一种以麸皮为原料制备液体凝乳酶的方法技术

技术编号:10825336 阅读:137 留言:0更新日期:2014-12-26 14:27
本发明专利技术公开了一种以麸皮为原料制备液体凝乳酶的方法。本发明专利技术制备米黑毛霉凝乳酶的步骤包括菌种活化、孢子悬浮液的制备、麸皮培养基的制备、接种、培养、酶液制备。本发明专利技术的制备方法原料价格低廉,操作工艺简单,发酵周期短,降低了生产成本,适合生产推广。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程
,涉及。
技术介绍
麦麸俗称麸皮、小麦麸,是以小麦籽实为原料加工面粉后得到的副产品,主要为小麦的种皮,占小麦籽粒质量的20%左右。我国有着巨大的麦麸资源,年产量约7000?8000万t左右。麦麸质地疏松、比重小、表面积大,其中含粗蛋白9.4?17.5%,粗脂肪1.7? 5.6%,另外还含有丰富的膳食纤维、维生素、矿物质以及低聚糖和酚类化合物等成分。目前麦麸大多经简单加工后作为饲料配料或食醋、酱油酿造的原料,利用率较低。 凝乳酶是干酪和干酪素生产过程中的关键性酶,其主要作用是专一性的剪切酪蛋白Phe 105-Met 106的肽键,从而使酪蛋白胶粒发生沉淀。凝乳酶主要有三种来源,分别为动物凝乳酶,植物凝乳酶和微生物凝乳酶。微生物具有生长周期短,生长速度快,生长条件易于控制,生产成本低等特点,目前各国的发酵工业都比较发达,发酵产物的提取工艺比较完善。因此,对由微生物所分泌的凝乳酶的研究和开发有广阔的前景。国内微生物凝乳酶菌种的产酶活力偏低,工艺复杂,导致生产成本过高,不易工业化大规模生产。本专利技术采用引进的米黑毛霉菌株,具有营养要求低、繁殖快、发酵产物易于提取分离、发酵周期短和凝乳酶产生能力强等优点,且其发酵生产的凝乳酶适合于干酪和干酪素生产。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。本专利技术从国外引进优良菌种资源,以麸皮为原料进行发酵,有效解决了麸皮的利用问题,实现了农副产品的综合利用,同时有效缓解了凝乳酶市场供应不足的问题,工艺简单,便于进行工业化推广。本专利技术的目的是按如下技术方案实现的,其特征是它包括以下步骤:(1)菌种活化将保藏的米黑毛霉菌种(ATCC编号26282)接种于制备好的PDA斜面上,30°C培养72?96h,待孢子成熟即可使用;(2)孢子悬浮液的制备向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水,用接种环或无菌玻棒搅动,刮下米黑毛霉孢子,振荡均匀并稀释至16个/mL,得到孢子悬液;(3)麸皮培养基的制备将麸皮与水按1:1.1 (w/v)的比例混合,搅拌均匀,在121°C、0.15MPa下灭菌20min ;(4)接种培养将孢子悬液按5%(V/V)接入麸皮培养基中,30°C三角瓶培养96?120h ;(5)酶液制备培养完成后,加入10mL的蒸馏水,2(TC、180r/min振荡浸提lh,浸提液用四层纱布过滤,滤液于8000r/min离心15min,上清液即液体凝乳酶。 本专利技术的有益效果本专利技术工艺简单,发酵周期短,适于工业化推广;以麸皮为原料发酵生产凝乳酶,生产成本低;采用优良菌种进行发酵,得到液体凝乳酶活力高。 【具体实施方式】 下面的实施例可以进一步说明本专利技术,但不以任何方式限制本专利技术。 实施例1将保藏的米黑毛霉菌种接种于制备好的PDA斜面上,30°C培养72h,待孢子成熟即可使用;向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水,用接种环或无菌玻棒搅动,刮下米黑毛霉孢子,振荡均匀并稀释至16个/mL,得到孢子悬液;将麸皮与水按1:1.1 (w/v)的比例混合,搅拌均匀,在121°C、0.15MPa下灭菌20min ;将孢子悬液按5%(V/V)接入麸皮培养基中,30°C三角瓶培养72h ;培养完成后,加入10mL的蒸馏水,20°C、180r/min振荡浸提lh,浸提液用四层纱布过滤,滤液于8000r/min离心15min,上清液即为液体凝乳酶。 实施例2将保藏的米黑毛霉菌种接种于制备好的PDA斜面上,30°C培养72h,待孢子成熟即可使用;向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水,用接种环或无菌玻棒搅动,刮下米黑毛霉孢子,振荡均匀并稀释至16个/mL,得到孢子悬液;将麸皮与水按1:1.1 (w/v)的比例混合,搅拌均匀,在121°C、0.15MPa下灭菌20min ;将孢子悬液按5%(V/V)接入麸皮培养基中,30°C三角瓶培养84h ;培养完成后,加入10mL的蒸馏水,20°C、180r/min振荡浸提lh,浸提液用四层纱布过滤,滤液于8000r/min离心15min,上清液即为液体凝乳酶。 实施例3将保藏的米黑毛霉菌种接种于制备好的PDA斜面上,30°C培养72h,待孢子成熟即可使用;向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水,用接种环或无菌玻棒搅动,刮下米黑毛霉孢子,振荡均匀并稀释至16个/mL,得到孢子悬液;将麸皮与水按1:1.1 (w/v)的比例混合,搅拌均匀,在121°C、0.15MPa下灭菌20min ;将孢子悬液按5%(V/V)接入麸皮培养基中,30°C三角瓶培养96h ;培养完成后,加入10mL的蒸馏水,20°C、180r/min振荡浸提lh,浸提液用四层纱布过滤,滤液于8000r/min离心15min,上清液即为液体凝乳酶。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以麸皮为原料制备液体凝乳酶的方法,其特征在于步骤如下:(1)菌种活化将保藏的米黑毛霉菌种(ATCC编号26282)接种于制备好的PDA斜面上,30℃培养72~96h,待孢子成熟即可使用;(2)孢子悬浮液的制备向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水,用接种环或无菌玻璃棒搅动,刮下米黑毛霉孢子,振荡均匀并稀释至106个/mL,得到孢子悬液;(3)麸皮培养基的制备将麸皮与水按1:1.1(w/v)的比例混合,搅拌均匀,在121℃、0.15MPa下灭菌20min;(4)接种培养将孢子悬液按5%(V/V)接入麸皮培养基中,30℃三角瓶培养72~96h;(5)酶液制备培养完成后,加入100mL的蒸馏水,20℃、180r/min振荡浸提1h,浸提液用四层纱布过滤,滤液于8000r/min离心15min,上清液即液体凝乳酶。

【技术特征摘要】
1.一种以麸皮为原料制备液体凝乳酶的方法,其特征在于步骤如下: (1)菌种活化 将保藏的米黑毛霉菌种(ATCC编号26282)接种于制备好的PDA斜面上,30°C培养72?96h,待孢子成熟即可使用; (2)孢子悬浮液的制备 向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水,用接种环或无菌玻璃棒搅动,刮下米黑毛霉孢子,振荡均匀并稀释至16个/mL,得到孢子悬液; (3)麸皮培养基的...

【专利技术属性】
技术研发人员:张卫兵关晓艳艾对元
申请(专利权)人:甘肃农业大学
类型:发明
国别省市:甘肃;62

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