外来体检测用单克隆抗体制造技术

外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：能够检测或捕捉外来体的、识别SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～195的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36～54的单克隆抗体或其抗体片段、和识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体或其抗体片段。本发明专利技术的外来体检测用单克隆抗体可以以良好的灵敏度和特异性检测机体内外来体上的CD9、CD63或CD81。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及检测外来体的抗体的套件。更详细而言，涉及针对外来体表面的特定抗原（CD9、CD63、CD81）的单克隆抗体或其抗体片段、含有该单克隆抗体或其抗体片段的套件、使用该单克隆抗体或其抗体片段来检测来源于外来体的miRNA的方法、测定该套件与来源于受试者的机体试样的复合体的方法、使用该套件的癌或免疫系疾病的诊断方法和用于实施该方法的试剂盒、以及使用该套件的抗癌剂或抗免疫系疾病药的药效评价方法和用于实施该方法的试剂盒。
技术介绍
外来体是存在于机体内的体液中的囊泡颗粒。已知与通常的细胞表面相同地，在外来体表面存在各种膜蛋白。另一方面，还已知在外来体内部，除了细胞因子等各种蛋白质以外，还含有microRNA（miRNA）。此外，据报道外来体分泌自各种细胞、例如免疫系的细胞或各种癌细胞，作为机体内的细胞间通信的媒介发挥功能而与生理现象关联、或者与癌等疾病的关联性受到关注。例如，在非专利文献1中，报道了使用作为肿瘤标志物的EpCAM的抗体来分离卵巢癌患者的循环血液中的外来体，并在来源于该外来体的miRNA表达量与卵巢癌患者之间发现了关联性。因此，只要可简便地捕捉与癌等疾病关联的外来体的量的变化，则可期待在外来体的诊断药中的应用。此外，CD9、CD63和CD81是属于四跨膜蛋白家族的4次穿膜型膜蛋白，在许多外来体上表达。例如，非专利文献2中报道了用CD63的抗体、或肿瘤关联标志物的Caveolin-1的抗体对黑素瘤患者血浆中的外来体进行检测、定量化，与正常人相比有所上升。专利文献1中通过组合CD63抗体或针对各种膜蛋白的抗体等来与离心后的血浆样品反应，并对来源于癌患者中的外来体的信号进行定量、分析。现有技术文献专利文献专利文献1 : WO2010/065968号小册子非专利文献非专利文献1 : D.D.Taylor，etal.、Gynecol.Oncol.、2008、110、p13-21非专利文献2 : M.Logozzi，etal.、PLoSONE、2009、4、p1-10。
技术实现思路
专利技术要解决的技术问题作为抗CD9抗体、抗CD63抗体和抗CD81抗体，销售有各种抗体。这些市售抗体是通过直接免疫表达CD9、CD63或CD81的细胞而得的抗体之一，而并不是利用设计的特定抗原进行免疫得到的抗体。因此，在灵敏度、特异性方面尚不充分，为了迅速且简便、而且准确且精度良好地检测外来体，需要进一步的技术开发。本专利技术的课题在于提供：能够以良好的灵敏度和特异性检测或捕捉机体内外来体的单克隆抗体或其抗体片段、含有该单克隆抗体或其抗体片段的套件、测定该套件与来源于受试者的机体试样的复合体的方法、使用该套件的癌或免疫系疾病的诊断方法、以及使用该套件的抗癌剂或抗免疫系疾病药的药效评价方法。用于解决技术问题的方法本专利技术人为了解决上述课题而反复深入研究，结果发现，通过制备并使用针对外来体上的CD9、CD63和CD81的特定序列的单克隆抗体，能够以良好的灵敏度和特异性检测和捕捉机体内外来体，从而完成了本专利技术。即、本专利技术涉及：＜1＞外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：能够检测或捕捉外来体的、识别SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～195的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36～54的单克隆抗体或其抗体片段、和识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体或其抗体片段。更详细而言，涉及以下的＜2＞～＜13＞。＜2＞外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：作为识别SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～195的单克隆抗体片段的由以保藏编号FERMABP-11519保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD9-12A12抗体）或其片段；作为识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体片段的由以保藏编号FERMABP-11520保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD63-8A12抗体）或其片段；作为识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体片段的由以保藏编号FERMABP-11521保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD63-13C8抗体）或其片段；作为识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体片段的由以保藏编号NITEABP-1480保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD81-4G6抗体）或其片段；作为识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体片段的由以保藏编号NITEABP-1481保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD81-6D12抗体）或其片段；和作为识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36～54的单克隆抗体片段的由以保藏编号NITEABP-1482保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD81-12C4抗体）或其片段。＜3＞单克隆抗体或其抗体片段的套件，其包含选自下述的同一或二种抗体或其抗体片段的组合：CD9-12A12抗体或其抗体片段、CD63-8A12抗体或其抗体片段、和CD63-13C8抗体或其抗体片段。＜4＞前述＜3＞所述的套件，其选自：固相抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段的套件；固相抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD63-13C8抗体或其抗体片段的套件；固相抗体为CD63-8A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段的套件；和固相抗体为CD63-8A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD63-13C8抗体或其抗体片段的套件。＜5＞前述＜3＞或＜4＞所述的套件，其用于检测外来体。＜6＞疾病特异性的外来体检测用单克隆抗体的套件，其包含选自CD9-12A12抗体或其抗体片段、CD63-8A12抗体或其抗体片段、和CD63-13C8抗体或其抗体片段中的抗体或其抗体片段、与疾病特异性膜蛋白抗体或其抗体片段的组合。＜7＞癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有前述＜3＞～＜5＞中任一项所述的套件的单克隆抗体或其抗体片段。＜8＞癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有前述＜6＞所述的套件的单克隆抗体或其抗体片段。＜9＞癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有前述＜6＞所述的套件。＜10＞检测外来体的miRNA的方法，该方法包括：使来源于受试者的机体试样与前述＜1＞或＜2＞所述的单克隆抗体接触而捕捉该外来体。＜11＞测定来源于外来体复合体的信号强度的方法，该方法包括：使来源于受试者的机体试样与前述＜3＞～＜5＞中任一项所述的套件的单克隆抗体接触而形成该外来体复合体。＜12＞癌或免疫系疾病的判定方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：能够检测或捕捉外来体的、识别SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～195的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36～54的单克隆抗体或其抗体片段、和识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体或其抗体片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.12.26 JP 2011-2839281. 外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：能够检测或捕捉外来体的、识别SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～195的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36～54的单克隆抗体或其抗体片段、和识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体或其抗体片段。
2. 外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：作为识别SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～195的单克隆抗体片段的由以保藏编号FERMABP-11519保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD9-12A12抗体）或其片段；
作为识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体片段的由以保藏编号FERMABP-11520保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD63-8A12抗体）或其片段；
作为识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体片段的由以保藏编号FERMABP-11521保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD63-13C8抗体）或其片段；
作为识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体片段的由以保藏编号NITEABP-1480保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD81-4G6抗体）或其片段；
作为识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体片段的由以保藏编号NITEABP-1481保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD81-6D12抗体）或其片段；和
作为识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36～54的单克隆抗体片段的由以保藏编号NITEABP-1482保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD81-12C4抗体）或其片段。
3. 单克隆抗体或其抗体片段的套件，其包含选自下述的同一或二种抗体或其抗体片段的组合：CD9-12A12抗体或其抗体片段、CD63-8A12抗体或其抗体片段、和CD63-13C8抗体或其抗体片段。
4. 权利要求3所述的套件，其选自：固相抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段的套件；
固相抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：太田英树，C冈田，村上登美，冈本博之，园田光，
申请(专利权)人：盐野义制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP