一种同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法，包括如下步骤：(1)样品的前处理：包括样品提取、净化及浓缩；(2)将经过前处理的样品采用超高效液相色谱-质谱/质谱法进行分析测定，所述方法同时测定15种禁用雄激素，分别为：肾上腺甾酮、群勃龙、勃地酮、氟甲睾酮、氧甲氢龙、雄烯二酮、诺龙、去氢甲睾酮、睾酮、去氢表雄酮、氯司替勃、雄诺龙、美雄诺龙、醋酸氯睾酮和丙酸睾丸素。本发明专利技术所述同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法准确、快速、灵敏，本发明专利技术建立的方法可以为化妆品的检验工作和日常生产的质量控制提供有效的科学依据及技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，特别是涉及一种用于同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法。
技术介绍
近年来，随着国民经济的高速发展和人们生活水平的不断提高，我国已成为世界化妆品消费大国，广大消费者的消费理念更加理性，不仅仅单纯追求化妆品品牌效应，而且更多关注化妆品自身的安全性。雄激素属类固醇类激素，可直接作用于皮肤，短期内可以促进皮肤恢复弹性，减少皱纹，治疗粉刺，促进毛发生长等，但如果长期使用将导致色素沉积，皮肤萎缩变薄等副作用。我国化妆品卫生标准、化妆品卫生规范、欧盟化妆品法规均明确规定，雄激素为化妆品组分中禁用物质。因此，为避免消费者在不知情的情况下接触使用违规添加雄激素的化妆品，造成健康安全危害，开展化妆品中禁用雄激素的检验对于提高化妆品产品质量，确保化妆品的使用安全具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种准确、快速、灵敏的同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法。 一种同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法，包括如下步骤： (1)样品的前处理：包括样品提取、净化及浓缩； (2)将经过前处理的样品采用超高效液相色谱-质谱/质谱法进行上机测定，其中， 色谱分离条件如下： 色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1mm×50mm,1.7μm)； 流动相：A：含0.1％甲酸的甲醇溶液，B：0.1％甲酸水溶液(体积分数)；采用梯度洗脱程序； 柱温：30℃； 流速：0.3mL/min； 进样量：5μL。 质谱分析条件如下： 离子化方式：ESI+； 毛细管电压：+3.5kV； 脱溶剂气温度：500℃； 脱溶剂气流速：1000L/h； 锥孔气体流速：50L/h； 离子源温度：150℃； 萃取电压：+3.00V； 射频透镜电压：+0.10V； 碰撞气体：氩气； 数据采集模式：多反应监测(MRM)。 所述方法同时测定15种禁用雄激素，分别为：肾上腺甾酮、群勃龙、勃地酮、氟甲睾酮、氧甲氢龙、雄烯二酮、诺龙、去氢甲睾酮、睾酮、去氢表雄酮、氯司替勃、雄诺龙、美雄诺龙、醋酸氯睾酮和丙酸睾丸素。 本专利技术所述的同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法，其中所述梯度洗脱程序的设置如表1所示：其中，百分数是体积百分数； 表1梯度洗脱程序 本专利技术所述的同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法，其中所述15种雄激素的质谱分析相关参数如表2所示： 表2  15种禁用雄激素的质谱分析参数 注：*为定量离子 本专利技术所述的同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法，其中样品的前处理具体包括如下步骤： 准确称取化妆品试样1.0g，精确至0.001g，于10mL比色管中，加入10mL甲醇，涡旋振荡30s，然后在超声波清洗仪中超声提取20min，将提取液转移至离心管中，以10000r/min离心10min后，取上清液用于固相萃取，Oasis HLB固相萃取柱依次用5mL甲醇活化、5mL水平衡后，将试样溶液过柱，先用5mL50％甲醇水溶液淋洗，再用5mL含0.1％甲酸的乙腈溶液进行洗脱，收集洗脱液于带刻度氮吹管中，缓慢氮气流吹扫浓缩至近干，最后用1mL初始流动相，即体积比为60:40的0.1％甲酸的甲醇溶液和0.1％甲酸水溶液的混合溶液，溶解残渣，过0.22μm微孔滤膜后供测定。 本专利技术同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法与现有技术不同之处在于： 本专利技术采用新的超高效液相色谱-质谱/质谱法同时测定化妆品中15种禁用雄激素，与现有技术中的仅检测极少数量的雄激素方法有较大区别，可以实现化妆品中禁用雄激素的系统、广谱、高灵敏、高通量的普查。如果要检测15种禁用雄激素，在保证检测到每一种雄激素的基础上，还要考虑如何设置各种参数使每个激素的检测效果达到最好，要考虑的问题更多，更复杂，这是现有技术不能解决的问题。本专利技术测定化妆品中15种禁用雄激素的方法准确、快速、灵敏，本专利技术建立的方法可以为化妆品的检验工作和日常生产的质量控制提供有效的科学依据及技术支持。 本专利技术同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法中，采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱对15种禁用雄激素的信号响应强度高，分离度好；15种禁用雄激素在流动相体系中的色谱峰形及对称性最佳；试验证明，雄激素类化合物信号的响应值和分离度在色谱柱柱温为30℃及流速为0.3mL/min时获得了最好的测试结果。 下面结合附图对本专利技术的测定化妆品中15种雄激素的方法作进一步说明。 附图说明 图1为本专利技术方法中15种禁用雄激素类化合物的超高效液相色谱-质谱/质谱分析图谱； 图2为本专利技术实施例中不同提取溶剂的提取效果比较图； 图3为本专利技术实施例中不同固相萃取柱的净化比较图； 图4为本专利技术实施例中不同洗脱溶剂回收率的比较图。 本专利技术附图中，各个编号与雄激素的对应关系如下：1.肾上腺甾酮；2.群勃龙；3.勃地酮；4.氟甲睾酮；5.氧甲氢龙；6.雄烯二酮；7.诺龙；8.去氢甲睾酮；9.睾酮；10.去氢表雄酮；11.氯司替勃；12.雄诺龙；13.美雄诺龙；14.醋酸氯睾酮；15.丙酸睾丸素。 具体实施方式 实施例 一、仪器、试剂与材料 ACQUITY超高效液相色谱仪、Waters XEVO TQ三重四极杆质谱仪、MassLynx数据处理系统(美国Waters公司)；Milli-Q超纯水器(美国Millipore公司)；CR 21G型高速冷冻离心机(日本Hitachi公司)；KQ-600超声波清洗器(江苏省昆山市超声仪器有限公司)；MS2型涡旋振荡器(德国IKA公司)；AB204-S型电子天平(美国METTLER TOLEDO公司)；N-EVP 112型氮吹仪(美国Organomation Associates Inc)；0.22μm微孔滤膜本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法，其特征在于：包括如下步骤： (1)样品的前处理：包括样品提取、净化及浓缩； (2)将经过前处理的样品采用超高效液相色谱‑质谱/质谱法进行分析测定，其中， 色谱分离条件如下： 色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18，2.1mm×50mm,1.7μm； 流动相：A：含0.1％甲酸的甲醇溶液，B：0.1％甲酸水溶液，百分数为体积百分数；采用梯度洗脱程序； 柱温：30℃； 流速：0.3mL/min； 进样量：5μL； 质谱分析条件如下： 离子化方式：ESI+； 毛细管电压：+3.5kV； 脱溶剂气温度：500℃； 脱溶剂气流速：1000L/h； 锥孔气体流速：50L/h； 离子源温度：150℃； 萃取电压：+3.00V； 射频透镜电压：+0.10V； 碰撞气体：氩气； 数据采集模式：多反应监测MRM。

【技术特征摘要】
1.一种同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法，其特征在于：包括如下步骤： 
(1)样品的前处理：包括样品提取、净化及浓缩； 
(2)将经过前处理的样品采用超高效液相色谱-质谱/质谱法进行分析测定，其中， 
色谱分离条件如下： 
色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18，2.1mm×50mm,1.7μm； 
流动相：A：含0.1％甲酸的甲醇溶液，B：0.1％甲酸水溶液，百分数为体积百分数；采用梯度洗脱程序； 
柱温：30℃； 
流速：0.3mL/min； 
进样量：5μL； 
质谱分析条件如下： 
离子化方式：ESI+； 
毛细管电压：+3.5kV； 
脱溶剂气温度：500℃； 
脱溶剂气流速：1000L/h； 
锥孔气体流速：50L/h； 
离子源温度：150℃； 
萃取电压：+3.00V； 
射频透镜电压：+0.10V； 
碰撞气体：氩气； 
数据采集模式：多反应监测MRM。 
2.根据权利要求1所述的同时测定化妆品中15种禁用雄激素的方法，其特征在于：所述方法同时测定15种禁用雄激素，分别为：肾上腺甾酮、群勃龙、勃地酮、氟甲睾酮、氧甲氢龙、雄烯二酮、诺龙、去氢甲睾...

【专利技术属性】
技术研发人员：马强，李晶瑞，白桦，孟宪双，张庆，马会娟，陈云霞，王元成，
申请(专利权)人：中国检验检疫科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11