一种快速、灵敏的检测血液中芬太尼的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速、灵敏的检测血液中芬太尼的方法。本方法以离子迁移谱技术为基本检测技术，采用正离子高压模式，利用离子迁移谱作为检测手段，联合简单的溶剂提取前处理方法，方法简便、快速、高效、可靠性好。单个样品检测分析时间小于30S。样品前处理时间小于5min，灵敏度高。测量检测限可以达到1ng/mL；所建立方法定量分析浓度范围包含人体给药浓度范围（10-100ng/mL）。本发明专利技术中的检测方法可广泛用于临床给药深度分析，指导临床医生精准用药。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了。本方法以离子迁移谱技术为基本检测技术，采用正离子高压模式，利用离子迁移谱作为检测手段，联合简单的溶剂提取前处理方法，方法简便、快速、高效、可靠性好。单个样品检测分析时间小于30S。样品前处理时间小于5min，灵敏度高。测量检测限可以达到1ng/mL；所建立方法定量分析浓度范围包含人体给药浓度范围（10-100ng/mL）。本专利技术中的检测方法可广泛用于临床给药深度分析，指导临床医生精准用药。【专利说明】
本专利技术公开了一种用于血液中芬太尼的检测方法，以离子迁移谱技术为基本检测 技术，采用正离子模式，建立离子迁移谱快速检测血液中芬太尼的定性和定量分析方法。本 测量方法简便、快速、高效、可靠性好，可广泛用于医学临床芬太尼给药浓度分析，指导医生 临床用药。
技术介绍
血液是流动在心脏和血管内的不透明红色液体，主要成分为血浆、血细胞。属于结 缔组织，即生命系统中的结构层次。血液中含有各种营养成分，如无机盐、氧、以及细胞代谢 产物、激素、酶和抗体等，有营养组织、调节器官活动和防御有害物质的作用。血液中注入麻 醉剂是临床常用手段，临床使用中血药浓度的快速、灵敏检测已经是亟待解决问题。 枸橼酸芬太尼，化学名为N_-N-苯基-丙酰胺枸橼酸 盐，分子式为C22H28N 2(I ·?：6Η807，分子量528. 60。枸橼酸芬太尼用于麻醉前、中、后的镇静与镇 痛，是目前复合全麻中常用的药物。药理本品为人工合成的强效麻醉性镇痛药。镇痛作用 机制与吗啡相似，为阿片受体激动剂，作用强度为吗啡的60-80倍。瑞芬太尼，商品名瑞捷， 主要成份为盐酸瑞芬太尼。本品为白色或类白色冻干疏松块状物，有效期暂定24月。用于 全麻诱导和全麻中维持镇痛。舒芬太尼为芬太尼的衍生物，药用其枸橼酸盐。主要作用于 μ阿片受体。阿芬太尼为芬太尼的衍生物，药用其盐酸盐。阿芬太尼的亲脂性较芬太尼低， 与血浆蛋白结合率却较高，分布容积小，符合三室模型，经肝脏代谢失活后经尿排出。 随着芬太尼在我国市场应用的日趋广泛，由芬太尼引发的中毒事件及案件有增 无减。国内外关于血浆中芬太尼的检测已做了大量的工作和努力，随着高科技分析仪器的 不断应用和计算机技术的发展，国外已经能够检测纳克级以下的血浆芬太尼。但迄今为 止，国内外文献对血浆中芬太尼的检测分析多应用于药物动力学、毒理等临床研究。根据 我国公安司法工作的要求，建立一套符合我国仪器、设备、技术实际的血浆中芬太尼的检 测方法，对芬太尼中毒事件和案件提供的检材进行分析鉴定，能够判明是否存在芬太尼及 其与事件的关系，为澄清当事人在事件中是否负有法律责任提供依据，为相关案件提供侦 破线索和犯罪证据，或者为司法调节提供科学依据。 目前分析技术高效液相色谱法(含紫外法)、气相色谱/质谱联用（GC/MS)、液相色 谱-质谱联用方法测定枸橼酸芬太尼麻醉药，前处理分析条件要求严格且耗时。免疫分析 法测芬太尼麻醉药具有灵敏度高、选择性强、操作简便、检测省时及耗材少等优点。但应用 免疫分析法检测血浆芬太尼需要的专用试剂具有一定的时效性，而且实验重复性、选择性 较差，检测结果大多需要验证，使该法的推广、运用受到一定的限制。 离子迁移谱（Ion Mobility Spectrometry, IMS)技术是20世纪70年代出现的 一种快速分离检测技术，与传统的质谱、色谱仪器相比，具有结构简单，灵敏度高，分析速度 快，结果可靠的特点。能够在大气环境中对微量物质进行检测，适于现场使用。目前我们 研究的MS已经广泛应用在化学战剂、毒品、爆炸物探测、环境监测、有毒气体监测、火灾监 测、水污染监测和食品检测等领域。通过迁移时间就可确定分析目标物质的存在，而应用峰 面积或峰高可确定相应物质的浓度。
技术实现思路
-种用于检测血液中芬太尼的方法，以离子迁移谱技术为基本检测技术，采用正 离子模式，将含有不同浓度芬太尼的血液样品，经过简单的样品前处理，通过进样薄片直接 送入到离子迁移谱热解析进样器内进行热解析，由载气携带目标样品进入离子迁移管进行 分析获得检测信号。 所述的离子迁移谱为传统的均匀场离子迁移谱，主要包括进样装置、电离源、反应 区、离子门、迁移区、信号接收与检测系统和气路干燥系统，其特征在于：所述的进样装置由 进样口及设置于进样口外侧的载气输送管路构成，在进样口外连接有热解析进样器，热解 析温度在100-200°C之间，所述的进样薄片进样时置于进样口中。 -种快速、灵敏的检测血液中芬太尼的方法，具体检测步骤如下： 1)取50mg/L芬太尼原液做标准品，取1-10 μ L标准品滴在进样薄片上，利用离子 迁移谱检测仪，采用正离子高压模式进行检测分析，测量离子到达离子迁移谱检测器的时 间和检测信号峰强度； 2)溶剂提取：将l-5mL待测血液样品溶解于有机溶剂中，超声l-3min，离心 l-3min，取上层清液供检测用； 3)抽取10-100 μ L的上述上清液，滴在进样薄片上，利用离子迁移谱检测仪，采用 正离子高压模式，测量离子到达离子迁移谱检测器的迁移时间和检测信号峰强度； 4)根据步骤1)中芬太尼标准所获得的信号峰迁移时间确定血液中芬太尼的检测 信号，同时记录检测信号峰强度，进一步确定血液中芬太尼的含量。 所述的有机溶剂是为了能够更好的溶解芬太尼，同时尽量不提取血液中复杂成分 的有机物1-氯丁烷、二氯甲烷、环己烷、异丙醇、甲基叔丁基醚、丙醇、丁醇、甲苯、正庚烷中 的一种或二种以上溶剂混合。 步聚2)中血液样品与有机溶剂的用量体积比例为2:1-1:10。 所述进样薄片材料可以是金属栅网、四氟板、聚四氟乙烯高温布、不锈钢片、石墨 片或石英片； 进样薄片厚度小于热解析进样器进样口高度（3mm);取样处是以0. 5-1. 2cm为半 径、深度为〇. 5-3mm的凹槽；此凹槽底部为粗糙的表面或是在凹槽处填充一次性网状结构 小片(聚四氟乙烯或铁、铝金属材料)，使样品平铺于取样处表面，增大与载气接触面积，更 有利于载气热吹扫； 所述试验中热解析进样器为步进电机热解析进样器、电磁阀热解析进样器或卤素 灯热解析进样器。 所述离子迁移谱仪实验中使用的载气和漂气气源可以是空气、氮气、氧气或惰性 气体中的一种或几种混合气源；气源供气方式可以是抽气泵自供气、气瓶供气、气体发生器 产生的外供气体或是其他外源气体；气源气体需要经过活化处理的硅胶、分子筛和活性炭 过滤，除去水、有机物和灰尘；气源条件固定，可以保证离子迁移谱背景信号稳定。 专利技术中的芬太尼包括枸橼酸芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼、阿芬太尼类。 离子迁移谱的工作站分析软件中可以手动设置"终端模式数据采集累加谱图数" 和"终端下曲线数"，同时点击"累加谱图"功能；可以实现多张谱图连续采集、信号加和，提 高检测灵敏度。 目前，医学上麻醉问题已然成为中国人心中挥之不去的梦魇。这种检测方法的成 功开发，将把离子迁移谱引向医学界，同时弥补我国医学界麻醉剂检测方面的落后和差距。 本专利技术的优点如下： 1.与传统的气相色谱、质谱方法相比，将离子迁移谱作为分析血液中芬太尼的手 段具有以下优本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速、灵敏的检测血液中芬太尼的方法，其特征在于：1）取50mg/L芬太尼原液做标准品，取1‑10μL标准品滴在进样薄片上，利用离子迁移谱检测仪，采用正离子高压模式进行检测分析，测量离子到达离子迁移谱检测器的时间和检测信号峰强度；2）溶剂提取：将1‑5mL待测血液样品溶解于有机溶剂中，超声1‑3min，离心1‑3min，取上层清液供检测用；3）抽取10‑100μL的上述上清液，滴在进样薄片上，利用离子迁移谱检测仪，采用正离子高压模式，测量离子到达离子迁移谱检测器的迁移时间和检测信号峰强度；4)根据步骤1）中芬太尼标准所获得的信号峰迁移时间确定血液中芬太尼的检测信号，同时记录检测信号峰强度，进一步确定血液中芬太尼的含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王新，李海洋，鞠帮玉，李杭，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21