一种铁皮石斛试管苗生根培养基及其配制方法技术

技术编号:10548485 阅读:393 留言:0更新日期:2014-10-16 15:42
本发明专利技术公开了一种铁皮石斛试管苗生根培养基及其配制方法。所述生根培养基配方为:基本培养基+0.1-0.5mg/LNAA+0.4-1.0g/L活性炭+100g/L香蕉泥+50g/L土豆泥+20g/L白砂糖+5g/L琼脂粉。所述生根培养基的配制方法为:配制基本培养基,按生根培养基配方称取各组分;将称取的香蕉、土豆制备成糊状,然后加入水煮沸,冷却至室温;将配制好的基本培养基和称取的NAA、活性炭、白砂糖、琼脂粉各组分混合;将前述制备得到的各组分混合、定容,调节pH值至5.9-6.0,灭菌,冷却凝固,制得所述生根培养基。按上述组成成分及配制方法制备的生根培养基,培养的铁皮石斛生根苗质量更稳定,可使生根培养周期缩短至1.5-2个月,组培室的周转效率提高30%以上。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了。所述生根培养基配方为:基本培养基+0.1-0.5mg/LNAA+0.4-1.0g/L活性炭+100g/L香蕉泥+50g/L土豆泥+20g/L白砂糖+5g/L琼脂粉。所述生根培养基的配制方法为:配制基本培养基,按生根培养基配方称取各组分;将称取的香蕉、土豆制备成糊状,然后加入水煮沸,冷却至室温;将配制好的基本培养基和称取的NAA、活性炭、白砂糖、琼脂粉各组分混合;将前述制备得到的各组分混合、定容,调节pH值至5.9-6.0,灭菌,冷却凝固,制得所述生根培养基。按上述组成成分及配制方法制备的生根培养基,培养的铁皮石斛生根苗质量更稳定,可使生根培养周期缩短至1.5-2个月,组培室的周转效率提高30%以上。【专利说明】
本专利技术涉及植物组织培养领域,具体涉及一种铁皮石斛试管苗的生根培养基及其 配制方法。
技术介绍
铁皮石斛为兰科多年生附生草本植物,是石斛属药用植物中最为珍稀名贵的一 种。铁皮石斛被列为"中华九大仙草之首",具有独特的药用价值,其茎、花都可入药,具有益 胃生津,滋阴清热的作用。现代医学证明,铁皮石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力 的作用。铁皮石斛因表皮呈铁绿色而得名,中国铁皮石斛主要分布于云南、浙江广西、四川 贵州等地。 近年来,越来越多的研究机构或企业进行铁皮石斛的人工繁殖,尤其是利用组培 技术进行试管苗的繁殖,相关的生产技术已日趋成熟,但是仍存在组织培养周期长的问题。 无论是试管苗的增殖培养还是生根培养,培养周期均为3个月左右。试管苗培养周期长造 成组培室周转率低、试管苗的污染率升高。
技术实现思路
针对现有技术的不足,本专利技术旨在提供一种铁皮石斛试管苗生根培养基及其配制 方法,确保培养的铁皮石斛生根苗质量更稳定,使生根培养周期缩短,组培室的周转效率提 商。 为解决上述技术问题,本专利技术提供如下技术方案: -种铁皮石斛试管苗生根培养基,该生根培养基的配方为:基本培养基 +0· 1-0. 5mg/LNAA+0. 4-1. Og/L 活性炭 +100g/L 香蕉泥 +50g/L 土豆泥 +20g/L 白砂糖 +5g/L 琼脂粉;上述各组分严格按照制备工艺制成。 其中,所述基本培养基的配方为: 大量元素:硝酸钾2200-2700 mg/L、硝酸铵500-600mg/L、七水硫酸镁150-200mg/ L、磷酸二氢钾 300-400 mg/L、二水氯化钙 150-200mg/L ; 微量元素:一水硫酸锰15-20mg/L、七水硫酸锌70-100mg/L、碘化钾(λ 8-L Omg/L、 六水氯化钴〇· 02-0. 03mg/L ; 有机物:肌醇100mg/L、维生素 BIO. lmg/L、维生素 B60. lmg/L、甘氨酸3mg/L ; 铁盐:七水硫酸亚铁27. 8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37. 3mg/L。 本专利技术还提供一种铁皮石斛试管苗生根培养基的配制方法,包括如下步骤: (1)配制基本培养基,按照权利要求1所述的质量配比称取香蕉、土豆、NAA、活性 炭、白砂糖、琼脂粉; (2)将前述称取的香蕉、土豆去皮后制备成糊状,然后加入水煮沸,冷却至室温; (3)将前述配制好的基本培养基和称取的NAA、活性炭、白砂糖、琼脂粉各组分混 合; (4)将前述(1)和(2)制备得到的各组分混合、定容,调节pH值至5. 9-6.0,灭菌, 冷却凝固,制得所述生根培养基。 优选地,前述步骤(4)中的灭菌条件为:温度121°C、压力0. IMPa条件下灭菌 18min〇 与现有技术相比,本专利技术的有益效果如下: 1、利用本专利技术配制的生根培养基,生根培养时间仅1.5-2个月,组培室的周转效 率提高30%以上。 2、本专利技术配制的生根培养基pH值较为稳定,因此培养的铁皮石斛生根苗质量更 稳定。本专利技术中,将香蕉泥和土豆泥的混合物加热煮沸冷却后,再和培养基其他组分混合定 容后,最后测定pH值。培养基灭菌后的pH变化较小,培养基稳定培养的试管苗质量更稳定。 【具体实施方式】 以下通过具体实施例来说明本专利技术的技术方案。本专利技术中所用的原料和试剂均市 售可得。下面结合实施例对铁皮石斛试管苗生根培养基的配制进行详细说明。 以制备40升生根培养基为例,其制备过程如下: (1)香蕉、土豆去皮,分别称取香蕉4000克、土豆2000克,将香蕉、土豆切成小块, 用搅拌机制成糊状后加7-8升水加热,加热过程中,不断搅拌防止粘锅,直至煮沸,然后冷 却至室温。 (2)准备一个体积为10升左右的容器,在容器中加入5-6升纯水,分别量取 2000ml大量元素20倍母液、40ml微量元素1000倍母液、200ml铁盐200倍母液、40ml有机 物1000倍母液(以上均为优化配方的母液)、40mlNAA0. 5mg/ml母液,倒入容器中;称取40 克活性炭、800克白砂糖、200克琼脂粉,分别倒入容器中并搅拌均匀。 (3)将前述制备好的(1)和(2)各组分倒入50L的容器中混合、搅拌,定容至40L, 调节pH值至6. 0,然后进行分装,每瓶灌装量为60ml左右。最后在高温121 °C,高压0. IMPa 灭菌18分钟,培养基冷却凝固后使用。 利用上述配制的生根培养基进行铁皮石斛试管苗培养,在1. 5-2个月的培养周期 内试管苗根系数量4-5根,根到3cm以上,试管苗株高5cm以上。使得组培室的周转效率提 高30%以上。 常规的铁皮石斛培养基配制步骤是:将包括香蕉、土豆在内的所有组分混合、定容 后,调节pH值,再加热、灭菌,这会造成培养基pH值因上述原因在灭菌后发生较大变化,因 此试管苗质量因培养基pH值的差异而不稳定。 由于培养基中的香蕉泥和土豆泥是天然的添加物,所用香蕉和土豆产地或成熟度 的不同,使两种添加物在加热后的酸碱度发生不同的变化,致使经过灭菌后,培养基的pH 值发生较大改变。 本专利技术中,则是将香蕉泥和土豆泥的混合物加热煮沸冷却后,和培养基其他组分 混合定容,然后再测定pH值。因此,培养基灭菌后的pH值变化很小,从而使得培养的试管 苗质量稳定。 上述本专利技术的实施例,并不用于限制本专利技术。对于本领域技术人员来说,本专利技术的 培养基配制方法可以有变化。凡在本专利技术的精神和原则内,所作的等同替换、改进等,均应【权利要求】1. 一种铁皮石斛试管苗生根培养基,其特征在于:所述生根培养基的配方为:基本培 养基 +0· 1-0. 5mg/LNAA+0. 4-L Og/L 活性炭 +100g/L 香蕉泥 +50g/L 土豆泥 +20g/L 白砂糖 +5g/L琼脂粉; 所述基本培养基的配方为: 大量元素:硝酸钾2200-2700 mg/L、硝酸铵500-600mg/L、七水硫酸镁150-200mg/L、磷 酸二氢钾 300-400 mg/L、二水氯化钙 150-200mg/L ; 微量元素:一水硫酸锰15_20mg/L、七水硫酸锌70-100mg/L、碘化钾0· 8-1. Omg/L、六水 氯化钴 〇· 02-0. 03mg/L ; 有机物:肌醇 80-100mg/L、维生素 Β1本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种铁皮石斛试管苗生根培养基,其特征在于:所述生根培养基的配方为:基本培养基+0.1‑0.5mg/LNAA+0.4‑1.0g/L活性炭+100g/L香蕉泥+50g/L土豆泥+20g/L白砂糖+5g/L琼脂粉;所述基本培养基的配方为:大量元素:硝酸钾2200‑2700 mg/L、硝酸铵500‑600mg/L、七水硫酸镁150‑200mg/L、磷酸二氢钾300‑400 mg/L、二水氯化钙150‑200mg/L;微量元素:一水硫酸锰15‑20mg/L、七水硫酸锌70‑100mg/L、碘化钾0.8‑1.0mg/L、六水氯化钴0.02‑0.03mg/L;有机物:肌醇80‑100mg/L、维生素B10.05‑0.15mg/L、维生素B60.05‑0.15mg/L、甘氨酸2‑4mg/L;铁盐:七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈权孙建肖建梅
申请(专利权)人:上海农业科技种子有限公司上海孙桥现代温室种子种苗有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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