当前位置: 首页 > 专利查询>贵州大学专利>正文

含MyoDI基因启动子片段的重组质粒的构建方法技术

技术编号:10601640 阅读:227 留言:0更新日期:2014-11-05 14:23
本发明专利技术公开了一种含MyoDI基因启动子片段的重组质粒的构建方法,本发明专利技术采用4对5'端加磷的引物扩增不同长度的MyoDI基因启动子片段,与用高保真DNA聚合酶扩增出的不含启动子区的pEGFP-N3载体片段进行平末端连接,构建重组质粒。这种方法简便精确获得重组载体,与双酶切的方法比较具有不受酶切位点限制的优势,同时也不引入新的酶切位点,使实验结果更加符合单一变量的要求,实验结果更加可信。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种含MyoDI基因启动子片段的重组质粒的构建方法,其特征在于:包括以下步骤:1)从牛的血液中提取总DNA,经过PCR扩增得到的不同长度的MyoDI基因启动子片段;2)将质粒pEGFP‑N3经过PCR扩增后,获得不含启动子区的pEGFP‑N3载体片段;3)将不含启动子区的pEGFP‑N3载体片段与不同长度的MyoDI基因启动子片段进行平末端连接;4)将连接产物转化到E.coli DH5α细胞,筛选出阳性克隆子,经测序验证获得重组载体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:许厚强桓聪聪陈伟赵佳福张雯周迪
申请(专利权)人:贵州大学
类型:发明
国别省市:贵州;52

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1