【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种恒河猴外周血单核巨噬细胞培养方法,其特征在于,包括如下步骤:A、分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC);B、培养收集的PBMCs:收集的PBMCs用PBS重悬、洗涤2次,洗过的细胞经离心回收,每次1200 rpm离心8 min,最后用含2%‑4%猴自体血清、1%青链霉素和1‰HEPES的RPMI 1640培养液重悬,重悬的细胞的密度在3×106个细胞/ml,立即加入到CELLBIND Surface的96孔培养板,0.8×106个细胞/孔,或48孔培养板,3×106个细胞/孔中培养,24h后将未贴壁细胞用RPMI 1640培养液洗弃,之后用含2%‑4%猴自体血清的完全培养基继续培养贴壁的细胞,以后每2~3天换一次培养液,7天后观察细胞形态,判定细胞分化结果;C、培养细胞鉴定:包括细胞形态学观察、用流式细胞仪检测细胞表面CD14表达水平、细菌脂多糖刺激后巨噬细胞特异性细胞因子的表达检测。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:桑明,霍文哲,刘金彪,代明,周立,高建峰,杨四军,刘航,
申请(专利权)人:武汉大学,
类型:发明
国别省市:湖北;42
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