一项革命性突破,被誉为分子生物学资源发展史上的又一里程碑。此项技术一经 问世就因其操作简单、快速、灵敏度高和特异性强等优点迅速在与分子生物学相关的学科 得到广泛应用,如分子生物学研究、医学检验、动植物检验、法医鉴定及考古等各个领域。 在PCR过程中,DNA聚合酶起着关键性作用。目前已有100多个DNA聚合酶的相 关基因被克隆和测序,Thermusaquaticus是一种水生嗜热本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种PCR反应液,其特征在于,包括如下的原料制备而成:二甲亚砜,牛血清蛋白,DNTP,10×PCR buffer,溴酚蓝溶液,溶质体积百分数为30%的甘油溶液和rTaq酶。

【技术特征摘要】
1. 一种PCR反应液,其特征在于,包括如下的原料制备而成:二甲亚砜,牛血清蛋白, DNTP,10XPCRbuffer,溴酚蓝溶液,溶质体积百分数为30%的甘油溶液和rTaq酶。2. 根据权利要求1所述的PCR反应液,其特征在于,包括如下的原料制备而成:6-8 yl 二甲亚砜,6-8iil质量体积百分数为0. 1%的牛血清蛋白溶液,9-lliillOmM DNTP溶液, 18-22 ill 10 XPCR buffer,2-4 ill溴酚蓝溶液,45-55 ill溶质体积百分数为30 %甘油溶 液和 4-6 u 1 rTaq 酶。3. 根据权利要求1所述的PCR反应液,其特征在于,包括如下的原料制备而成:7. 5 yl 二甲亚砜,7. 5iil质量体积百分数为0. 1%牛血清蛋白溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员:王清水余彦
申请(专利权)人:福建师范大学
类型:发明
国别省市:福建;35

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