【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
可同时鉴别猪繁殖与呼吸综合症病毒的RT‑PCR技术,其特征在于,步骤为:1)用于区分检测猪繁殖与呼吸综合症病毒野毒株与疫苗株的RT‑PCR引物包括正义引物和反义引物,分别为: 名称序列(5’‑3’)正义引物CGACACCATCCGAGCCG反义引物CCTGCACCTGTGTCATCAAGC 2)提取RNA : 用DEPC(0.1%)H2O溶解疫苗毒株干粉,取200µl疫苗,使用RNAiso plus提取RNA,用20µl无RNA酶的DEPC(0.1%)H2O溶解RNA;3)RT‑PCR两步法: 以上一步骤提取的RNA为模板,配制10µl反转录体系进行反转录,10µl反应体系的配制:Random primer终浓度为2µM,20µM Random primer 1µl、10µM dNTPs 0.5µl、5x M‑MLV buffer 2µl、RNase Inhibitor (40U/µl) 0.5µl、 RTase M‑MLV (RNase H‑) 0.5µl、RNA模板5µl、RNase‑free H2O 0.5µL;反转录程序为:30℃ 10 min、42℃ 60min、70 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:王钦富,张雪梅,王美辰,
申请(专利权)人:大连大学,
类型:发明
国别省市:辽宁;21
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