华蟾素在骨肉瘤新辅助化疗中的应用制造技术

华蟾素在骨肉瘤新辅助化疗中的应用。所属技术领域：卫生、体育和社会福利业。所要解决的技术问题：肿瘤细胞对现有化疗药物的耐药性及化疗过程中的毒副作用已成为目前骨肉瘤治疗中的一项亟待解决的难题。技术方案的要点及主要用途：我们在骨肉瘤新辅助化疗当中及化疗结束后的两个阶段应用华蟾素治疗，既有效降低了化疗药间歇期的肿瘤复发及转移的发生率，同时提高了骨肉瘤患者的生存率和生命质量。由于华蟾素中药制剂价格便宜，进行药物经济性评价结果显示，华蟾素联合新辅助化疗治疗骨肉瘤，具有明显的经济性优势，如果能够广泛使用，能明显减轻患者及社会的经济负担，带来巨大的经济和社会效益。

【技术实现步骤摘要】
华蟾素在骨肉瘤新辅助化疗中的应用
目前，国内外很少有关于中药应用于骨肉瘤治疗的研究，课题组在循证的基础上，对可能会对骨肉瘤肿瘤组织具有杀伤作用的十余种中药提出假设，通过从体外细胞系，动物模型及临床患者三个水平进行了层层递进的综合验证和评价，不仅对药物疗效进行了全面系统的评价，对中药辅助化疗药的抗肿瘤机制也进行了探索，在充足的证据基础上，课题组得出结论:华蟾素注射液在骨肉瘤治疗中与化疗药物联合应用，具有降低化疗毒副作用，减轻疼痛，改善生存质量，增强免疫能力等疗效，且无明显不良反应。但有临床研究发现，骨肉瘤新辅助化疗中应用小牛胸腺肽也可提升患者免疫力从而增强治疗效果，并已被临床广泛接受并应用，那么，华蟾素是否比小牛胸腺肽等其它生物制剂更具优越性？为了进一步验证华蟾素对比胸腺肽类生物制剂的优势，课题组从药物济学的视角，对华蟾素对比胸腺肽类药物的经济性进行了系统评价，前瞻性试验研究在辽宁省肿瘤医院完成，发现华蟾素辅助化疗药物治疗骨肉瘤患者，由于其药品价格远低于对照组胸腺肽组，而且使用方便，同时能够有效改善患者的生命质量。通过最小成本分析和成本-效用分析得出结论，华蟾素组经济性优于胸腺肽组。如果能够在临床广泛使用，能够有效减少骨肉瘤的国内医疗卫生费用支出，有效减轻患者的经济负担。由此，在课题组将此项技术向其他医院推荐时，迅速得到了当地医生以及患者的主动配合，因为新辅助化疗周期很长，花费高达十万元左右，如果用华蟾素代替胸腺肽等生物制剂可以明显减低病人的住院费用，在我国现阶段国情及医保水平上很适合在临床中加以推广。综上所述，华蟾素应用于骨肉瘤新辅助化疗的治疗方案如能在国内进一步推广不仅为骨肉瘤治疗提供一种全新有效的治疗方案，也必将产生显著的经济效益和社会效益。我们在2012年的国外期刊中报道了华蟾素和顺钼联合对骨肉瘤细胞有杀伤作用，在2014年中文文献中有一篇华蟾素协同顺钼对人骨肉瘤细胞株杀伤作用的报道，但晚于我们发表的文献。我们报道的华蟾素对骨肉瘤裸鼠的治疗作用在国际上尚属首次。文献中有华蟾素联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床报道，但我们报道的华蟾素联合新辅助化疗治疗骨肉瘤方案，可以克服化疗周期之后间歇期肿瘤复发与转移、减少对患者的毒副作用、并减轻骨肉瘤患者对化疗药的耐药性问题，中外文文献中均未见报道。
技术介绍
骨肉瘤是严重危害青少年健康的最常见恶性骨肿瘤，发病率为4-5/1000000，易早期肺转移，预后极差，其生存率低于20%，且常因患病肢体难以保留，而不得不采用截肢手术，给患者带来终生的痛苦。近年来采用的保肢性手术联合新辅助化疗可显著提高患者术后生存率，治疗效果优于以往的截肢性手术，且因保留了肢体，使病人的生存质量显著提高。但大量临床实践证明，大剂量联合化疗后骨肉瘤病人常产生耐药性，使原本较为有效的化疗药物迅速失去对肿瘤组织的杀伤作用，从而导致瘤体复发或肺转移；此外，伴随化疗周期的进程将产生较为严重的对肝肾功能及各系统的毒副作用，许多病人甚至死因并非是骨肉瘤疾病本身，而是化疗药带来的多系统功能损害。因此，许多学者转而探寻将副作用更小的生物制剂或中药制剂应用于骨肉瘤的临床治疗。 我们课题组从2005年底开始着手将中药制剂应用于骨肉瘤化疗的相关研究，探索新的克服肿瘤耐药性的治疗方案。我们研究发现六种中药制剂都会对五种不同来源的骨肉瘤细胞系(MG63，0S732，Saos-2，H0S，U20S)中的一种或几种产生一定的杀伤作用，其中华蟾素和藏红花对五种骨肉瘤细胞系都显现出明显的杀伤作用，尽管杀伤效果尚不能与阿霉素，顺钼等一线化疗药物相比，但将此类中药制剂应用于骨肉瘤化疗的辅助治疗则不失为一种好的治疗选择。为了进一步探究中药制剂华蟾素、藏红花等的作用，我们将华蟾素和藏红花分别应用于骨肉瘤荷瘤裸鼠后发现，华蟾素组与对照组相比，肿瘤病灶明显变小，且未发现任何不良反应，而藏红花组与对照组却未能见到明显差别。由此动物实验证实了华蟾素的作用效果确切，安全有效，为临床应用提供了依据。因此，华蟾素应用于骨肉瘤新辅助化疗的治疗方案如能在国内进一步推广不仅为骨肉瘤治疗提供一种全新有效的治疗方案，也必将产生显著的经济效益和社会效益。
技术实现思路
我们共做了的五部分的研究工作: 第一部分:以体外建系的五种骨肉瘤细胞系(MG63，0S732, Saos-2, HOS, U20S)为模型，对多种具有抗肿瘤作用的中药进行筛选。课题组自2005年起就开始关注中药治疗骨肉瘤的研究，经过四年多的时间，我们将已被确认的对于胃癌、肺癌、肾癌、骨髓瘤、肠癌和白血病等恶性肿瘤有治疗作用的中药制剂或中药提取物莪术、郁金、枝莲、舌多糖、石斛、康莱特薏苡仁油注射剂、艾迪(斑蝥、人参等)注射剂、紫杉醇、华蟾素、藏红花、通关藤11种中药制剂或提取物，分别作用于体外建系的五种骨肉瘤细胞系MG63、0S732、Saos-2, HOS和U20S，研究先后发现莪术、郁金、枝莲、舌多糖、石斛等中药对骨肉瘤细胞无明显杀伤作用，但康莱特薏苡仁油注射剂、艾迪(斑蝥、人参等)注射剂、紫杉醇、华蟾素、藏红花、通关藤这6种中药制剂对骨肉瘤均具有杀伤作用，而且发现，在与化疗药联用时，这6种中药制剂还可以产生不同程度的抗骨肉瘤协同作用。对比国内外同类研究，在已有的报道中，仅对某中药制剂作用于1-2种骨肉瘤细胞系进行了研究，而对于5种骨肉瘤细胞系的全面研究，而且是对11种中药制剂的全面验证，本研究尚属首次。根据不同的骨肉瘤细胞系对药物敏感性的差异，可以证实以上6种药物对五种骨肉瘤细胞系的某一种或几种有效。但是欣喜的是，我们发现华蟾素和藏红花对选用的五种骨肉瘤细胞系均有显著地杀伤作用，而且在于化疗药联用时均能表现出明显的协同抗骨肉瘤作用。因此，相比而言，华蟾素和藏红花中药制剂在今后的临床治疗中可能会有更明显的效果。第二部分:在美国哈佛大学BIDMC医学中心对华蟾素和藏红花中药制剂进行抗肿瘤生物信号传导机制研究。为了深入了解筛选出的华蟾素和藏红花两种中药制剂抗肿瘤的作用机理，课题组与哈佛大学医学院Wei W教授取得的联系，并成功申请到国家教育部留学基金委项目支持，于2010年赴美国哈佛大学，在BIDMC医学中心Wei W教授的实验室开展研究。wei W教授的实验室在肿瘤生物治疗领域研究居世界前列，其团队在国际上有多篇文章发表在“Nature”、“Cell”等国际顶级杂志。华蟾素和藏红花两种中药制剂抗肿瘤的作用机理研究在哈佛大学医学院Wei W教授和Thomas R教授的指导下，研究进展非常顺利，我们发现华蟾素和藏红花中药制剂可以通过诱导骨肉瘤细胞凋亡来杀伤肿瘤细胞并抑制肿瘤细胞生长，且此作用机制与Fas-Caspase通路激活有关。以上研究成果由负责人与课题组成员中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所研究员高大明博士合作完成，高大明博士自2006年赴美在哈佛大学BIDMC医学中心从事药物抗肿瘤信号传导机制的博士后研究工作，并以第一作者身份在“Cell” (IF:31.957)、“Nat Cell B1l” (IF:19.527)等国际著名SCI杂志上发表论文15篇。同时，此部分科研工作中的某些实验环节还有来自中国协和医科大学的留美本文档来自技高网...

【技术保护点】
华蟾素中药制剂在骨肉瘤领域的研究及应用尚未见报道，我们的基础研究部分证实华蟾素对体外骨肉瘤细胞有杀伤作用，并可使荷瘤裸鼠的病灶变小，这为华蟾素在骨肉瘤中的应用提供了理论依据，填补该领域研究的空白。

【技术特征摘要】
1.华蟾素中药制剂在骨肉瘤领域的研究及应用尚未见报道，我们的基础研究部分证实华蟾素对体外骨肉瘤细胞有杀伤作用，并可使荷瘤裸鼠的病灶变小，这为华蟾素在骨肉瘤中的应用提供了理论依据，填补该领域研究的空白。2.课题临床研究部分在国际上首次证实华蟾素注射液在骨肉瘤治疗中与化疗药物联合应用，具有降低化疗毒副作用，减轻疼痛，改善生存质量，增强免疫能力等作用，且无明显...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄涛，
申请(专利权)人：黄涛，
类型：发明
国别省市：辽宁;21