阳离子肽和这类肽抑制外毒素产生的用途制造技术

描述了阳离子肽和使用这些阳离子肽在不显著抑制细菌生长的条件下抑制细菌外毒素的产生。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】 相关申请的交叉参考 本申请要求2011年12月21日提交的美国临时申请号61/578, 570的优先权。在 先申请的公开内容被认为是本申请公开的部分（且通过引用纳入本文）。
本专利技术涉及对细菌外毒素产生的抑制，更具体而言涉及阳离子肽和这些阳离子肽 在不显著抑制细菌生长的条件下抑制细菌外毒素的产生的用途。 背景 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)是一种革兰氏阳性细菌，也是 世界上许多疾病的主要原因。该生物普遍存在，预计几乎40 %人类的粘膜表面有菌 落附着。参见 Lowy，N Engl J Med339:520-32 (1988);以及 McCormick 等，Annu Rev Micr〇bi〇155:77-104(2001)。该生物引起的疾病涉及从相对良性的感染（如疔疮和软组织 脓肿）到威胁生命的疾病（如中毒性休克综合征（TSS)、败血症和感染性心内膜炎）。金黄色 葡萄球菌主要通过细胞表面表达和分泌产生大量毒力因子诱发疾病。主要分泌的外毒素之 一是超抗原 TSS 毒素-1 (TSST-1)。参见 Bergdoll 等，Lancetl: 1017-21 (1981) ;Bergdoll 和 Schlievert，Lancet ii :691(1984);以及 Schlievert 等，J Infect Disl43:509-16 (1981)。 TSST-1是经液TSS的病因，这是一种通常与使用某些卫生棉塞且阴道中有金黄色葡萄球 菌建群的健康女性相关的疾病。参见Schlievert，Lancetl:1149_50(1986) ;Schlievert 等，J Clin Microbiol，42:2875-6(2004)。此外，TSST-1 是高达 50%非经液 TSS 的病因， 大多数情况下与上呼吸道感染相关，剩下的非经液TSS中的大部分与超抗原葡萄球菌肠毒 素 B和C相关。超抗原通过诱发生成大量细胞因子导致严重的人类疾病，引发以发热和 呕吐为特征的急性发作疾病以及腹泻（流感样症状）、低血压、晒伤样皮疹、恢复后脱皮和 可变的多器官组分（variable multi-organ component)。参见 Davis 等，N Engl J Med， 303:1429-35(1980) ;Marrack 和 Kappler，Science，248:705-ll(1990);以及 Shands 等，N Engl J Med303:1436-42(1980)。 概述 本专利技术基于以下发现，即阳离子肽能够在不明显抑制细菌生长的条件下抑制细菌 外毒素的产生。本文所描述的阳离子肽可用于抑制外毒素产生，并可被含有医疗或卫生装 置的组合物所包括。例如，可使用本文所描述的一种或多种肽包被或浸渍医疗或卫生装置 的全部或部分表面。所述肽无毒性、无炎症性且无刺激性，适用于治疗脊椎动物对象或者包 被或浸渍用于脊椎动物对象的医疗或卫生装置。 在一个方面，本专利技术描述了长度为10至50个氨基酸（例如长度为18至30个氨 基酸）的肽的特征，其特征在于，带正电荷的氨基酸所占百分比比带负电荷的氨基酸所占 百分比多15%或更高（例如18%或更高、25%或更高、50%或更高、70%或更高或90%或 更高）。这类肽能够在不明显抑制细菌生长的条件下抑制细菌外毒素的产生。所述细菌外 毒素来自以下细菌属组成的组：葡萄状球菌（Staphylococci)、奈瑟氏球菌（Neisseriae)、 链球菌（Streptococci)、沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis)、密螺旋体（Treponemae)、 嗜血菌（Haemophilus)、博德特氏菌（Bordetellae)、阴道加德纳菌（Gardnerella vaginalis)、芽抱杆菌（Bacillus)、梭菌（Clostridium)、大肠埃希氏杆菌（Escherichia coli)、霍乱弧菌（Vibrio cholerae)、沙门氏菌（Salmonella)、志贺氏菌（Shigellaa)、 分枝杆菌（Mycobacteria)、弗朗西斯氏菌（Francisella)、耶尔森菌（Yersinia)、伯克霍 尔德氏菌（Burkholderia)、假单胞菌（Pseudomonas)和布鲁氏菌（Brucella)。所述带 正电荷的氨基酸可包括一种或多种赖氨酸、赖氨酸类似物、精氨酸、精氨酸类似物、组氨 酸或组氨酸类似物。肽的氨基酸序列可以是SFPTTKTYFPHFDLSHGSAQVK(SEQ ID N0:3)、 STKPFFYFLHTQVKASPTSHDG(SEQ ID N0:4)、SKPKKKKYKPHKKKSHKSAKKK(SEQ ID N0:5)或 SKPKKKTYKPHKDLSHGSAKKK(SEQ ID N0:6)〇 在另一个方面，本专利技术描述了包含一种或多种肽和一种药学上可接受运载体的组 合物的特征，其特征在于，每种肽均为上文所述肽，以及一种抑制细胞外毒素产生的方法， 所述方法包括将脊椎动物对象与这类组合物接触。可制备所述组合物用于皮下给药、肌肉 内给药、口服给药、局部给药或阴道给药。 本专利技术还描述了包括一种医学或卫生装置（例如阴道棉塞、外科缝合线、外科绷 带、外科敷料、渗透泵或造口术装置）的组合物；以及任何一种或多种上文所述肽的特征。 可使用一种或多种肽浸渍全部或部分所述装置或者包被所述装置的全部或部分表面。 本专利技术还描述了一种抑制外毒素产生的方法的特征。所述方法包括将上文所述的 一种或多种肽递送至脊椎动物对象的某一组织或器官，其特征在于，所述组织或器官被一 种细菌感染，或存在被其感染的风险。 除非另外定义，否则，本文中使用的所有技术和科学术语与本专利技术所属领域普通 技术人员通常所理解的含义相同。虽然在本专利技术的实施或测试中可以采用类似于或等同于 本文所述的那些方法和材料，但是下文描述了示例性的方法和材料。本文中述及的所有出 版物、专利申请、专利、Genbank?登录号和其他参考文献都通过引用全文纳入本文。在抵 触的情况下，以本申请（包括定义在内）为准。材料、方法和实施例都仅是说明性的，并不 意在构成限制。 能够从下文中的详述和所附权利要求很容易地了解本专利技术的其他特征和优点。 专利技术详述 本专利技术描述了阳离子肽、包含一种或多种阳离子肽的组合物、包括这类组合物的 制造制品以及使用所述阳离子肽抑制细菌外毒素产生的方法的特征。如实施例中阐述的， 所述阳离子肽具有TSST-1抑制活性，独立于抗微生物活性，且无炎症性、无刺激性。不受特 定机制的限制，本文所述阳离子肽被认为能够通过两种组分系统抑制信号传导，与血红蛋 白的α-珠蛋白链类似，结果是在不抑制细菌生长的条件下减少TSST-1的产生。对金黄色 葡萄球菌所产生外毒素的抑制会导致该生物无法在人体表面建群，从而防止金黄色葡萄球 菌疾病的发生。本文所述阳离子肽代表了一类能够干扰金黄色葡萄球菌功能的分子，但缺 乏抗微生物效果。此外，超抗原（如TSST-1)对于金黄色葡萄球菌引发严重疾病（如坏死 性肺炎）的能力十分关键（参见例如Schlieve本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的肽，所述肽抑制细菌外毒素的产生且基本不抑制细菌生长，所述肽长度为10至50个氨基酸，且带正电荷的氨基酸所占百分比比带负电荷的氨基酸的数目高15％或更高。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.12.21 US 61/578,5701. 一种分离的肽，所述肽抑制细菌外毒素的产生且基本不抑制细菌生长，所述肽长度 为10至50个氨基酸，且带正电荷的氨基酸所占百分比比带负电荷的氨基酸的数目高15% 或更1?。2. 如权利要求1所述的肽，所述细菌外毒素来自选自以下所述的细菌属：葡萄状球 菌（Staphylococci)、奈瑟氏球菌（Neisseriae)、链球菌（Streptococci)、沙眼衣原体 (Chlamydia trachomatis)、密螺旋体（Treponemae)、嗜血菌（Haemophilus)、博德特氏 菌（Bordetellae)、阴道加德纳菌（Gardnerella vaginalis)、芽抱杆菌（Bacillus)、梭 菌（Clostridium)、大肠埃希氏杆菌（Escherichia coli)、霍乱弧菌（Vibrio cholerae)、 沙门氏菌（Salmonella)、志贺氏菌（Shigellaa)、分枝杆菌（Mycobacteria)、弗朗西斯氏 菌（Francisella)、耶尔森菌（Yersinia)、伯克霍尔德氏菌（Burkholderia)、假单胞菌 (Pseudomonas)和布鲁氏菌（Brucella)。3. 如权利要求1或2所述的肽，所述肽的长度为18至30个氨基酸。4. 如权利要求1-3中任一项所述的肽，其中带正电荷的氨基酸所占百分比比带负电荷 的氨基酸的数目高18 %或更高。5. 如权利要求1-3中任一项所述的肽，其中带正电荷的氨基酸所占百分比比带负电荷 的氨基酸的数目高25%或更高。6. 如权利要求1-3中任一项所述的肽，其中带正电荷的氨基酸所占百分比比带负电荷 的氨基酸的数目高50%或更高。7. 如权利要求1-3中任一项所述的肽，其中带正电荷的氨基酸所占百分比比带负电荷 的氨基酸的数目高70%或更高。8. 如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·M·施利弗特，
申请(专利权)人：明尼苏达大学董事会，
类型：发明
国别省市：美国;US