一种有增强微循环作用的油莎草总黄酮的提取方法及应用技术

本发明专利技术公开一种有增强微循环作用的油莎草总黄酮的提取方法及应用，选用以油莎草地上茎叶部分为原料，采用动态超高压微射流辅助提取技术从中提取出总黄酮，优化提取工艺，超高压微射流辅助提取工艺参数为，微射流处理压力120MPa，提取温度80℃，乙醇浓度80%，提取时间90min，提取得率为1.46%；并对油莎草总黄酮提取物进行体内外抗氧化性、抑菌性、抗凝血活性和微循环作用的研究，确定了油莎草总黄酮具有良好的体内外抗氧化作用，提取的油莎草总黄酮对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌具有抑菌性，而对黑霉和曲霉无明显的抑菌效果，并具有抗凝血活性和具有增强微循环的显著作用，具有广泛的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种有增强微循环作用的油莎草总黄酮的提取方法及应用
本专利技术涉及天然植物总黄酮的提取制备的
具体的说，本专利技术涉及一种有增强微循环作用的油莎草总黄酮的提取方法及应用的

技术介绍
油莎草(CyperusesculentusLVar.SativusBaeck)是莎草科莎草属多年生草本可作油料和优良牧草用，原产于非洲地中海沿岸。《名医别录》里记载，油莎草的茎叶有主治行气开郁、祛风止痒、宽胞利痰、主胸闷不舒、风疹瘙痒，痈伴随肿毒等功能。有关油莎草块茎方面的研究报道较多,而对其地上茎叶部分的研究未见其报道。地上茎叶中含有蛋白质、糖类、有机酸、黄酮、内酯、香豆素及其甙类、甾体及三萜类、强心苷、挥发油、油脂类等活性成分，而皂苷、蒽醌、生物碱未检出；众多研究表明黄酮类化合物具有广泛的生物活性，包括抗氧化、抗突变、抗衰老、抗肿瘤、抗菌等，是茶以及众多中草药以及食品中重要的功能性成分，对其的研究也越来越广泛与深入。所以提取分理出具有较高生物活性的黄酮类化合物对医药及食品工业是十分重要的。我们对油莎草地上茎叶有效成分进行分析，其中含有黄酮类化合物。黄酮类化合物具有多种药理作用，对人类疾病治疗具有很大的辅助作用。动态超高压微射流（DHPM）是一种特殊形式的高压均质技术，它利用高压使液体物料高速流过狭窄的缝隙时受到强大的剪切力、撞击力以及空穴爆炸力等综合作用，使细胞破碎、促进细胞内容物溢出，从而提高有效成分的提取率的过程。目前DHPM被应用在灭菌、提取和大分子改性等方面，如对木瓜蛋白酶活性的影响、脂肪酸脂质体的制备、对胰蛋白酶的活性、稳定性和构象的影响等。XiaoqinHuang等报道了DHPM对马铃薯叶中总黄酮提取有促进作用，且可提高马铃薯叶中总黄酮抗氧化活性,但是在提取率和对于提取黄酮解决技术环节中还存在诸多不足和缺陷。目前国内外未见针对油莎草地上茎叶为原料，采用动态超高压微射流（DHPM）技术手段研究DHPM对油莎草总黄酮提取得率及抗氧化活性的影响，在DHPM在天然产物有效成分油莎草总黄酮提取方面亟需加以解决和克服。
技术实现思路
针对现有技术中国内外未见针对油莎草地上茎叶为原料采用动态超高压微射流（DHPM）技术手段对油莎草总黄酮提取及抗氧化活性的研究现状，在DHPM在天然产物有效成分油莎草总黄酮提取方面亟需加以解决和克服。本专利技术旨在提供一种有增强微循环作用的油莎草总黄酮的提取方法及应用，采用动态超高压微射流辅助提取法显著提高了总黄酮的提取率及抗氧化活性，油莎草总黄酮具有良好的体内抗氧化作用，并具有抗凝血活性，具有增强微循环的作用，具有广泛的应用价值。本专利技术提供的技术方案：本专利技术以油莎草地上茎叶部分为原料，采用动态超高压微射流辅助提取技术从中提取出总黄酮，优化提取工艺，超高压微射流辅助提取工艺参数为，微射流处理压力120MPa，提取温度80℃，乙醇浓度80%，提取时间90min，提取得率为1.46%；并对油莎草总黄酮提取物进行体内外抗氧化性、抑菌性、抗凝血活性和微循环作用的研究，确定了油莎草总黄酮具有良好的体内外抗氧化作用，提取的油莎草总黄酮对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌具有抑菌性，而对黑霉和曲霉无明显的抑菌效果，并具有抗凝血活性和具有增强微循环的显著作用，具有广泛的应用价值。本专利技术具体提供一种有增强微循环作用的油莎草总黄酮的提取方法，%按照重量百分比计，具体提取方法步骤如下：（1）以油莎草地上茎叶部分为原料，将烘干后的油莎草在粉碎机中粉碎后过100目筛。（2）用石油醚对油莎草粉脱脂，沸程：30-60℃，脱脂温度50℃，时间6-8h后，经50℃烘干2h。（3）乙醇浸润：料液比按重量比1:40配置的80%乙醇提取液放置于4℃冰箱中静置过夜。（4）预均质：使用均质压力为30MPa,均质2次。（5）动态超高压微射流处理：采用120MPa微射流压力处理2次。（6）乙醇回流：以80%乙醇浓度，提取时间90min，提取温度80℃，回流提取2次，离心4000r/min，15min并合并滤液，经过旋转蒸发工艺，蒸发温度30℃，转速40rpm，得浸膏。（7）采用真空冷冻干燥，冷凝温度－50℃，真空度<20Pa条件下制备获得油莎草总黄酮浓缩粉。同时，本专利技术提供按照上述提取方法获得油莎草总黄酮在利用对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌抑菌性中的应用。本专利技术提供按照上述提取方法获得油莎草总黄酮在利用抗凝血活性和增强微循环中的应用。进一步，本专利技术提供了油莎草总黄酮得率及含量的具体计算方式:油莎草总黄酮得率的计算取样液5.0mL于25mL具塞比色管中按照1.3测定吸光度，计算出提取液中总黄酮得率E。计算公式如下:式中：E:油莎草总黄酮为得率，%；C:为经回归方程计算得出的总黄酮浓度，mg/mL；m:为样品质量，g；V1:为提取液总体积，mL；V2:为测定吸光度时样液定容后的体积，mL;V0:为吸取样液的体积，mL。油莎草总黄酮光谱分析采用常见分析手段紫外光谱分析采用：取一定量的油莎草总黄酮配置成0.01mg/mL溶液，在紫外-可见分光光度计中于200-900nm进行扫描。油莎草总黄酮的红外光谱分析采用：油莎草总黄酮与溴化钾按2:100的比例混合，研磨压片,采用傅立叶变换红外谱仪分析。红外光谱条件如下：扫描累积次数64次，分辨率4.0cm-1,扫描范围：400～4000cm-1，采集样品的红外光谱图。通过实施本专利技术具体的
技术实现思路
可以达到以下有益效果：（1）本专利技术以油莎草地上茎叶部分为原料，采用动态超高压微射流辅助提取技术从中提取出总黄酮，优化提取工艺，超高压微射流辅助提取工艺参数为，微射流处理压力120MPa，提取温度80℃，乙醇浓度80%，提取时间90min，提取得率为1.46%；并对油莎草总黄酮提取物进行体内外抗氧化性、抑菌性、抗凝血活性和微循环作用的研究，确定了油莎草总黄酮具有良好的体内外抗氧化作用，提取的油莎草总黄酮对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌具有抑菌性，并具有抗凝血活性和具有增强微循环的显著作用，具有广泛的应用价值。（2）本专利技术通过体内、外抗氧化实验，证明了采用本专利技术提供的制备方法与本领域常见采用的回流提取法、超声波法、微波辅助提取法、超声微波双辅助法相比，经采用传统回流提取法、超声波法、微波辅助提取法、超声微波双辅助法和动态超高压微射流辅助提取法样品清除·OH自由基的试验表明，证明了采用本专利技术提供的制备方法采用动态超高压微射流辅助提取法得到的总黄酮清除·OH自由基、DPPH·自由基的能力和总抗氧化能力均强于本领域常见其它几种提取方法，并具有良好的体内抗氧化作用。（3）本专利技术通过抑菌性试验，证明了采用本专利技术提供的制备方法制备的油莎草总黄酮对枯草芽孢杆菌(MIC=0.5mg/mL，抑菌圈直径=11.9mm)和大肠杆菌(MIC=0.5mg/mL，抑菌圈直径=9.7mm)具有抑菌性。（4）本专利技术通过小鼠微循环及抗凝血作用试验，证明了采用本专利技术提供的制备方法制备的油莎草总黄酮可明显改善小鼠的微循环状况，增大微静脉管径，使毛细血管开放数明显增多，改善机体微循环功能，从而影响机体的外周循环系统。附图说明图1乙醇浓度对得率及DPPH·清除率的影响图。图2提取温度对得率及DPPH·清除率的影响图。图3提取时间对得率及DPPH·清除率的影响图。图4本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种有增强微循环作用的油莎草总黄酮的提取方法，其特征在于，%按照重量百分比计，具体提取方法步骤如下：（1）以油莎草地上茎叶部分为原料，将烘干后的油莎草在粉碎机中粉碎后过100目筛；（2）用石油醚对油莎草粉脱脂，沸程：30‑60℃，脱脂温度50℃，时间6‑8h后，经50℃烘干2h；（3）乙醇浸润：料液比按重量比1:40配置的80%乙醇提取液放置于4℃冰箱中静置过夜；（4）预均质：使用均质压力为30MPa,均质2次；（5）动态超高压微射流处理：采用一定微射流压力处理2次；提取压力120MPa；（6）乙醇回流：以80%乙醇浓度，提取时间90min，提取温度80℃，回流提取2次，离心4000r/min，15min并合并滤液，经过旋转蒸发工艺，蒸发温度30℃，转速40rpm，得浸膏;（7）采用真空冷冻干燥，冷凝温度－50℃，真空度<20Pa条件下制备获得油莎草总黄酮浓缩粉。

【技术特征摘要】
1.一种有增强微循环作用的油莎草总黄酮的提取方法，其特征在于，％按照重量百分比计，具体提取方法步骤如下：(1)以油莎草地上茎叶部分为原料，将烘干后的油莎草在粉碎机中粉碎后过100目筛；(2)用石油醚对油莎草粉脱脂，沸程：30-60℃，脱脂温度50℃，时间6-8h后，经50℃烘干2h；(3)乙醇浸润：料液比按重量比1:40配置的80％乙醇提取液放置于4℃冰箱中静置过夜；(4)预均质：使用均质压力为30MPa,均质2次；(5)动态超高压微射流处理：采用一定微射流压力处理2次；提取压力...

【专利技术属性】
技术研发人员：敬思群，王赛赛，陈婧萱，李倩，聂正兴，杨飞飞，马秀芳，
申请(专利权)人：新疆大学，陈婧萱，
类型：发明
国别省市：新疆;65