一种桤木的快速繁殖方法技术

本发明专利技术涉及一种桤木的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、无菌苗的获得、丛生芽增殖、生根培养和炼苗移栽。本发明专利技术的桤木组培方法操作简便，增殖系数好，成活率高，遗传性状稳定，可以短期内获得大量的桤木幼苗。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及，包括外植体的消毒、无菌苗的获得、丛生芽增殖、生根培养和炼苗移栽。本专利技术的桤木组培方法操作简便，增殖系数好，成活率高，遗传性状稳定，可以短期内获得大量的桤木幼苗。【专利说明】
本专利技术涉及桤木组织培养的快繁方法，属于植物
。
技术介绍
棺木，又名别名水冬瓜树、水青风、棺蒿，为桦木科，棺 木属植物。落叶乔木，是中国特有种和福建重要的乡土树种之一。属濒危等级国家II级重点 保护野生植物（国务院1999年8月4日批准)。喜光，喜温暖气候，适生于年平均气温15? 18°C,降水量900?1400mm的丘陵及平原、山区。对土壤适应性强，喜水湿，多生于河滩低 湿地。以树皮、嫩枝叶入药。春季采集嫩枝叶，四季采树皮，鲜用或晒干。目前桤木的繁殖 方法基本采用播种育苗，在贵州北部、甘肃南部、陕西西南部，安徽、湖南、湖北、江西、广东、 江苏等地有栽培。组培技术应用于桤木尚未研究，利用组培技术可以缩短培养周期，提高繁 殖率，保持性状的稳定性。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供，由该方法所制备的 桤木组培方法简便，增殖系数好，成活率高，遗传性状稳定，可以短期内获得大量的桤木幼 苗。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的： 取桤木种子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h换一次水，超净工作台 上75%酒精处理30s，氯化汞处理20min，无菌水冲洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培养基中 培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，温度26°C，生长出来的无菌芽苗，放 入增殖培养基 WPM+IAAO. lmg/L+TDZO. 2mg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6g/ L，PH5. 8,光照40001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 2mg/L+半胱氨酸 100mg/L+5mg/LAgN03，将生根后的试管苗在培养室中打开瓶口练苗6d，在0. 1%的多菌灵药 液中浸泡4d，取出幼苗，清洗干净，栽植于珍珠岩：腐殖土 =1 :1的基质中培养，20d后，移栽 入大田培养。 采用本专利技术制备的桤木成活率为94%，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不 局限于下列实施方式。 实施例1 取桤木种子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h换一次水，超净工作台 上75%酒精处理30s，氯化汞处理20min，无菌水冲洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培养基中 培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，温度26°C，生长出来的无菌芽苗，放 入增殖培养基 WPM+IAAO. 05mg/L+TDZ0. lmg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6g/ L，PH5. 8,光照40001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. lmg/L+半胱氨酸 100mg/L+5mg/LAgN03，将生根后的桤木试管苗进行室外炼苗移栽，桤木成活率为90%。 实施例2 取桤木种子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h换一次水，超净工作台 上75%酒精处理30s，氯化汞处理20min，无菌水冲洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培养基中 培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，温度26°C，生长出来的无菌芽苗，放 入增殖培养基 WPM+IAAO. 15mg/L+TDZ0. 3mg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6g/ L，PH5. 8,光照40001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 2mg/L+半胱氨酸 50-100mg/L+5mg/LAgN03，将生根后的桤木试管苗进行室外炼苗移栽，桤木成活率为91%。 实施例3 取桤木种子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h换一次水，超净工作台 上75%酒精处理30s，氯化汞处理20min，无菌水冲洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培养基中 培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，温度26°C，生长出来的无菌芽苗，放 入增殖培养基 WPM+IAAO. lmg/L+TDZO. lmg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6g/ L，PH5. 8,光照40001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. lmg/L+半胱氨酸 50-100mg/L+5mg/LAgN03，将生根后的桤木试管苗进行室外炼苗移栽，桤木成活率为93%。 实施例4 取桤木种子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h换一次水，超净工作台 上75%酒精处理30s，氯化汞处理20min，无菌水冲洗5-7遍，接入MS+GA3lmg/L培养基中培 养，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5. 8,光照30001x，温度26°C，生长出来的无菌芽苗，放入 增殖培养基 WPM+IAAO. lmg/L+TDZO. 3mg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6g/L， PH5. 8,光照40001x ;增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 2mg/L+半胱氨酸 50-100mg/L+5mg/LAgN03，将生根后的桤木试管苗进行室外炼苗移栽，桤木成活率为92%。【权利要求】1. ，包括外植体的消毒、无菌苗的获得、丛生芽增殖、生根培 养和炼苗移栽，其主要步骤如下： (1) 取桤木种子，对其进行灭菌处理； (2) 将步骤（1)灭菌处理过的桤木种子接入MS+GA3lmg/L培养基中培养，附加蔗糖30g/ L，琼脂 6g/L，PH5. 8,光照 30001x，温度 26°C ; (3) 取步骤（2)生长出来的无菌芽苗，放入增殖培养基WPM+IAAO. 05-0. 15mg/ L+TDZ0. 1-0. 3mg/L+0. 35mmol/L 腐胺，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6g/L，PH5. 8,光照 40001x ; (4) 取步骤（3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAA0. 1-0. 2mg/L+半胱氨 酸 100mg/L+5mg/LAgN03; (5) 取步骤（4)生根后的桤木进行炼苗移栽。2. 按照权利要求1所述的，其特征在于：步骤（1)中所述桤 木种子的灭菌处理为，取桤木种子，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，水中浸泡24h，8h换一 次水，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理20min，无菌水冲洗5-7遍。3. 按照权利要求1所述的，其特征在于：步骤（2)无菌苗生 长培养中中附加了 GA3，能促进无菌苗的伸长生长。4. 按照权利要求1所述的，其特征在于：步骤（3)中的增殖 培养基 WPM+IAA0. 05-0. 15mg/L+TDZ0. 1-0. 3mg/L+0. 35mmol/L腐胺中附加了本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种桤木的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、无菌苗的获得、丛生芽增殖、生根培养和炼苗移栽，其主要步骤如下：（1）取桤木种子，对其进行灭菌处理；（2）将步骤（1）灭菌处理过的桤木种子接入MS+GA31mg/L培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5.8，光照3000lx，温度26℃；（3）取步骤（2）生长出来的无菌芽苗，放入增殖培养基WPM+IAA0.05‑0.15mg/L+TDZ0.1‑0.3mg/L+0.35mmol/L腐胺，附加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH5.8，光照4000lx；（4）取步骤（3）增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAA0.1‑0.2mg/L+半胱氨酸100mg/L+5mg/LAgNO3；（5）取步骤（4）生根后的桤木进行炼苗移栽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张金芳，杨存，
申请(专利权)人：南京标科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32