本发明专利技术公开了一种高效快速繁殖碧云茶树试管苗的方法：将碧云茶树当年生半木质化枝条经过消毒，漂洗；剪成带1-2个腋芽的小段接种于固体培养基中培养；待腋芽萌发后将其接种到增殖培养基上进行培养，每过45天转接一次，直到达到需要的种苗量，再将其接种到生根培养基上进行生根培养，50天后，当碧云茶树小苗生长出2-3条根，即可进行驯化移栽。本发明专利技术可直接用于工厂化规模化的种苗生产，具有污染少，增殖速度快，变异率低，种苗整齐健壮，生产成本低，运输方便，移栽成活率高等优势。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种高效快速繁殖碧云茶树试管苗的方法：将碧云茶树当年生半木质化枝条经过消毒，漂洗；剪成带1-2个腋芽的小段接种于固体培养基中培养；待腋芽萌发后将其接种到增殖培养基上进行培养，每过45天转接一次，直到达到需要的种苗量，再将其接种到生根培养基上进行生根培养，50天后，当碧云茶树小苗生长出2-3条根，即可进行驯化移栽。本专利技术可直接用于工厂化规模化的种苗生产，具有污染少，增殖速度快，变异率低，种苗整齐健壮，生产成本低，运输方便，移栽成活率高等优势。【专利说明】
本方专利技术属于植物栽培
，具体涉及。
技术介绍
碧云茶树，无性系茶树品种，具有产量高，抗逆性强等优点。其制作的茶叶外形细 紧，色泽翠绿，香气高爽纯正，滋味鲜醇，且富含氨基酸、茶多酚、儿茶素、咖啡碱等物质，是 一种具有重要经济价值的茶叶品种。随着绿茶产业的发展，碧云茶树种植规模不断扩大，对 优良茶树种苗的需求也不断攀升，传统的扦插繁殖法已经不能满足市场的的需求。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题，是提供。 -种繁殖碧云茶树试管苗的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： (1)剪取碧云茶树的枝条，去除叶片后将其剪成10cm长的小段，用洗衣粉清洗 lOmin,再用流水冲洗lOmin,用乙醇水溶液浸泡，再放置于氯化萊水溶液中浸泡7min ; (2)将步骤（1)得到的碧云茶树的无菌技条剪成带1-2个腋芽的小段，接种于固体 培养基中培养，待腋芽萌发后，取腋芽备用；其中，所述的固体培养基组成为：萘乙酸0.5? lmg/L、蔗糖 25 ?30g/L、MS 培养基、琼脂 4. 5 ?6g/L、pH 5. 6 ?5. 8 ; (3)将步骤（2)得到的腋芽置于增殖继代培养基中培养得到丛生的碧云茶树小 苗；其中，继代增殖培养基组成为：萘乙酸0.4?1.2mg/L、6-苄氨基嘌呤2-3mg/L、蔗糖 25 ?30g/L、MS 培养基、琼脂 4. 5 ?6g/L、pH 5. 6 ?5. 8 ; (4)将步骤（3)中得到的丛生的碧云茶树小苗在超净工作台上切割分离成单株， 转移到壮苗生根培养基中培养，碧云茶树苗长成4-5cm高、有2-3条根的成苗；其中，壮苗生 根培养基组成为：萘乙酸〇· 2?0· 5mg/L、蔗糖25?30g/L、l/3MS培养基、琼脂4. 5?6g/ L、pH 5. 6 ?5. 8 ; (5)将步骤（4)得到的成苗从瓶内取出用清水冲洗去除培养基后，移置铺有营养 土的苗床上，并遮阴保湿，待小苗长到l〇cm高时，进行大田移栽。 其中，步骤（1)所述的枝条为当年生半木质化枝条。 其中，步骤（1)所述乙醇水溶，乙醇的体积百分含量为75%，乙醇水溶液浸泡时间 为45?60s。 其中，步骤⑴所述的氯化汞水溶液中，氯化汞的质量百分含量为0.1 %? 0. 15%，氯化汞水溶液浸泡时间为7min。 其中，步骤⑵的培养条件为：温度22?25°C，光照度300?1000勒克斯，光照 时间11?13h/d条件下，培养40?50d。 其中，步骤⑵所述的固体培养基组成为：萘乙酸0. 5mg/L、蔗糖30g/L、MS培养 基、琼脂 6g/L、pH 5. 8。 其中，步骤（3)的培养条件为：温度25?28°C，光照度1000?2000勒克斯，光照 时间11?13h/d，培养45天。 其中，步骤（3)所述的继代增殖培养基组成为：萘乙酸0.8mg/L、6_苄氨基嘌呤 2. 5mg/L、蔗糖 30g/L、MS 培养基、琼脂 6g/L、pH 5. 8。 其中，步骤（4)的培养条件为：温度25?28°C，光照度1000?2000勒克斯，光照 时间11?13h/d，培养50天。 其中，其特征在于，步骤（4)中，所述的壮苗生根培养基组成为：萘乙酸0.2mg/L、 蔗糖 30g/L、l/3MS 培养基、琼脂 6g/L、pH 5. 8。 有益效果：本专利技术与现有技术相比，具有如下优点： 1、碧云茶树的枝条消毒后，剪成带1-2个腋芽的小段接种到步骤（2)中的固体培 养基中，采用MS并配以适当的激素，与现有的茶树腋芽萌发培养基相比，该方法腋芽萌发 并长到l-2cm的时间缩短10?15d，并且萌芽率高达80%以上，变异率小于1 %，出芽整齐。 2、继代增殖培养基采用MS并配以适当生长素和细胞分裂素，与传统的继代增殖 培养基相比，该方法能更好更快的促进小苗的分枝，增殖系数可达到2-3。 【具体实施方式】 根据下述实施例，可以更好地理解本专利技术。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的内容仅用于说明本专利技术，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本 专利技术。 实施例1 : -种高效快速繁殖碧云茶树试管苗的方法，该方法包括以下步骤： (1)剪取碧云茶树的枝条，去除叶片，剪成10cm长的小段，用洗衣粉清洗lOmin，再 用流水冲洗lOmin，将清洗干净的枝条带入超净工作台，用75%酒精浸泡45?60s，再放置 于氯化萊水溶液中浸泡8-10min ; (2)将步骤（1)得到的碧云茶树的无菌技条剪成带1-2个腋芽的小段接种于固体 培养基中，在25?28°C、光照度1000?2000勒克斯、光照时间11?13h/d的条件下，培 养40?50d，腋芽萌发，当芽长至l-2cm时，取腋芽备用；其中，所述的固体培养基组成为 ： 萘乙酸0· 5mg/L，鹿糖30g/L，MS培养基，琼脂6g/L，pH 5. 8 ; (3)将步骤（2)得到的腋芽置于增殖继代培养基中，在25?28°C、光照度1000? 2000勒克斯、光照时间11?13h/d的条件下培养45天，碧云茶树分枝增殖，增殖系数达 2-3 ;其中，所述的继代增殖培养基组成为：萘乙酸0. 8mg/L，6-苄氨基嘌呤2. 5mg/L，蔗糖 30g/L，MS 培养基，琼脂 6g/L，pH 5. 8 ; (4)将步骤（3)中得到的丛生的碧云茶树小苗在超净工作台上切割分离成单株， 转移到壮苗生根培养基中，在25?28°C、光照度1000?2000勒克斯、光照时间11?13h/ d的条件下培养50天，碧云茶树苗长成4-5cm高，有2-3条根的成苗，其中，所述的壮苗生根 培养基组成为：萘乙酸〇· 2mg/L，蔗糖30g/L，1/3MS培养基，琼脂6g/L，pH 5. 8 ; (5)将步骤（4)得到的成苗从瓶内取出用清水冲洗去除培养基后，移置铺有营养 土的苗床上，并遮阴保湿，待小苗长到l〇cm高时，即可进行大田移栽。 碧云茶树顶端嫩梢经消毒后，接种到步骤（2)中的固体培养基中，采用MS并配以 适当的激素，与现有的腋芽萌发培养基相比，该方法腋芽萌发时间缩短7?10d，并且萌发 率高达80%以上，出芽整齐且较为健壮，继续培养到40-50天时，腋芽可以长到l-2cm，比以 前的配方高约0.5cm。步骤（3)的继代增殖培养基中，采用MS并配以适当的生长素和细胞 分裂素，与传统的继代增殖培养基相比，虽然该方法没能提高增殖系数，但可以使缩短分蘖 增殖的时间，使增殖小苗更加整齐，培养45天的，增殖小苗达到2-3c本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种繁殖碧云茶树试管苗的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)剪取碧云茶树的枝条，去除叶片后将其剪成10cm长的小段，用洗衣粉清洗10min，再用流水冲洗10min，用乙醇水溶液浸泡，再放置于氯化汞水溶液中浸泡；(2)将步骤(1)得到的碧云茶树的无菌技条剪成带1‑2个腋芽的小段，接种于固体培养基中培养，待腋芽萌发后，取腋芽备用；其中，所述的固体培养基组成为：萘乙酸0.5～1mg/L、蔗糖25～30g/L、MS培养基、琼脂4.5～6g/L、pH 5.6～5.8；(3)将步骤(2)得到的腋芽置于增殖继代培养基中培养得到丛生的碧云茶树小苗；其中，继代增殖培养基组成为：萘乙酸0.4～1.2mg/L、6‑苄氨基嘌呤1.5～3mg/L、蔗糖25～30g/L、MS培养基、琼脂4.5～6g/L、pH 5.6～5.8；(4)将步骤(3)中得到的丛生的碧云茶树小苗在超净工作台上切割分离成单株，转移到壮苗生根培养基中培养，碧云茶树苗长成4‑5cm高、有2‑3条根的成苗；其中，壮苗生根培养基组成为：萘乙酸0.2～0.5mg/L、蔗糖25～30g/L、1/3MS培养基、琼脂4.5～6g/L、pH 5.6～5.8；(5)将步骤(4)得到的成苗从瓶内取出用清水冲洗去除培养基后，移置铺有营养土的苗床上，并遮阴保湿，待小苗长到10cm高时，进行大田移栽。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：史俊，徐晓燕，徐超，席刚俊，杨鹤同，
申请(专利权)人：江苏农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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