本发明专利技术公开了一种喜来越橘组织培养的增殖培养基：改良WPM培养基+NAA0.5mg/L+GA0.2mg/L+ZT2-3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，pH为5.2；每升改良WPM培养基中含大量元素：893mg硝酸钾、119mg硫酸铵、370mg硫酸镁、278mg四水合硝酸钙、170mg磷酸二氢钾；铁盐：74.6mg乙二胺四乙酸二钠、55.6mg硫酸亚铁；微量元素：22.3mg硫酸锰、8.6mg硫酸锌、0.025mg硫酸铜、0.25mg钼酸钠、6.2mg硼酸；0.415mg碘化钾；有机物：0.5mg烟酸、0.5mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸毗哆醇、l00mg肌醇、2mg甘氨酸，采用该培养基30d增殖倍数达到12倍以上。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种喜来越橘组织培养的增殖培养基：改良WPM培养基+NAA0.5mg/L+GA0.2mg/L+ZT2-3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，pH为5.2；每升改良WPM培养基中含大量元素：893mg硝酸钾、119mg硫酸铵、370mg硫酸镁、278mg四水合硝酸钙、170mg磷酸二氢钾；铁盐：74.6mg乙二胺四乙酸二钠、55.6mg硫酸亚铁；微量元素：22.3mg硫酸锰、8.6mg硫酸锌、0.025mg硫酸铜、0.25mg钼酸钠、6.2mg硼酸；0.415mg碘化钾；有机物：0.5mg烟酸、0.5mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸毗哆醇、l00mg肌醇、2mg甘氨酸，采用该培养基30d增殖倍数达到12倍以上。【专利说明】
本专利技术涉及植物组培快繁
，主要是一种适宜喜来越橘组培苗增殖的培养 基。
技术介绍
越橘是杜醇花科（Ericaceae)越橘属（Vaccinium)灌木类小楽果果树。其果实为 蓝色或红色，酸甜适中，果实低能量且含有多种抗氧化成份，具有极高的营养价值和医疗保 健作用。越橘果实内的生物活性物质具有明目、消除眼睛疲劳、增强视力的功能。目前，全 国各地的科研单位及企业开展了大量蓝毒组培快繁方面的研究，能够迅速的推广新优品种 成为蓝莓苗的主要育苗手段。由于蓝莓品种较多，所适用的增殖培养基也不尽相同，目前很 多工厂化生产所采用的都是统一的培养基配方，针对性不强，导致不同品种快繁速度不同， 大大影响了蓝莓的工厂化生产，从而增加了生产成本。喜来是越橘的一个品种，适应性广， 是北方地区的主栽品种，通常采用组织培养的方法进行快速繁殖。但由于采用现有的常规 组培快繁技术，喜来增殖倍数低，生长速度慢，影响了喜来越橘的快速发展，优化喜来越橘 培养基配方显得极其重要。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种既能提高喜来越橘的增殖 倍数，又能缩短增殖周期，且增殖苗生长健壮的喜来越橘增殖的培养基配方。 为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案为：一种喜来越橘组织培养的 增殖培养基，包括如下组分：改良WPM培养基+ NAA(萘乙酸）0.5 mg/L+GA (赤霉素）0.2 mg/L+ 玉米素（ZT) 2-3mg · 1^+ 鹿糖 30 g · 1^+ 琼脂 7 g · I71，pH 为 5. 2。 上述改良WPM基本培养基包括如下组分： 大量元素：893mg · I71硝酸钾、119 mg · I71硫酸铵、370 mg · I71硫酸镁、96 mg · I71四 水合硝酸钙、170mg磷酸二氢钾； 微量兀素：22. 3 mg七1硫酸猛、8. 6 mg七1硫酸锌、0· 025 mg七1硫酸铜、0· 25mg .I71 钥酸钠、6. 2 mg · L-1硼酸； 铁盐：74. 6mg · L-1乙二胺四乙酸二钠、55. 6 mg · L-1硫酸亚铁； 有机物：0.5 mg七1烟酸、0.5 mg七1盐酸硫胺素、0.5 mg七1盐酸峨卩多醇、1〇〇 mg吨―1 肌醇、2 mg· Γ1甘氨酸。 上述喜来越橘组织培养的增殖培养基的制备方法，该方法包括如下步骤： (I) 配制改良WPM培养基： (II) 50倍大量元素母液的配制：分别称取44. 65g硝酸钾、5. 95g硫酸铵、18. 5g硫酸 镁、然后用蒸馈水溶解后定容至1000ml，配成母液I ; 称取13. 9g四水合硝酸|丐，用蒸馈水溶解后定容至1000ml，配成母液II ; 称取8. 5g磷酸二氢钾，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液III ; 使用时配制每升增殖培养基取母液I，母液II，母液III各20ml ; (12) 250倍的微量元素母液的配制：称取5. 575g硫酸锰，2. 15g硫酸锌，0. 00625g硫酸 铜，0. 0625g钥酸钠，1. 55g硼酸，0. 10375 g碘化钾，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母 液IV，使用时配制每升增殖培养基取4ml母液IV ; (13) 100倍的EDTA-铁盐母液的配制：称取乙二胺四乙酸二钠，7. 46g ;硫酸亚铁 5. 56g，分别溶解，混合定容至lOOOmL，配成母液V，使用时配制每升增殖培养基取10ml母 液V ; (14) 100倍的有机成分母液的配制：称取0. 2g甘氨酸，0. 005g盐酸硫胺素，0. 005g盐 酸批咳醇，0. 005g烟酸，10g肌醇，用蒸馈水溶解后混合定容至1000ml，配成母液VI，使用时 配制每升增殖培养基取l〇ml母液VI ; (2) 激素母液的配制：称取50mg NAA，先用5ml体积浓度95%酒精溶解，然后加水定容 至100ml，配成0. 5mg · ml/1的NAA母液，使用时配制每升增殖培养基取lmlNAA母液；称取 5mg GA，先用5ml体积浓度95%酒精溶解，然后加水定容至100ml，配成0. 05mg 的GA母 液，使用时配制每升增殖培养基取4mlGA母液；称取50mg玉米素，先用少量0. lmol 溶解，然后加水定容至l〇〇ml，配成0. 5mg · ml/1的玉米素母液，使用时配制每升增殖培养基 取4-6ml玉米素母液； (3) 按上述步骤（11)至步骤（14)中配制每升增殖培养基的用量加入后，再加入琼脂 7g，鹿糖30g，NAA母液lml，GA母液4ml，加热溶解后定容至1L，用0. lmol · I71盐酸调pH 至5. 2,灭菌；待培养基温度降至60-70°C时，在接种台上采用过滤灭菌法添加步骤（2)中配 制的玉米素母液，每升增殖培养基加4ml-6ml玉米素母液，然后在接种台上分装培养基。 本专利技术的增殖培养基的使用方法为：将无菌苗在超净台上接种至配制好的灭菌的 增殖培养基上，在光照强度2000LUX的条件下培养，培养条件为：温度25-27°C，光照时间为 14小时。 有益效果：与现有技术相比，本专利技术的优点是： 1. 组成培养基较传统培养基硝态氮含量增加； 2. 采用该培养基进行增殖，增殖周期短，增殖倍数高； 3. 增殖苗健壮。 【具体实施方式】： 以下结合具体实施例对本专利技术作具体的介绍。 实施例1 : 一种喜来越橘组织培养的增殖培养基，包括如下组分：改良WPM培养基+ NAA 0.5 mg/ L+GA 0· 2 mg/L+ZT 2mg · 1^+ 鹿糖 30 g · I/1-琼脂 7 g · I71，其余为蒸馈水，pH 为 5. 2 ; 其中改良WPM培养基包括以下组分： 大量元素：893mg · I71硝酸钾、119 mg · I71硫酸铵、370 mg · I71硫酸镁、278 mg · I71硝 酸钙、170mg · Γ1磷酸二氢钾； 微量兀素：22. 3 mg七1硫酸猛、8. 6 mg七1硫酸锌、0· 025 mg七1硫酸铜、0· 25mg .I71 钥酸钠、6. 2 mg · L-1硼酸；0· 415 mg · L-1碘化钾； 铁盐：74. 6mg · L-1乙二胺四乙酸二钠、55. 6 mg · L-1硫酸亚铁； 有机物：0.5 mg七1烟酸、0.5 mg七1盐酸硫胺素、0.5 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种喜来越橘组织培养的增殖培养基，其特征在于，包括如下组分：改良WPM培养基+ NAA 0.5 mg/L+GA 0.2 mg/L+ZT 2‑3mg·L‑1+蔗糖30 g·L‑1+琼脂7 g·L‑1，pH为5.2。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王姗，王永平，颜志明，鲍华鹏，许建民，
申请(专利权)人：江苏农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。