用于调节载脂蛋白(a)表达的方法和组合物技术

本文公开用于减少apo(a)以治疗、预防或改善与apo(a)或Lp(a)相关的疾病、病症或病状的反义化合物和方法。与apo(a)或Lp(a)相关的某些疾病、病症或病状包括炎症性、心血管性和/或代谢性疾病、病症或病状。本文公开的反义化合物可用于治疗有需要的个体的此类疾病、病症或病状。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节载脂蛋白(a)表达的方法和组合物序列表本申请连同序列表以电子格式一同提交。序列表以2013年5月22日建立的大小为约396Kb的题为BIOL0177WOSEQ.txt的文档来提供。电子格式的序列表中的信息以引用的方式整体并入本文。
本文所描述的实施方案提供用于减少动物的载脂蛋白(a)mRNA和蛋白质的表达的方法、化合物和组合物。此类方法、化合物以及组合物适用于治疗、预防或改善心血管和/或代谢疾病、病症或病状。背景脂蛋白是球状、胶束样颗粒，其由蛋白质、磷脂和胆固醇的两亲性涂层环绕的酰基甘油和胆固醇酯的非极性芯组成。脂蛋白已基于功能和物理性质而分类为五种类别：乳糜微粒、极低密度脂蛋白(VLDL)、中间密度脂蛋白(IDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。乳糜微粒将膳食脂肪从肠道运输至组织。VLDL、IDL和LDL都将三酰甘油和胆固醇从肝脏运输至组织。HDL将内源性胆固醇从组织运输至肝脏脂蛋白颗粒经历连续代谢处理并且具有可变的性质和组成。脂蛋白密度不随着增加粒径而增加，因为它们的外涂层的密度小于内芯的密度。脂蛋白的蛋白组分被称为载脂蛋白。至少9种载脂蛋白以显著量分布于各种人脂蛋白中。脂蛋白(a)[Lp(a)]颗粒在近50年前被识别，并且由非常独特的LDL颗粒组成，其中一种载脂蛋白B(apoB)蛋白质通过二硫键连接到单一载脂蛋白(a)[apo(a)]蛋白质。apo(a)蛋白与尤其在圈形区IV2型重复结构域内的纤溶酶原具有高度同源性。循环Lp(a)的水平与分子中存在的圈形区IV2型可变重复序列的数量成反比，因为两种等位基因共表达于个体中，可以显示杂合血浆同种型概况(Kraft等人,EurJHumGenet,1996；4(2):74-87)。据认为，apo(a)中的此圈形区重复结构域可以负责其促血栓形成和抗纤维蛋白溶解性质，从而可能增强动脉粥样硬化进展。Apo(a)由IL-6来转录调节，并且在用IL-6抑制剂(托珠单抗)治疗的类风湿关节炎患者的研究中，血浆水平在3个月的治疗后降低了30％(Schultz等人,PLoSOne2010；5:e14328)。Apo(a)已被证明优先结合氧化的磷脂，并且增强了血管炎症(Bergmark等人,JLipidRes2008；49:2230–2239；Tsimikas等人,Circulation.2009；119(13):1711–1719)。此外，研究表明，Lp(a)颗粒还可以刺激血管内皮通透性、诱导纤溶酶原激活物抑制剂1型的表达并且激活巨噬细胞白介素-8分泌(KoschinskyandMarcovina,CurrOpinLipidol2004；15:167–174)。重要的是，最近的遗传关联研究发现，Lp(a)是心肌梗死、中风、周围血管疾病和腹主动脉瘤的独立危险因素(Rifai等人,ClinChem2004；50:1364–71；Erqou等人,JAMA2009；302:412–23；Kamstrup等人,Circulation2008；117:176–84)。另外，在最近的早发冠状动脉疾病(PROCARDIS)的研究中，Clarke等人(Clarke等人,NEJM(2009)361；2518-2528)描述冠状动脉心脏疾病与血浆Lp(a)浓度之间的强大和独立的关联。此外，Solfrizzi等人提出增加的血清Lp(a)可能与阿尔茨海默氏病(AD)的危险增加相关(Solfrizzi等人,JNeurolNeurosurgPsychiatry2002,72:732-736。目前，在临床环境中，用于治疗心血管疾病的间接apo(a)抑制剂的实例包括阿司匹林、缓释烟酸(Niaspan)、米泊美生(Mipomersen)、安塞曲匹(Anacetrapib)、伊罗替罗(Epirotirome)和洛美他派(Lomitapide)，其分别降低血浆Lp(a)水平18％、39％、32％、36％、43％和17％。此外，Lp(a)单采已用于临床中，以减少含有apo(a)的Lp(a)颗粒。迄今为止，通过直接靶向apo(a)水平来治疗心血管疾病的治疗策略还很有限。已经开发核酶核苷酸(美国专利5,877,022)和反义寡核苷酸(WO2005/000201；WO2003/014397；美国专利8,138,328；Merki等人,JAmCollCardiol2011；57:1611–1621)，但是没有直接靶向apo(a)的化合物目前在临床中使用。因此，仍然存在对于新药的明显的未满足的医疗需求，这些新药可以有效地并且选择性地降低由于血浆Lp(a)水平长期升高而使得心血管事件的危险增加的患者的apo(a)水平。
技术实现思路
本文提供用于调节apo(a)mRNA和蛋白质的表达的组合物和方法。在某些实施方案中，apo(a)特异性抑制剂降低了apo(a)mRNA和蛋白质的表达。在某些实施方案中，所述组合物是apo(a)特异性抑制剂。在某些实施方案中，apo(a)特异性抑制剂是核酸、蛋白质或小分子。在某些实施方案中，apo(a)特异性抑制剂是靶向apo(a)的反义寡核苷酸。在某些实施方案中，apo(a)特异性抑制剂是修饰的寡核苷酸，其由12至30个连接核苷组成并且包括核碱基序列，所述核碱基序列包含与SEQIDNO:1的核碱基3901至3920的等长部分互补的至少8个连续核碱基部分，其中所述修饰的寡核苷酸的核碱基序列与SEQIDNO:1至少80％互补。在某些实施方案中，apo(a)特异性抑制剂是修饰的寡核苷酸，其由12至30个连接核苷组成并且具有核碱基序列，所述核碱基序列包含SEQIDNO:1-130、133、134的核碱基序列的至少8个、至少9个、至少10个、至少11个、至少12个、至少13个、至少14个、至少15个、至少16个、至少17个、至少18个、至少19个或20个连续核碱基。在某些实施方案中，apo(a)特异性抑制剂是修饰的寡核苷酸，其由20个连接核苷组成并且具有核碱基序列，所述核碱基序列包含任何SEQIDNO:58的至少8个连续核碱基，其中所述修饰的寡核苷酸包含：(a)间隔段，其由10个连接的脱氧核苷组成；(b)5’翼段，其由5个连接的核苷组成；(c)3’翼段，其由5个连接的核苷组成；并且其中间隔段位于5'翼段与3'翼段之间，其中各翼段的各核苷包含2'-O-甲氧基乙基糖，其中各核苷间键为硫代磷酸酯键且其中各胞嘧啶残基为5-甲基胞嘧啶。某些实施方案提供了包含本文所述的化合物，或其盐，以及药学上可接受的载体或稀释剂的组合物。在某些实施方案中，apo(a)表达的调节在细胞或组织中发生。在某些实施方案中，调节在动物的细胞或组织中发生。在某些实施方案中，动物为人。在某些实施方案中，调节是apo(a)mRNA水平的降低。在某些实施方案中，调节是apo(a)蛋白质水平的降低。在某些实施方案中，apo(a)mRNA和蛋白质水平都降低。所述降低可以时间依赖性方式或以剂量依赖性方式发生。某些实施方案提供用于治疗的组合物和方法。某些实施方案提供用于预防、治疗、延缓、减缓进展和/或改善与apo(a)相关疾病、病症和病状的组合物和方法。某些实施方案提供用于预防、治疗、延缓、减缓进展和/或改善与Lp(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种化合物，其包含修饰的寡核苷酸，所述修饰的寡核苷酸由12至30个连接核苷组成并且包括核碱基序列，所述核碱基序列包含与SEQ ID NO:1的核碱基3901至3920的等长部分互补的至少8个连续核碱基的部分，其中所述修饰的寡核苷酸的核碱基序列与SEQ ID NO:1至少80％互补。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.05.24 US 61/651,5391.一种化合物，其包含修饰的寡核苷酸，所述修饰的寡核苷酸由20至30个连接核苷组成并且包括核碱基序列，所述核碱基序列包含与SEQIDNO:1的核碱基3901至3920的等长部分互补的至少20个连续核碱基的部分，其中所述修饰的寡核苷酸的核碱基序列与SEQIDNO:1至少100%互补。2.如权利要求1所述的化合物，其中所述修饰的寡核苷酸由20至24个连接核苷组成。3.如权利要求1所述的化合物，其中所述修饰的寡核苷酸由20至22个连接核苷组成。4.如权利要求1所述的化合物，其中所述修饰的寡核苷酸由20至25个连接核苷组成。5.如权利要求1所述的化合物，其中所述修饰的寡核苷酸由20个连接核苷组成。6.如权利要求1所述的化合物，其中所述核碱基序列包含SEQIDNO:58的核碱基序列的20个连续核碱基。7.如权利要求1所述的化合物，其中所述修饰的寡核苷酸是单链的。8.如权利要求1所述的化合物，其中至少一个核苷间键是修饰的核苷间键。9.如权利要求8所述的化合物，其中至少一个核苷间键是硫代磷酸酯核苷间键。10.如权利要求1所述的化合物，其中所述修饰的寡核苷酸包含至少一个修饰的糖。11.如权利要求10所述的化合物，其中至少一个修饰的糖是双环糖。12.如权利要求10所述的化合物，其中至少一个修饰的糖包含2'-O-甲氧基乙基、具有呋喃糖的双环核苷，其包括4'与2'碳原子之间的甲基(亚甲氧基)(4'-CH(CH3)-O-2')桥、3'-氟-HNA或4'-(CH2)n-O-2'桥...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗桑尼·M·克鲁克，马克·J·格雷厄姆，S·M·弗赖尔，
申请(专利权)人：ISIS制药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US