生腱蛋白C及其在类风湿关节炎的用途制造技术

本发明专利技术提供了一种确定待测个体的类风湿关节炎状态、或者类风湿关节炎进展、或者用于患有类风湿关节炎的个体的合适疗法的方法，该方法包括下述步骤：(a)测定来自所述待测个体的样品中生腱蛋白C的水平；以及(b)将步骤(a)中测定的生腱蛋白C水平与一个或多个参考值相比较。优选所指的类风湿关节炎是侵蚀性类风湿关节炎。当公开时，随附有图5。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】生腱蛋白C及其在类风湿关节炎的用途
本专利技术涉及生腱蛋白C(韧粘素C，tenascin-C)作为用于炎性紊乱的生物标志物的用途，特别是作为用于类风湿关节炎的血清生物标志物的用途。具体地讲，本专利技术涉及生腱蛋白C作为用于侵蚀性类风湿关节炎的生物标志物的用途。
技术介绍
生腱蛋白C是促炎胞外基质糖蛋白(proinflammatoryextracellularmatrixglycoprotein)(Midwood，etal.(2009)，Nat.Med.，15：774-780)，其通过模式识别受体TLR4的活化而诱导在初级人类巨噬细胞和滑液成纤维细胞中的炎性细胞因子合成。生腱蛋白C是较大的六聚蛋白质，分子量为1.5百万道尔顿。已经在炎症位点例如在类风湿关节炎病人的滑液中以及在肿瘤间质中发现高水平的生腱蛋白C。类风湿关节炎是慢性病，其特征是多个关节的持续的炎症、肿胀和疼痛。随着时间推移，慢性炎症导致关节内的骨组织破坏，并且导致渐进性残疾。类风湿关节炎的一个突出的标志是在其临床表现中的较大的可变性。该可变性扩及至疼痛水平、肿胀关节数量和关节变形程度。类似地，患有类风湿关节炎的病人对任何具体药物治疗的反应也差异很大，一些病人的疾病迹象和征状几乎消除，而其他病人几乎完全没有反应。用于类风湿关节炎的现有诊断方法由美国风湿病学会(AmericanCollegeofRheumatology)确立，包括以下各项内容：1)晨僵持续超过1小时(主要在手指上)；2)在超过3个关节中肿胀；3)手关节(腕关节、掌指关节和近位指节间关节)肿胀；4)在对称的关节中肿胀(左右关节)；5)手的射线照相中的反常发现；6)皮下结节；以及7)通过血液CRP(C-反应蛋白)测试或者抗CCP(抗环状瓜氨酸化肽(citrullinatedpeptide))测试的风湿病检测阳性。该情况中，满足超过4项即被诊断为类风湿关节炎。本专利技术的一个目的是提供一种可供选择的标记物、一种诊断试剂、以及一种检测方法，所述方法可以方便地用于鉴定类风湿关节炎、尤其是用于鉴定侵蚀性类风湿关节炎。侵蚀性类风湿关节炎是患有类风湿关节炎的病人中残疾的主要原因，并且特征是关节骨的骨损失和局部侵蚀。骨侵蚀的测定几乎仅仅基于影像学表现、超声和doplar研究(doplarstudies)，因为对通过活体解剖得到的这些病灶的直接评估是很不实际的。术语“骨侵蚀”描述了在近关节位点的矿化组织的损失，其通常与在皮质内层中的断裂有关。骨侵蚀在疾病早期开始，并且在第一年期间发展最快，因此，快速检测和治疗侵蚀性类风湿关节炎的能力将成为极大益处。
技术实现思路
根据第一方面，本专利技术提供一种确定待测个体的炎性紊乱状态的方法，该方法包括下述步骤：(a)测定来自所述待测个体的样品中生腱蛋白C的水平；以及(b)将步骤(a)中测定的生腱蛋白C水平与一个或多个参考值相比较。炎性紊乱可以是一种或多种类风湿关节炎，尤其是侵蚀性类风湿关节炎、关节强直性脊椎炎、牛皮癣关节炎、狼疮和肌炎。优选地，炎性紊乱是类风湿关节炎，尤其是侵蚀性类风湿关节炎。在一种优选的实施方式中，该方法被用于确定待测个体的类风湿关节炎状态，优选地，待测个体的侵蚀性类风湿关节炎状态。侵蚀性类风湿关节炎被定义为在关节骨中具有至少一个侵蚀性病灶的类风湿关节炎，优选地具有至少5个病灶、优选地具有至少10个病灶、优选地具有至少20个病灶。病灶数目越多，则侵蚀性类风湿关节炎越严重。本专利技术的方法可以用于确定待测个体的侵蚀性类风湿关节炎状态，所述待测个体已经被诊断为患有类风湿关节炎。优选地，本专利技术的方法提供了一种容易的、非侵入性的和便宜的查看患有类风湿关节炎的病人的侵蚀性类风湿关节炎状态的方法。样品可以是血液样品比如全血样品、血浆或者血清。在一个可替代的实施方式中，样品可以是尿液。优选地，样品是血清样品。优选地，该方法被用于确定待测个体是否患有侵蚀性类风湿关节炎。生腱蛋白C是一种新颖的用于炎性紊乱、尤其是类风湿关节炎、更具体地讲侵蚀性风湿性关节炎的血清生物标志物。人类生腱蛋白C的蛋白质序列能够使用登记号码P24821在GenBank上找到，并且在图8中给出了氨基酸序列。在本专利技术的方法中，所有形式的生腱蛋白C都可以被测量。优选地，至少一种320kDa的生腱蛋白C亚型被测量到。优选地，仅仅320kDa亚型的生腱蛋白C被测量。术语“炎性紊乱状态”包括任何可识别的炎性紊乱的表现形式。例如，炎性紊乱状态包括、但不限于：炎性紊乱的存在或者没有，炎性紊乱发展的风险，炎性紊乱的阶段，炎性紊乱的进展，以及炎性紊乱治疗的有效性或待测个体对炎性紊乱治疗的反应。本专利技术的方法可以用于下述任何一个或多个方面，例如，诊断待测个体中的炎性紊乱；评价待测个体发展炎性紊乱的可能性；为患有炎性紊乱的待测个体提供关于预后的建议；监控疾病进展；以及监控炎性紊乱治疗的有效性或待测个体对炎性紊乱治疗的反应。优选地，该方法容许根据对待测个体提供的样品中生腱蛋白C水平的分析来诊断待测个体的炎性紊乱。术语“类风湿关节炎状态”包括任何可识别的疾病的表现形式。例如，类风湿关节炎状态包括、但不限于：类风湿关节炎的存在或者没有，类风湿关节炎发展的风险，类风湿关节炎的阶段，类风湿关节炎的进展，以及类风湿关节炎治疗的有效性或者个体对于类风湿关节炎治疗的反应。在一个优选实施方式中，类风湿关节炎状态是指没有或者存在侵蚀性类风湿关节炎。本专利技术的方法例如可以用于下述任何一个或多个方面：诊断待测个体中的类风湿关节炎状态、尤其是侵蚀性类风湿关节炎；评价待测个体发展类风湿关节炎状态、尤其是侵蚀性类风湿关节炎的可能性；为患有类风湿关节炎状态、尤其是侵蚀性类风湿关节炎待测的个体提供关于预后的建议；监控疾病、尤其是类风湿关节炎的进展；以及监控炎性紊乱治疗的有效性或待测个体对于类风湿关节炎、尤其是侵蚀性类风湿关节炎治疗的反应。优选地，该方法容许根据对由待测个体提供的样品中生腱蛋白C水平的分析来诊断待测个体的类风湿关节炎、尤其是侵蚀性类风湿关节炎。可以通过任何合适的测试方法来测定样品中存在的生腱蛋白C水平，所述测试方法可以包括应用下组中包含的任何一项：免疫测试、光谱测定法、Westernblot、ELISA、免测沉淀法、狭缝印迹法或者点印迹测定法、等电点聚焦、SDS-PAGE、抗体微阵列免疫组织学染色、射电免疫测定(RIA)、荧光免疫分析、使用亲和素-生物素或者链霉亲和素(streptoavidin)-生物素系统的免疫测试等、或前述方法的组合。这些方法已为本领域技术人员所熟知。作为另一种选择，可以通过测定样品中生腱蛋白C的mRNA水平来测量生腱蛋白C水平。mRNA水平能够通过PCT或者任何其它合适技术来测量。优选地，用于与测定的生腱蛋白C水平相比较的参考值是在一个或多个待测个体中观察到的生腱蛋白C水平。所述待测个体未患有任何可检测到的炎性紊乱比如类风湿关节炎、或者炎性紊乱比如类风湿关节炎的任何临床症状，且具有生物标志物生腱蛋白C的所谓的“正常值”。优选地，与正常组织样品中的水平相比，待测样品中生腱蛋白C约50％或更多的提高即是炎性紊乱、例如类风湿关节炎、尤其是侵蚀性类风湿关节炎的症候。优选地，每毫升血清或血浆中生腱蛋白C超过31ng、优选超过33ng本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种确定待测个体的类风湿关节炎状态的方法，该方法包括下述步骤：(a)测定来自所述待测个体的样品中生腱蛋白C的水平；以及(b)将步骤(a)中测定的生腱蛋白C水平与一个或多个参考值相比较。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.12.12 GB 1121280.0;2012.08.20 GB 1214806.01.生腱蛋白C的检测试剂在制备用于通过检测生腱蛋白C来确定待测个体的类风湿关节炎状态的产品中的用途，其中，通过检测生腱蛋白C来确定待测个体的类风湿关节炎状态包括下述步骤：(a)测定来自所述待测个体的血液样品中生腱蛋白C的水平；以及(b)将步骤(a)中测定的生腱蛋白C水平与一个或多个参考值相比较。2.生腱蛋白C的检测试剂在制备用于通过检测生腱蛋白C来确定待测个体中类风湿关节炎进展、或者类风湿关节炎对于特定治疗的反应的试剂的用途，其中，通过检测生腱蛋白C来确定待测个体中类风湿关节炎进展、或者类风湿关节炎对于特定治疗的反应包括下述步骤：(a)测定来自所述待测个体的血液样品中生腱蛋白C的水平；以及(b)将步骤(a)中测定的生腱蛋白C水平与一个或多个参考值相比较。3.生腱蛋白C的检测试剂在制备用于通过检测生腱蛋白C来确定用于患有类风湿关节炎的待测个体的合适治疗的试剂的用途，其中，通过检测生腱蛋白C来确定用于患有类风湿关节炎的待测个体的合适治疗包括下述步骤：(a)测定来自所述待测个体的血液样品中生腱蛋白C的水平；以及(b)将步骤(a)中测定的生腱蛋白C水平与一个或多个参考值相比较；(c)使用步骤(b)中的结果来确定最合适的疗法。4.如前述权利要求中任何一项所述的用途，其特征在于，所述类风湿关节炎是侵蚀性类风湿关节炎。5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，通过检测生腱蛋白C用于确定或者诊断患有类风湿关节炎的待测个体是否患有侵蚀性类风湿关节炎。6.如前述权利要求1～3中任何一项所述的用途，其特征在于，所述血液样品为全血样品、血浆或者血清。7.如前述权利要求1～3中任何一项所述的用途，其特征在于，与参考水平相比，血液样品中生腱蛋白C约50％或更多的提高即是炎性紊乱。8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述参考水平是正常血液样品中的水平。9.如权利要求1～3中任一项所述的用途，其特征在于，超过33ng生腱蛋白C每毫升血清的水平即是类风湿关节炎。10.如权利要求1～3中任一项所述的用途，其特征在于，超过31ng生腱蛋白C每毫升血清的水平即是类...

【专利技术属性】
技术研发人员：金·苏姗妮·米德伍德，
申请(专利权)人：ISIS创新有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB